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脂多糖诱导绵羊肺泡巨噬细胞转录组分析和NK-Lysin、GM-CSF表达及生物学功能研究

中文摘要第1-8页
Abstract第8-10页
目录第10-13页
英文缩略词表第13-14页
引言第14-15页
第一章 文献综述 抗菌肽研究进展第15-21页
 1 抗菌肽的分类与特点第15-16页
   ·抗菌肽的分类第15-16页
   ·抗菌肽的结构特点第16页
 2 影响抗菌肽活性的因素第16-17页
   ·抗菌肽自身因素第16-17页
   ·生物膜因素第17页
 3 抗菌肽的生物活性第17-19页
   ·抗细菌活性第17-18页
   ·抗病毒活性第18页
   ·抗肿瘤活件第18-19页
   ·抗寄生虫活性第19页
 4 抗菌肽的应用前景第19-21页
   ·饲料添加剂第19页
   ·抗菌肽在临床中的应用第19-21页
第二章 试验部分第21-70页
 试验一 绵羊巨噬细胞转录组文库构建以及Solexa测序第21-33页
  摘要第21页
  1 材料与方法第21-24页
   ·材料第21-22页
   ·方法第22-24页
  2 结果第24-31页
   ·绵羊肺泡巨噬细胞形态观察第24页
   ·RNA检测第24-25页
   ·转录组测序第25-31页
  3 讨论第31-33页
 试验二 NK-Lysin基因在毕赤酵母中的诱导表达第33-45页
  摘要第33页
  1 材料与方法第33-39页
   ·材料第33-34页
   ·方法第34-39页
  2 结果第39-43页
   ·RT-PCR扩增与克隆载体酶切检测第39-40页
   ·绵羊NK-Lysin基因进化树分析及蛋白结构预测第40-41页
   ·重组质粒pPIC9K-NK-Lysin酶切鉴定第41-42页
   ·多重拷贝子的筛选与鉴定第42页
   ·诱导表达及SDS-PAGE检测第42-43页
  3 讨论第43-45页
 试验三 NK-Lysin基因在大肠杆菌中诱导表达及活性的初步检测第45-53页
  摘要第45页
  1 材料与方法第45-48页
   ·材料第45-46页
   ·方法第46-48页
  2 结果第48-52页
   ·pET-32α-NK-Lysin质粒酶切鉴定第48页
   ·NK-Lysin蛋白在DE_3中的表达第48-49页
   ·NK-Lysin重组蛋白诱导条件优化第49-50页
   ·NK-Lysin重组蛋白纯化与Western Blot分析第50-51页
   ·抑菌活性检测第51-52页
  3 讨论第52-53页
 试验四 NK-Lysin在LPS不同诱导条件下及免疫器官中表达量动态分析第53-61页
  摘要第53页
  1 材料与方法第53-56页
   ·材料第53页
   ·方法第53-56页
  2 结果第56-59页
   ·NK-Lysin与GAPDH基因的克隆第56页
   ·标准曲线生成第56-58页
   ·绵羊NK-Lysin基因在不同诱导情况下表达量分析第58-59页
   ·绵羊NK-Lysin基因在不同免疫器官中的表达量分析第59页
  3 讨论第59-61页
 试验五 绵羊GM-CSF原核表达及对免疫细胞影响的观察第61-70页
  摘要第61页
  1 材料与方法第61-63页
   ·材料第61页
   ·方法第61-63页
  2 结果第63-68页
   ·RT-PCR扩增第63-64页
   ·基因序列分析第64-65页
   ·GM-CSF蛋白结构的预测第65页
   ·pET-32α-GM-CSF质粒酶切鉴定第65-66页
   ·重组菌体蛋白的诱导表达第66-67页
   ·GM-CSF对淋巴细胞增殖的影响第67-68页
  3 讨论第68-70页
结论第70页
创新点第70-71页
参考文献第71-79页
附录第79-81页
致谢第81-83页
作者简历第83-84页
导师评阅表第84页

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