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棉铃虫抗药性相关P450基因侧翼序列分离与转座子插入鉴定

摘要第1-6页
Abstract第6-9页
第一章 文献综述第9-21页
 1 昆虫细胞色素P450研究进展第9-15页
   ·细胞色素P450概述第9页
   ·昆虫细胞色素P450的种类多样性第9-10页
   ·昆虫细胞色素P450分布和表达的多样性第10页
   ·昆虫细胞色素P450的功能多样性第10-12页
     ·昆虫细胞色素P450催化植物化感外源性物质的代谢第11页
     ·昆虫细胞色素P450催化内源性物质的代谢第11-12页
   ·细胞色素P450介导昆虫抗药性第12-14页
     ·细胞色素P450与昆虫抗药性第12页
     ·细胞色素P450介导昆虫抗药性机制第12-14页
       ·顺式作用元件中的插入/缺失和突变调控第13页
       ·转座子插入调控第13-14页
       ·编码氨基酸序列点突变第14页
   ·细胞色素P450与棉铃虫抗药性第14-15页
 2 SINE反转录转座子研究进展第15-20页
   ·转座子概述第16-17页
   ·SINEs的结构第17页
   ·SINEs的分布第17-18页
   ·SINEs分子标记第18-19页
   ·SINEs的功能第19-20页
 3 本研究意义第20-21页
第二章 棉铃虫抗药性相关P450基因侧翼序列的分离第21-45页
 1 材料与方法第21-30页
   ·供试棉铃虫第21页
   ·主要试剂和仪器第21-22页
     ·试剂第21-22页
     ·仪器第22页
   ·棉铃虫基因组DNA和总RNA提取第22-23页
     ·棉铃虫基因组DNA提取第22-23页
     ·总RNA提取第23页
   ·引物设计与合成第23-24页
   ·基因组步移(genome walking)第24-26页
     ·第一轮巢式PCR反应第25-26页
     ·第二轮巢式PCR反应第26页
     ·第三轮巢式PCR反应第26页
   ·RT-PCR第26-28页
     ·第一链cDNA合成第26-27页
     ·RT-PCR体系第27-28页
   ·PCR产物克隆及测序第28-30页
     ·感受态细胞制备第28页
     ·连接反应第28页
     ·连接产物的转化第28-29页
     ·α互补法进行重组质粒的筛选第29页
     ·阳性克隆检测第29-30页
       ·菌落PCR反应体系第29-30页
     ·测序第30页
   ·序列分析第30页
 2 结果与分析第30-43页
   ·棉铃虫抗药性相关P450基因CYP6AE12基因组5’和3’侧翼序列的分离第30-36页
     ·CYP6AE12基因组5’侧翼序列的分离及分析第30-35页
     ·CYP6AE12基因组3’侧翼序列的分离及分析第35-36页
   ·棉铃虫抗药性相关P450基因CYP9A14基因组5’侧翼序列的分离及分析第36-37页
   ·棉铃虫抗药性相关P450基因CYP9A12基因组3’侧翼序列的分离及分析第37-38页
   ·棉铃虫P450基因CYP321A1基因组5’和3’侧翼序列的分离第38-43页
     ·CYP321A1的直系同源基因序列第38-40页
     ·CYP321A1的基因组5’侧翼序列的分离及分析第40-42页
     ·CYP321A1基因组3’侧翼序列第42-43页
 3 讨论第43-45页
第三章 棉铃虫三种SINE转座子的鉴定和分子进化分析第45-70页
 1 材料与方法第46-48页
   ·供试昆虫第46页
   ·基因组DNA提取第46页
   ·数据库分析第46页
   ·HaSE3的PCR扩增第46-47页
     ·引物设计与合成第46页
     ·PCR体系及程序第46-47页
     ·PCR产物克隆及测序第47页
   ·序列和分子进化分析第47-48页
 2 结果与分析第48-66页
   ·棉铃虫三种新型SINEs的鉴定和分析第48-66页
     ·棉铃虫一个新型的tRNA衍生SINE家族HaSE1的鉴定和分析第48-54页
     ·HaSE2的鉴定和分析第54-56页
     ·HaSE1和HaSE2侧翼序列分析第56-59页
     ·HaSE1和HaSE2在其他昆虫中的分布第59-63页
     ·棉铃虫和其它昆虫5S rRNA衍生SINE家族的鉴定和分析第63-66页
 3 讨论第66-70页
   ·两个tRNA衍生SINE家族的保守性中央区第66页
   ·第一个3’端由DNA转座子衍生来的SINE家族,HaSE2第66-67页
   ·5S rRNA和tRNA衍生SINEs重组SINEs第67页
   ·LINE第67-68页
   ·SINE家族在棉铃虫基因组中的分布与丰度第68-70页
参考文献第70-88页
致谢第88-89页
攻读硕士学位期间发表的学术论文目录第89-90页

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