中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
英文缩写说明 | 第11-12页 |
第1章 绪论 | 第12-22页 |
·蒽环类抗生素简介 | 第12-16页 |
·诺加霉素的生物合成途径 | 第16-18页 |
·链霉菌中基因中断和基因置换 | 第18-19页 |
·同源重组单交换 | 第18-19页 |
·同源重组双交换基因置换 | 第19页 |
·选择基因失活方式时的考虑因素 | 第19-20页 |
·蒽环类抗生素产生菌的基因工程改造 | 第20-21页 |
·立题依据 | 第21-22页 |
第2章 snogA、snogC、snogK基因功能的研究 | 第22-44页 |
·仪器和材料 | 第22-25页 |
·质粒 | 第22页 |
·菌种 | 第22-23页 |
·培养基 | 第23页 |
·主要溶液和缓冲液 | 第23-24页 |
·主要生化试剂 | 第24页 |
·培养基成分 | 第24页 |
·主要仪器设备 | 第24-25页 |
·实验方法 | 第25-33页 |
·菌种的培养和保藏 | 第25页 |
·链霉菌总 DNA 的抽提 | 第25-26页 |
·大肠杆菌感受态的制备 | 第26页 |
·大肠杆菌质粒的转化 | 第26页 |
·大肠杆菌质粒的抽提 | 第26-27页 |
·DNA 片段的回收 | 第27页 |
·单一 PCR 片段或酶切片段的回收 | 第27页 |
·PCR 反应体系 | 第27-29页 |
·单交换插入失活质粒的构建 | 第29-30页 |
·黑胡桃链霉菌与 E.coli ET12567(pUZ8002)之间的接合转移 | 第30-31页 |
·单交换基因突变株的筛选 | 第31页 |
·HPLC 的检测方法和条件 | 第31-32页 |
·黑胡桃链霉菌及突变株的发酵 | 第32页 |
·核酸片段的脱磷反应与回收 | 第32页 |
·菌株的自然分离 | 第32-33页 |
·结果 | 第33-42页 |
·snogA、snogC 和 snogK 基因的克隆和序列同源性比对 | 第33页 |
·重组质粒的构建及酶切验证 | 第33-36页 |
·重组菌株的获得 | 第36页 |
·重组菌株的基因型验证 | 第36-38页 |
·单交换突变株的发酵 | 第38-42页 |
·突变菌株 mLMX-3-59-K 发酵产物 K 的初步研究 | 第41-42页 |
·本章小结 | 第42-44页 |
第3章 dnrJ原位置换转氨酶基因snogI的研究 | 第44-54页 |
·材料和方法 | 第44-45页 |
·部分仪器、材料和方法 | 第44页 |
·质粒和菌种 | 第44-45页 |
·双交换基因突变株的筛选 | 第45页 |
·结果 | 第45-53页 |
·用于基因置换的重组质粒的构建 | 第45-51页 |
·dnrJ 置换 snogI 基因突变株的筛选 | 第51-52页 |
·dnrJ 置换 snogI 基因突变株的发酵 | 第52-53页 |
·本章小结 | 第53-54页 |
全文总结 | 第54-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-60页 |
附录 | 第60-66页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第66页 |