| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第1章 前言 | 第13-27页 |
| ·肠出血性大肠杆菌简介 | 第13-18页 |
| ·肠出血性大肠杆菌的发现历史 | 第13页 |
| ·肠出血性大肠杆菌的基本特征 | 第13-14页 |
| ·肠出血性大肠杆菌的血清型 | 第14页 |
| ·肠出血性大肠杆菌的毒力因子 | 第14-15页 |
| ·肠出血性大肠杆菌的流行病学特征 | 第15-17页 |
| ·临床症状 | 第17页 |
| ·治疗 | 第17-18页 |
| ·肠出血性大肠杆菌的检测 | 第18-21页 |
| ·细菌分离法 | 第18页 |
| ·血清学检测方法 | 第18-19页 |
| ·免疫学检测方法 | 第19-20页 |
| ·分子生物学检测方法 | 第20-21页 |
| ·CPA 技术及应用 | 第21-25页 |
| ·CPA 方法的概述 | 第21页 |
| ·CPA 方法的特点 | 第21-22页 |
| ·CPA 反应原理 | 第22-24页 |
| ·CPA 反应体系 | 第24-25页 |
| ·CPA 反应产物的检测方法 | 第25页 |
| ·CPA 法的应用 | 第25页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第25-27页 |
| 第2章 材料与方法 | 第27-39页 |
| ·实验材料 | 第27-29页 |
| ·实验菌株 | 第27页 |
| ·主要实验仪器 | 第27-28页 |
| ·主要试剂 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-39页 |
| ·主要试剂与培养基的配制 | 第29-30页 |
| ·引物及探针设计 | 第30-31页 |
| ·细菌基因组的提取 | 第31-32页 |
| ·肠出血性大肠杆菌 stx1 基因片断重组质粒的构建 | 第32-34页 |
| ·CPA 及 PCR 反应体系的建立 | 第34页 |
| ·CPA 及 PCR 产物的分析 | 第34-35页 |
| ·CPA 反应条件的优化 | 第35-36页 |
| ·CPA 扩增反应引物特异度验证 | 第36-37页 |
| ·肠出血性大肠杆菌灵敏度检测 | 第37-39页 |
| 第3章 实验结果 | 第39-56页 |
| ·肠出血性大肠杆菌 stx1 基因片断阳性质粒的构建 | 第39-42页 |
| ·PCR 扩增肠出血性大肠杆菌 stx1 基因片断结果 | 第39页 |
| ·肠出血性大肠杆菌重组质粒菌落 PCR 鉴定结果 | 第39-40页 |
| ·肠出血性大肠杆菌 stx1 基因片断阳性质粒的测序结果 | 第40-42页 |
| ·CPA 扩增体系的初步建立 | 第42页 |
| ·CPA 扩增体系的优化结果 | 第42-49页 |
| ·Mg2＋浓度的确定 | 第42-43页 |
| ·dNTPs 浓度的确定 | 第43-44页 |
| ·甜菜碱浓度的确定 | 第44-45页 |
| ·Bst DNA 聚合酶添加量的确定 | 第45-46页 |
| ·引物浓度的确定 | 第46-47页 |
| ·反应温度的确定 | 第47-48页 |
| ·反应时间的确定 | 第48-49页 |
| ·CPA 反应最终体系及条件 | 第49页 |
| ·CPA 扩增产物的分析 | 第49-51页 |
| ·CPA 扩增产物的电泳结果分析 | 第49-50页 |
| ·CPA 扩增产物核酸荧光染料结果分析 | 第50-51页 |
| ·CPA 扩增产物一次性核酸检测装置结果分析 | 第51页 |
| ·CPA 反应体系的特异性研究 | 第51-52页 |
| ·肠出血性大肠杆菌灵敏度检测的研究 | 第52-56页 |
| ·肠出血性大肠杆菌重组质粒的灵敏度检测 | 第52-54页 |
| ·肠出血性大肠杆菌纯培养物的灵敏度检测 | 第54-56页 |
| 第4章 讨论 | 第56-62页 |
| ·靶基因的选择 | 第56-57页 |
| ·CPA 反应条件的优化 | 第57-59页 |
| ·Mg2＋浓度对 CPA 反应的影响 | 第57页 |
| ·dNTPs 浓度对 CPA 反应的影响 | 第57页 |
| ·甜菜碱浓度对 CPA 反应的影响 | 第57-58页 |
| ·Bst DNA 聚合酶添加量对 CPA 反应的影响 | 第58页 |
| ·引物浓度对 CPA 反应的影响 | 第58页 |
| ·反应温度对 CPA 反应的影响 | 第58-59页 |
| ·CPA 扩增产物的三种分析方法比较 | 第59页 |
| ·CPA 法检测肠出血性大肠杆菌的方法学评价 | 第59-60页 |
| ·防止 CPA 污染措施 | 第60页 |
| ·CPA 方法应用展望 | 第60-62页 |
| 第5章 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
