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诺加霉素产生菌中诺加糖与诺加糖胺生物合成基因功能的研究

中文摘要第1-7页
Abstract第7-11页
英文缩写说明第11-12页
第1章 绪论第12-22页
   ·蒽环类抗生素简介第12-16页
   ·诺加霉素的生物合成途径第16-18页
   ·链霉菌中基因中断和基因置换第18-19页
     ·同源重组单交换第18-19页
     ·同源重组双交换基因置换第19页
   ·选择基因失活方式时的考虑因素第19-20页
   ·蒽环类抗生素产生菌的基因工程改造第20-21页
   ·立题依据第21-22页
第2章 snogA、snogC、snogK基因功能的研究第22-44页
   ·仪器和材料第22-25页
     ·质粒第22页
     ·菌种第22-23页
     ·培养基第23页
     ·主要溶液和缓冲液第23-24页
     ·主要生化试剂第24页
     ·培养基成分第24页
     ·主要仪器设备第24-25页
   ·实验方法第25-33页
     ·菌种的培养和保藏第25页
     ·链霉菌总 DNA 的抽提第25-26页
     ·大肠杆菌感受态的制备第26页
     ·大肠杆菌质粒的转化第26页
     ·大肠杆菌质粒的抽提第26-27页
     ·DNA 片段的回收第27页
     ·单一 PCR 片段或酶切片段的回收第27页
     ·PCR 反应体系第27-29页
     ·单交换插入失活质粒的构建第29-30页
     ·黑胡桃链霉菌与 E.coli ET12567(pUZ8002)之间的接合转移第30-31页
     ·单交换基因突变株的筛选第31页
     ·HPLC 的检测方法和条件第31-32页
     ·黑胡桃链霉菌及突变株的发酵第32页
     ·核酸片段的脱磷反应与回收第32页
     ·菌株的自然分离第32-33页
   ·结果第33-42页
     ·snogA、snogC 和 snogK 基因的克隆和序列同源性比对第33页
     ·重组质粒的构建及酶切验证第33-36页
     ·重组菌株的获得第36页
     ·重组菌株的基因型验证第36-38页
     ·单交换突变株的发酵第38-42页
       ·突变菌株 mLMX-3-59-K 发酵产物 K 的初步研究第41-42页
   ·本章小结第42-44页
第3章 dnrJ原位置换转氨酶基因snogI的研究第44-54页
   ·材料和方法第44-45页
     ·部分仪器、材料和方法第44页
     ·质粒和菌种第44-45页
     ·双交换基因突变株的筛选第45页
   ·结果第45-53页
     ·用于基因置换的重组质粒的构建第45-51页
     ·dnrJ 置换 snogI 基因突变株的筛选第51-52页
     ·dnrJ 置换 snogI 基因突变株的发酵第52-53页
   ·本章小结第53-54页
全文总结第54-56页
致谢第56-57页
参考文献第57-60页
附录第60-66页
攻读学位期间发表的学术论文第66页

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