中文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
目录 | 第10-13页 |
英文缩略词表 | 第13-14页 |
引言 | 第14-15页 |
第一章 文献综述 抗菌肽研究进展 | 第15-21页 |
1 抗菌肽的分类与特点 | 第15-16页 |
·抗菌肽的分类 | 第15-16页 |
·抗菌肽的结构特点 | 第16页 |
2 影响抗菌肽活性的因素 | 第16-17页 |
·抗菌肽自身因素 | 第16-17页 |
·生物膜因素 | 第17页 |
3 抗菌肽的生物活性 | 第17-19页 |
·抗细菌活性 | 第17-18页 |
·抗病毒活性 | 第18页 |
·抗肿瘤活件 | 第18-19页 |
·抗寄生虫活性 | 第19页 |
4 抗菌肽的应用前景 | 第19-21页 |
·饲料添加剂 | 第19页 |
·抗菌肽在临床中的应用 | 第19-21页 |
第二章 试验部分 | 第21-70页 |
试验一 绵羊巨噬细胞转录组文库构建以及Solexa测序 | 第21-33页 |
摘要 | 第21页 |
1 材料与方法 | 第21-24页 |
·材料 | 第21-22页 |
·方法 | 第22-24页 |
2 结果 | 第24-31页 |
·绵羊肺泡巨噬细胞形态观察 | 第24页 |
·RNA检测 | 第24-25页 |
·转录组测序 | 第25-31页 |
3 讨论 | 第31-33页 |
试验二 NK-Lysin基因在毕赤酵母中的诱导表达 | 第33-45页 |
摘要 | 第33页 |
1 材料与方法 | 第33-39页 |
·材料 | 第33-34页 |
·方法 | 第34-39页 |
2 结果 | 第39-43页 |
·RT-PCR扩增与克隆载体酶切检测 | 第39-40页 |
·绵羊NK-Lysin基因进化树分析及蛋白结构预测 | 第40-41页 |
·重组质粒pPIC9K-NK-Lysin酶切鉴定 | 第41-42页 |
·多重拷贝子的筛选与鉴定 | 第42页 |
·诱导表达及SDS-PAGE检测 | 第42-43页 |
3 讨论 | 第43-45页 |
试验三 NK-Lysin基因在大肠杆菌中诱导表达及活性的初步检测 | 第45-53页 |
摘要 | 第45页 |
1 材料与方法 | 第45-48页 |
·材料 | 第45-46页 |
·方法 | 第46-48页 |
2 结果 | 第48-52页 |
·pET-32α-NK-Lysin质粒酶切鉴定 | 第48页 |
·NK-Lysin蛋白在DE_3中的表达 | 第48-49页 |
·NK-Lysin重组蛋白诱导条件优化 | 第49-50页 |
·NK-Lysin重组蛋白纯化与Western Blot分析 | 第50-51页 |
·抑菌活性检测 | 第51-52页 |
3 讨论 | 第52-53页 |
试验四 NK-Lysin在LPS不同诱导条件下及免疫器官中表达量动态分析 | 第53-61页 |
摘要 | 第53页 |
1 材料与方法 | 第53-56页 |
·材料 | 第53页 |
·方法 | 第53-56页 |
2 结果 | 第56-59页 |
·NK-Lysin与GAPDH基因的克隆 | 第56页 |
·标准曲线生成 | 第56-58页 |
·绵羊NK-Lysin基因在不同诱导情况下表达量分析 | 第58-59页 |
·绵羊NK-Lysin基因在不同免疫器官中的表达量分析 | 第59页 |
3 讨论 | 第59-61页 |
试验五 绵羊GM-CSF原核表达及对免疫细胞影响的观察 | 第61-70页 |
摘要 | 第61页 |
1 材料与方法 | 第61-63页 |
·材料 | 第61页 |
·方法 | 第61-63页 |
2 结果 | 第63-68页 |
·RT-PCR扩增 | 第63-64页 |
·基因序列分析 | 第64-65页 |
·GM-CSF蛋白结构的预测 | 第65页 |
·pET-32α-GM-CSF质粒酶切鉴定 | 第65-66页 |
·重组菌体蛋白的诱导表达 | 第66-67页 |
·GM-CSF对淋巴细胞增殖的影响 | 第67-68页 |
3 讨论 | 第68-70页 |
结论 | 第70页 |
创新点 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-79页 |
附录 | 第79-81页 |
致谢 | 第81-83页 |
作者简历 | 第83-84页 |
导师评阅表 | 第84页 |