| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-30页 |
| ·异源三聚体-G 蛋白复合体 | 第14-16页 |
| ·G 蛋白α亚基 | 第14-15页 |
| ·G 蛋白β亚基 | 第15-16页 |
| ·G 蛋白γ亚基 | 第16页 |
| ·植物 G 蛋白参与多种信号传导过程 | 第16-21页 |
| ·G 蛋白参与植物的生长及形态发育过程 | 第16-17页 |
| ·G 蛋白参与激素信号和糖信号的应答反应 | 第17-19页 |
| ·G 蛋白参与气孔运动和离子通道的调控 | 第19页 |
| ·G 蛋白参与植物对病原体的防卫作用 | 第19-20页 |
| ·G 蛋白参与植物的光信号转导 | 第20-21页 |
| ·G 蛋白的互作蛋白研究进展 | 第21-23页 |
| ·蛋白互作的研究方法 | 第23-28页 |
| ·经典的酵母双杂系统 | 第24页 |
| ·酵母三杂交系统 | 第24-25页 |
| ·反向 Ras 拯救系统 | 第25-26页 |
| ·以 G 蛋白途径为基础的酵母双杂交系统 | 第26页 |
| ·泛素分离系统 | 第26-27页 |
| ·双分子荧光互补（BiFC）及能量共振转移（FRET） | 第27-28页 |
| ·Pull-down 和 Co-IP 验证蛋白互作 | 第28页 |
| ·本研究的目的意义 | 第28-29页 |
| ·技术路线 | 第29-30页 |
| 第二章 拟南芥均一化 cDNA 文库构建 | 第30-40页 |
| ·实验材料 | 第30页 |
| ·试剂与仪器 | 第30页 |
| ·试剂 | 第30页 |
| ·仪器 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-36页 |
| ·野生型拟南芥总 RNA 提取 | 第30-31页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第31-32页 |
| ·PCR 扩增合成 ds cDNA | 第32页 |
| ·ds cDNA 的纯化 | 第32页 |
| ·ds cDNA 的均一化处理 | 第32-33页 |
| ·均一化酶的浓度及均一化 cDNA 的 PCR 扩增循环数的优化 | 第33-34页 |
| ·均一化 cDNA 的 PCR 扩增及纯化 | 第34页 |
| ·均一化 ds cDNA 的酶切及回收 | 第34-35页 |
| ·ds cDNA 与载体 pPR3N 的连接 | 第35页 |
| ·文库质粒的扩增 | 第35页 |
| ·文库菌体的收集、保存和文库质粒的制备 | 第35-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-40页 |
| ·拟南芥总 RNA 提取 | 第36页 |
| ·ds cDNA 的合成 | 第36-37页 |
| ·ds cDNA 均一化条件优化 | 第37页 |
| ·ds cDNA 与 pPR3N 的酶切、连接及转化 | 第37-40页 |
| 第三章 泛素分离系统筛选文库 | 第40-50页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·试剂与仪器 | 第40页 |
| ·试剂 | 第40页 |
| ·仪器 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-44页 |
| ·诱饵载体 pDHB1-GPA1 的构建 | 第40-42页 |
| ·诱饵载体的功能验证 | 第42页 |
| ·诱饵载体 pDHB1-GPA1 筛库条件优化 | 第42-43页 |
| ·利用泛素分离系统筛选文库 | 第43-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-50页 |
| ·诱饵载体构建 | 第44-45页 |
| ·诱饵载体功能验证 | 第45-46页 |
| ·诱饵载体筛库条件优化 | 第46-48页 |
| ·泛素分离系统筛选文库 | 第48-49页 |
| ·文库质粒的转化效率 | 第49-50页 |
| 第四章 GPA1 与 AtBCB 的互作验证及功能分析 | 第50-59页 |
| ·材料 | 第50页 |
| ·试剂与仪器 | 第50页 |
| ·试剂 | 第50页 |
| ·仪器 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50-52页 |
| ·泛素分离系统验证 GPA1 与 AtBCB 互作 | 第50-51页 |
| ·GPA1 和 AtBCB 的亚细胞定位和双分子荧光互补（BiFC） | 第51页 |
| ·gpa1-4 和 bcb 纯合突变体鉴定 | 第51页 |
| ·GPA1 和 AtBCB 的表达分析 | 第51页 |
| ·铝离子胁迫处理下丙二醛含量测定 | 第51-52页 |
| ·铝离子胁迫相关基因的表达分析 | 第52页 |
| ·结果与分析 | 第52-59页 |
| ·酵母双杂交 | 第52-53页 |
| ·GPA1 与 ATBCB 的亚细胞定位及双分子荧光互补 | 第53-54页 |
| ·纯合突变体的鉴定 | 第54-55页 |
| ·铝胁迫下 GPA1 和 AtBCB 的表达分析 | 第55-56页 |
| ·铝离子胁迫下膜脂过氧化程度 | 第56-57页 |
| ·铝离子胁迫下相关基因表达变化 | 第57-59页 |
| 第五章 讨论与结论 | 第59-62页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| ·cDNA 文库构建 | 第59页 |
| ·泛素分离系统有利于发现新的 GPA1 的互作蛋白 | 第59-60页 |
| ·GPA1 和 AtBCB 参与拟南芥对铝胁迫的应答反应 | 第60-61页 |
| ·结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-72页 |
| 附录 1 | 第72-73页 |
| 附录 2 | 第73-74页 |
| 缩略词 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 个人简介 | 第76页 |
