摘要 | 第1-14页 |
ABSTRACT | 第14-20页 |
第一章 文献综述 | 第20-32页 |
·概述 | 第20页 |
·昆虫卵子发生过程(Oogenesis) | 第20-23页 |
·昆虫卵子发生的基本功能单元 | 第20页 |
·昆虫卵子发生的时期划分及特征 | 第20-23页 |
·昆虫卵壳结构特点及功能 | 第23-27页 |
·昆虫卵壳结构的多样性及功能 | 第23-24页 |
·昆虫卵壳外表面的结构特点 | 第24-25页 |
·昆虫卵壳结构的分层、超微特点及功能 | 第25-27页 |
·昆虫胞外卵壳结构的组装过程 | 第27页 |
·昆虫卵壳蛋白及其编码基因研究进展 | 第27-30页 |
·昆虫卵壳蛋白 | 第27页 |
·昆虫外层卵壳结构蛋白(Chorion proteins)及其编码基因(以家蚕为例) | 第27-28页 |
·昆虫卵黄膜层结构蛋白(VMPs)及其编码基因(以果蝇为例) | 第28-30页 |
·鳞翅目昆虫卵黄膜蛋白及其编码基因 | 第30页 |
·家蚕蛋白质组学的研究进展 | 第30-31页 |
·结语 | 第31-32页 |
第二章 引言 | 第32-36页 |
·研究目的及意义 | 第32页 |
·科学问题和主要研究内容 | 第32-34页 |
·实验技术路线 | 第34-36页 |
第三章 家蚕蚕卵和卵巢组织蛋白质组学分析 | 第36-62页 |
·材料和方法 | 第37-42页 |
·家蚕饲养及组织分离 | 第37页 |
·家蚕本地蛋白质数据库的构建 | 第37-38页 |
·双向电泳蛋白质样品的制备 | 第38页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及蛋白质染色 | 第38页 |
·双向电泳实验及胶图扫描、软件分析 | 第38-39页 |
·家蚕卵巢、蚕卵蛋白质的MALDI-TOF-MS质谱鉴定 | 第39页 |
·主要仪器设备 | 第39-40页 |
·主要试剂及溶液配方 | 第40-42页 |
·结果与分析 | 第42-59页 |
·家蚕蛹期卵巢、胚胎期蚕卵蛋白质双向电泳结果 | 第42页 |
·家蚕蛹期卵巢、蚕卵蛋白质图谱的构建 | 第42-52页 |
·家蚕蚕卵受精前后比较蛋白质组学分析结果 | 第52-55页 |
·家蚕滞育性及非滞育性蚕卵卵蛋白的双向电泳图谱 | 第55-56页 |
·家蚕小卵突变种蛹期卵巢蛋白质的双向电泳图谱 | 第56-59页 |
·结论与讨论 | 第59-62页 |
第四章 家蚕BmEP80表达特征及功能研究 | 第62-84页 |
·材料和方法 | 第62-74页 |
·家蚕饲养及组织分离 | 第62页 |
·家蚕蛹期卵巢及其它组织RNA提取、cDNA制备、RT-PCR检测 | 第62-64页 |
·BmEP80原位杂交实验 | 第64-66页 |
·家蚕蚕卵不同组分蛋白质分离、样品制备、SDS-PAGE及双向电泳 | 第66页 |
·BmEP80原核表达及His-BmEP80融合蛋白纯化 | 第66-68页 |
·BmEP80抗体的制备及点杂交检测 | 第68-69页 |
·Western blot分析 | 第69-70页 |
·BmEP80免疫组化分析 | 第70页 |
·BmEP80 RNAi实验 | 第70-71页 |
·主要仪器设备 | 第71页 |
·主要试剂及溶液配方 | 第71-74页 |
·结果与分析 | 第74-82页 |
·BmEP80表达特征 | 第74页 |
·BmEP80 mRNA在滤泡结构中的定位分析结果 | 第74-76页 |
·BmEP80在蚕卵中的分布情况 | 第76页 |
·BmEP80在蚕卵受精前后的变化情况 | 第76-77页 |
·His-BmEP80原核表达、蛋白纯化、多克隆抗体制备及点杂交结果 | 第77-79页 |
·BmEP80在不同发育时期滤泡中的表达特征 | 第79-80页 |
·BmEP80在卵壳结构层中的定位结果 | 第80页 |
·BmEP80 RNA干涉结果及蚕卵表型 | 第80-82页 |
·结论与讨论 | 第82-84页 |
第五章 鳞翅目昆虫卵黄膜蛋白编码基因预测、表达特征及功能域分析 | 第84-94页 |
·材料和方法 | 第84-86页 |
·家蚕饲养、组织分离、RNA抽提、cDNA制备及RT-PCR检测 | 第84页 |
·鳞翅目昆虫基因组序列获取及卵黄膜蛋白编码基因预测 | 第84-85页 |
·家蚕基因组DNA抽提及家蚕预测卵黄膜蛋白编码基因克隆验证 | 第85-86页 |
·主要仪器设备 | 第86页 |
·主要试剂及溶液配方 | 第86页 |
·结果与分析 | 第86-92页 |
·鳞翅目昆虫卵黄膜蛋白编码区及编码基因 | 第86-88页 |
·家蚕预测卵黄膜蛋白编码基因的时空表达特征 | 第88-89页 |
·鳞翅目昆虫卵黄膜蛋白分类及VM结构域 | 第89-92页 |
·鳞翅目昆虫卵黄膜蛋白氨基酸组成 | 第92页 |
·结论与讨论 | 第92-94页 |
第六章 家蚕蚕卵致死突变体(ι-e~m)突变机理研究 | 第94-128页 |
·材料和方法 | 第94-99页 |
·家蚕饲养、组织分离、RNA抽提及cDNA制备 | 第94页 |
·卵壳蛋白质样品的制备及双向电泳分析 | 第94-95页 |
·家蚕基因组DNA抽提及个体基因型鉴定 | 第95页 |
·基因组PCR(Genomic PCR) | 第95页 |
·反向PCR(Inverse PCR) | 第95-96页 |
·基因组qPCR和qRT-PCR分析 | 第96页 |
·基因组Southern blot分析 | 第96-98页 |
·主要仪器设备 | 第98页 |
·主要试剂及溶液配方 | 第98-99页 |
·结果与分析 | 第99-125页 |
·“明”死卵突变体蚕卵表型 | 第99页 |
·ι-e~m/ι-e~m、+/ι-e~m雌蛾未受精卵卵壳蛋白双向电泳结果 | 第99-100页 |
·ι-e~m/ι-e~m、+/ι-e~m雌蛾未受精卵卵壳蛋白Western blot结果 | 第100页 |
·BmEP80 mRNA在ι-e~m/ι-e~m、+/ι-e~m个体卵巢组织中表达特征 | 第100-101页 |
·ι-e~m突变体基因组中BmEP80位点结构特征解析 | 第101-109页 |
·ι-e~m突变体基因组结构验证 | 第109-112页 |
·“明”死卵突变体个体基因型鉴定 | 第112-113页 |
·染色体片段重复事件中涉及基因的表达特征 | 第113-114页 |
·LTR型反转录转座子Qian及Qian-like结构特点 | 第114-117页 |
·Qian介导染色体片段重复的模型 | 第117-125页 |
·结论与讨论 | 第125-128页 |
第七章 综合与结论 | 第128-132页 |
论文创新点 | 第132-134页 |
参考文献 | 第134-140页 |
附录 | 第140-146页 |
在读期间发表论文及参研课题 | 第146-148页 |
致谢 | 第148页 |