目录 | 第1-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
引言 | 第9-13页 |
材料与方法 | 第13-16页 |
1. 主要试剂和材料 | 第13-14页 |
2. 仪器 | 第14-15页 |
3. 组织来源 | 第15页 |
4. 隨菌粒及菌株 | 第15-16页 |
实验方法 | 第16-27页 |
1. 总RNA的提取 | 第16-17页 |
2. 构建可变区基因T载体库 | 第17-21页 |
3. pCANTAB-Linker载体的改造 | 第21-22页 |
4. 噬菌体抗体库的构建 | 第22-25页 |
5. 噬菌体scFv抗体的富集、筛选 | 第25页 |
6. 筛选后scFv基因的初步鉴定 | 第25-27页 |
实验结果 | 第27-35页 |
1. 确定RNA质量 | 第27页 |
2. 轻重链基因片段的扩增 | 第27-28页 |
3. 可变区基因连接T载体,插入率验证 | 第28-29页 |
4. Linker模板合成及PCANTAB-Linker构建鉴定 | 第29页 |
5. scFv构建及重组率测定 | 第29页 |
6. 抗体库库容估算 | 第29-30页 |
7. SKBR3细胞对单链抗体的富集 | 第30页 |
8. ELISA验证单链抗体与HER-2抗原结合活性 | 第30-31页 |
9. scFv抗体的免疫组化验证 | 第31-32页 |
10. 筛选后序列分析 | 第32-35页 |
讨论 | 第35-38页 |
结论 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
附录A 主要英文缩略词简表 | 第45-46页 |
附录B 个人简介 | 第46页 |
附录C 已发表论文 | 第46-47页 |
附录D 综述 | 第47-54页 |
参考文献 | 第52-54页 |