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禽波氏杆菌免疫PCR检测方法的建立及其亚单位疫苗的研制

符号说明及缩略词第1-10页
中文摘要第10-14页
ABSTRACT第14-18页
1 引言第18-33页
   ·禽波氏杆菌的研究现状第18-27页
     ·禽波氏杆菌形态及培养特性第18页
     ·禽波氏杆菌的生化特性第18-19页
     ·禽波氏杆菌的抵抗力第19页
     ·禽波氏杆菌的致病因子第19-20页
     ·禽波氏杆菌病的流行病学第20-22页
     ·禽波氏杆菌病的临床症状和病理变化第22-23页
     ·禽波氏杆菌病的诊断方法第23-26页
     ·禽波氏杆菌病的防治第26-27页
   ·免疫 PCR 的研究进展第27-31页
     ·免疫 PCR 的基本原理第27页
     ·免疫 PCR 的类型第27-29页
     ·免疫 PCR 系统第29-31页
     ·免疫 PCR 的应用前景第31页
   ·本研究的目的意义第31-33页
2 材料与方法第33-54页
   ·材料第33-36页
     ·菌株、杂交瘤细胞株、质粒第33页
     ·引物第33页
     ·试验动物第33页
     ·试剂及培养基第33-34页
     ·主要培养基和试剂的配制第34-36页
     ·仪器第36页
   ·方法第36-54页
     ·禽波氏杆菌外膜蛋白单克隆抗体的抗原识别位点分析第36-40页
     ·免疫 PCR 技术检测禽波氏杆菌方法的建立第40-44页
     ·免疫 PCR 检测禽波氏杆菌的应用研究第44-46页
     ·禽波氏杆菌分离株抗原性与免疫原性差异分析第46-48页
     ·禽波氏杆菌亚单位疫苗的研制及免疫效果研究第48-54页
3 结果与分析第54-75页
   ·禽波氏杆菌外膜蛋白单克隆抗体的抗原识别位点分析第54-57页
     ·禽波氏杆菌外膜蛋白提取结果第54页
     ·间接 ELISA 法检测单克隆抗体效价结果第54页
     ·禽波氏杆菌外膜蛋白最适包被浓度测定第54-55页
     ·单克隆抗体饱和曲线的制定结果第55页
     ·单克隆抗体相加 ELISA 试验结果第55-56页
     ·Western-blot 鉴定结果第56-57页
   ·免疫 PCR 技术检测禽波氏杆菌方法的建立第57-62页
     ·禽波氏杆菌分离株 Ba11 和 Ba15 的培养特性第57页
     ·禽波氏杆菌多克隆抗体效价的测定结果第57-58页
     ·生物素标记的报告 DNA 分子的制备第58页
     ·报告 DNA 最适浓度的确定第58页
     ·链霉亲和素最适浓度的确定第58-60页
     ·间接 ELSIA 法对禽波氏杆菌的灵敏度检测结果第60页
     ·免疫 PCR 法对禽波氏杆菌的灵敏度检测结果第60页
     ·免疫 PCR 方法对禽波氏杆菌的特异性检测结果第60-62页
   ·免疫 PCR 检测禽波氏杆菌的应用研究第62-65页
     ·实验室保存菌株的检测第62页
     ·病料组织的检测结果第62-63页
     ·血清样品的检测结果第63页
     ·人工感染雏鸡的症状第63-65页
     ·免疫 PCR 方法对禽波氏杆菌定植时间的检测第65页
   ·禽波氏杆菌分离株抗原性与免疫原性差异分析第65-69页
     ·禽波氏杆菌分离株的培养特性第65-66页
     ·禽波氏杆菌分离株抗原性测定结果第66页
     ·禽波氏杆菌分离株交叉凝集试验结果第66-67页
     ·免疫琼脂扩散试验结果第67页
     ·各免疫组鸡血清抗体效价的结果第67页
     ·攻毒保护试验结果第67-69页
   ·禽波氏杆菌亚单位疫苗的研制及免疫效果研究第69-75页
     ·禽波氏杆菌外膜蛋白的提取与含量测定第69页
     ·松花粉多糖的提取第69-70页
     ·禽波氏杆菌亚单位疫苗的制备第70页
     ·禽波氏杆菌亚单位疫苗的无菌检验及安全检验结果第70页
     ·血清抗体水平的测定结果第70页
     ·血液淋巴细胞比率的测定结果第70-71页
     ·脾淋巴细胞转化率的测定结果第71-72页
     ·外周血中 CD4+、CD8+T 淋巴细胞亚群检测第72页
     ·血清中 IFN-γ的检测结果第72-73页
     ·血清中 IL-2 含量的测定第73-74页
     ·免疫保护试验结果第74-75页
4 讨论第75-84页
5 结论第84-85页
参考文献第85-100页
致谢第100-101页
攻读学位期间论文发表、录用情况第101页

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