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模式识别受体在中华绒螯蟹特异性先天免疫中的功能研究

中文摘要第1-9页
ABSTRACT第9-16页
第一章 文献综述第16-34页
 第一节 无脊椎动物免疫系统第16-24页
   ·引言第16-18页
   ·细胞免疫第18-21页
   ·体液免疫第21-24页
 第二节 无脊椎动物免疫特异性分子机制第24-31页
   ·引言第24-26页
   ·免疫分子通过基因组分子多样性产生的免疫特异性第26-27页
   ·免疫分子之间通过协同交互作用产生的免疫特异性第27-30页
   ·免疫分子通过剂量效应产生的免疫特异性第30-31页
 第三节 研究意义及研究方案第31-34页
   ·研究意义第31-33页
   ·研究方案第33-34页
第二章 基于RNA-Seq的中华绒螯蟹免疫特异性研究第34-53页
 第一节 前言第34-35页
 第二节 材料与方法第35-38页
   ·实验动物免疫刺激与样本收集第35-36页
   ·核酸提取和质量检验第36-37页
   ·基于RNA-Seq的高通量二代测序及文库构建第37-38页
   ·数据分析第38页
 第三节 结果第38-49页
   ·核酸提取及质量控制第38-39页
   ·测序结果统计分析第39-40页
   ·序列组装第40-41页
   ·序列比对分析和基因注释第41-44页
   ·KEGG代谢通路注释分析第44页
   ·免疫基因注释第44页
   ·免疫基因的差异诱导表达特异性分析第44-49页
 第四节 讨论第49-53页
第三章 C型凝集素家族分子EsLecA和EsLecG的免疫特异性功能研究第53-79页
 第一节 前言第53-55页
 第二节 材料与方法第55-62页
   ·实验动物免疫刺激与样本收集第55-56页
   ·总RNA提取和第一链cDNA合成第56页
   ·EsLecA和EsLecG的基因全长克隆第56-57页
   ·序列比对分析和聚类分析第57页
   ·EsLecA和EsLecG的组织表达检测第57页
   ·LPS免疫刺激后的EsLecA和EsLecG的诱导表达检测第57-59页
   ·数据统计分析第59页
   ·重组蛋白表达载体构建第59-60页
   ·重组rEsLectin蛋白的表达和纯化第60页
   ·蛋白印记检测实验第60-61页
   ·重组rEsLectins蛋白的微生物凝集活性检测第61页
   ·重组rEsLectins蛋白的微生物生长抑制活性检测第61页
   ·重组rEsLectins蛋白的抗菌活性检测第61-62页
   ·重组rEsLectins蛋白的细胞调理作用检测第62页
 第三节 结果第62-71页
   ·EsLecA和EsLecG基因的克隆和序列分析第62-64页
   ·EsLecA和EsLecG的同源序列聚类分析第64-65页
   ·EsLecA和EsLecG的组织表达分析第65页
   ·LPS体内免疫刺激后EsLecA和EsLecG的诱导表达模式分析第65-67页
   ·重组rEsLectins蛋白的表达和纯化第67-68页
   ·重组rEsLectin蛋白的微生物结合活性第68-69页
   ·重组rEsLectin蛋白的微生物凝集活性第69页
   ·重组rEsLectin蛋白的微生物生长抑制活性和抗菌活性第69页
   ·重组rEsLectin蛋白的血细胞调理活性分析第69-71页
 第四节 讨论第71-79页
第四章 肝胰腺特异性表达C型凝集素家族分子EsLecF的免疫特异性功能研究第79-95页
 第一节 引言第79-80页
 第二节 材料与方法第80-81页
   ·实验动物体内免疫刺激和样品收集第80页
   ·总RNA的提取和第一条cDNA链的合成第80页
   ·EsLecF基因cDNA全长克隆第80页
   ·EsLecF基因表达模式分析第80页
   ·重组蛋白表达载体的构建第80页
   ·重组rEsLecF蛋白的表达和纯化第80页
   ·蛋白印记检测实验第80页
   ·重组rEsLecF蛋白的微生物凝集实验第80页
   ·重组rEsLecF蛋白的微生物生长抑制实验第80页
   ·重组rEsLecF蛋白的抗菌活性检测第80-81页
   ·重组rEsLecF蛋白的细胞调理活性检测第81页
 第三节 结果第81-89页
   ·EsLecF基因序列分析第81页
   ·EsLecF氨基酸序列聚类分析第81-83页
   ·EsLecF的转录表达模式分析第83-84页
   ·重组rEsLecF蛋白的表达与纯化第84-85页
   ·重组rEsLecF蛋白的微生物结合活性第85页
   ·重组rEsLecF蛋白的微生物凝集活性第85页
   ·重组rEsLecF蛋白的微生物生长抑制活性和杀菌活性第85-89页
   ·重组rEsLecF蛋白的细胞调理活性第89页
 第四节 讨论第89-95页
第五章 免疫球蛋白超家族基因Dscam的外显子可变剪切及其免疫诱导特异性研究第95-114页
 第一节 前言第95-97页
 第二节 材料方法第97-100页
   ·实验动物的免疫刺激和样品收集第97页
   ·总RNA抽提和cDNA第一链合成第97页
   ·EsDscam基因全长的克隆第97-99页
   ·EsDscam外显子的可变剪切检测第99页
   ·序列比对分析和聚类分析第99页
   ·EsDscam基因的组织表达和免疫诱导表达检测第99页
   ·EsDscam跨模型和分泌型可变剪切亚型的检测第99页
   ·蛋白印记检测第99页
   ·EsDscam的细胞定位第99页
   ·数据统计分析第99-100页
 第三节 结果第100-108页
   ·EsDscam的序列分析第100-102页
   ·EsDscam外显子可变剪切第102-103页
   ·EsDscam序列比对分析和聚类分析第103-106页
   ·EsDscam的组织表达特异性第106页
   ·EsDscam的差异免疫诱导表达特异性分析第106-108页
   ·EsDscam的跨膜型和分泌型可变剪切亚型检测第108页
   ·EsDscam的亚细胞定位第108页
 第四节 讨论第108-114页
本研究的特色与创新点第114-115页
参考文献第115-131页
附录第131-133页
致谢第133-134页

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