| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词（Abbreviation) | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| 1 转录因子研究进展 | 第14-19页 |
| ·转录因子的结构 | 第15-16页 |
| ·DNA结合区 | 第15页 |
| ·转录调控区 | 第15-16页 |
| ·核定位信号区 | 第16页 |
| ·寡聚化位点区 | 第16页 |
| ·转录因子的分类 | 第16-17页 |
| ·转录因子的功能 | 第17-19页 |
| ·转录因子与植物生长发育和形态建成 | 第17-18页 |
| ·转录因子与植物抗逆性 | 第18-19页 |
| ·转录因子与植物的次生代谢 | 第19页 |
| 2 SBP类转录因子研究进展 | 第19-21页 |
| ·SBP基因家族的发现 | 第19-20页 |
| ·SBP基因家族的结构 | 第20页 |
| ·SBP基因家族的功能 | 第20-21页 |
| 3 电子克隆与RACE技术 | 第21-23页 |
| ·电子克隆方法 | 第21-22页 |
| ·cDNA末端快速扩增技术 | 第22-23页 |
| 4 小结与展望 | 第23-24页 |
| 第二章 葡萄SBP基因家族生物信息学分析 | 第24-34页 |
| 摘要 | 第24-25页 |
| 1 材料与方法 | 第25-26页 |
| ·蛋白序列 | 第25页 |
| ·应用软件及分析 | 第25-26页 |
| ·序列分析 | 第25页 |
| ·蛋白质结构分析 | 第25-26页 |
| ·MiR156靶序列的定位 | 第26页 |
| 2 结果与分析 | 第26-33页 |
| ·葡萄SBP挖掘 | 第26页 |
| ·葡萄SBP蛋白的系统发生分析 | 第26页 |
| ·葡萄SBP基因组定位 | 第26-27页 |
| ·氨基酸组成成分及理化性质分析 | 第27页 |
| ·二级和三级结构预测与分析 | 第27页 |
| ·MiR156靶序列的定位 | 第27-33页 |
| 3 讨论 | 第33-34页 |
| 第三章 葡萄SPL9和SPL1O基因的克隆与序列分析 | 第34-46页 |
| 摘要 | 第34页 |
| 1 材料与方法 | 第34-40页 |
| ·材料 | 第34-36页 |
| ·植物材料 | 第34-35页 |
| ·菌株及载体 | 第35页 |
| ·化学试剂、酶制剂及试剂盒 | 第35页 |
| ·培养基及溶液 | 第35页 |
| ·引物 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-40页 |
| ·总RNA的提取 | 第36页 |
| ·总RNA的纯化 | 第36-37页 |
| ·cDNA的合成 | 第37页 |
| ·引物设计 | 第37-38页 |
| ·葡萄SPL9和SPL10基因ORF、3’和5’的克隆 | 第38页 |
| ·PCR产物的回收 | 第38-39页 |
| ·目的片段T载体的连接,转化及鉴定 | 第39页 |
| ·葡萄SPL9和SPL10全长cDNA序列获得 | 第39页 |
| ·生物信息学分析 | 第39-40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-44页 |
| ·总RNA的提取 | 第40页 |
| ·葡萄Vv-SPL9和Vv-SPL10 cDNA全长的电子克隆 | 第40页 |
| ·葡萄Vv-SPL9和Vv-SPL10 cDNA全长的获得 | 第40-41页 |
| ·葡萄Vv-SPL9和Vv-SPL10氨基酸序列分析 | 第41-44页 |
| 3 讨论 | 第44-46页 |
| 第四章 葡萄SPL9和SPL10基因的亚细胞定位分析 | 第46-52页 |
| 摘要 | 第46页 |
| 1 材料与方法 | 第46-51页 |
| ·材料 | 第46-47页 |
| ·植物材料 | 第46页 |
| ·试剂及溶液 | 第46-47页 |
| ·菌株及载体 | 第47页 |
| ·培养基 | 第47页 |
| ·方法 | 第47-51页 |
| ·总RNA的提取及纯化 | 第47页 |
| ·cDNA的合成 | 第47页 |
| ·引物设计 | 第47-48页 |
| ·克隆 | 第48页 |
| ·质粒提取 | 第48-49页 |
| ·表达载体的构建 | 第49-50页 |
| ·基因枪转化 | 第50页 |
| ·玻片制备和样品观察 | 第50-51页 |
| 2 结果与分析 | 第51页 |
| 3 讨论 | 第51-52页 |
| 第五章 葡萄SPL9和SPL10基因表达分析 | 第52-62页 |
| 摘要 | 第52-53页 |
| 1 材料与方法 | 第53-57页 |
| ·材料 | 第53-54页 |
| ·植物材料 | 第53页 |
| ·试剂 | 第53页 |
| ·引物 | 第53-54页 |
| ·方法 | 第54-57页 |
| ·总RNA的提取 | 第54页 |
| ·总RNA的纯化 | 第54页 |
| ·葡萄LMW RNA的分离 | 第54-55页 |
| ·cDNA的合成 | 第55-56页 |
| ·引物设计 | 第56页 |
| ·Vv-SPL9和Vv-SPL10半定量PCR扩增 | 第56-57页 |
| ·Vv-SPL9、Vv-SPL10及Vv-miR156a荧光定量PCR扩增 | 第57页 |
| 2 结果与分析 | 第57-59页 |
| ·Vv-SPL9和Vv-SPL10在葡萄不同组织中的半定量PCR表达分析 | 第57-58页 |
| ·Vv-SPL9、Vv-SPL10及Vv-miR156a在葡萄不同组织中的定量表达分析 | 第58-59页 |
| 3 讨论 | 第59-62页 |
| 全文结论 | 第62-64页 |
| 创新点 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 附录 本文中常用试剂及培养基的配置 | 第74-76页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
