致谢 | 第1-5页 |
目录 | 第5-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
1 文献综述 | 第8-17页 |
·下丘脑-垂体-甲状腺轴参与的生长、体脂调节 | 第8页 |
·甲状腺激素应答基因 | 第8-11页 |
·SPOT14 基因结构 | 第9-10页 |
·SPOT14 蛋白结构 | 第10-11页 |
·SPOT14 基因的研究进展 | 第11-15页 |
·哺乳动物 SPOT14 基因的研究进展 | 第11-13页 |
·鸡 SPOT14 基因的研究进展 | 第13-14页 |
·鸭 SPOT14 基因的研究进展 | 第14-15页 |
·鹅 SPOT14 基因的研究进展 | 第15页 |
·展望 | 第15-17页 |
2 引言 | 第17-18页 |
3 材料与方法 | 第18-33页 |
·猪 SPOT14 基因的克隆、序列分析与结构预测 | 第18-26页 |
·样品采集 | 第18页 |
·菌株和质粒 | 第18页 |
·主要仪器设备 | 第18页 |
·试剂 | 第18-22页 |
·猪 SPOT14 基因的克隆 | 第22-25页 |
·DNA 序列分析 | 第25-26页 |
·猪 SPOT14 基因的组织分布 | 第26页 |
·猪 pET-28α(+)-S14 原核表达载体的构建与鉴定 | 第26-29页 |
·样品采集 | 第26页 |
·猪 SPOT14 基因表达引物设计与合成 | 第26-27页 |
·PCR 扩增 | 第27页 |
·PCR 产物纯化回收 | 第27页 |
·连接反应及转化 | 第27页 |
·重组表达载体 pET-28α(+)-S14 的构建 | 第27-29页 |
·重组表达载体 pET-28α(+)-S14 的鉴定 | 第29页 |
·猪 SPOT14 基因在大肠杆菌中的表达 | 第29-31页 |
·重组表达载体 pET-28α(+)-S14 的表达鉴定 | 第29-30页 |
·重组表达载体在原核细胞中的诱导表达 | 第30-31页 |
·猪 S14 蛋白的纯化与 Western blot 鉴定 | 第31-33页 |
·重组蛋白 S14 的纯化 | 第31-32页 |
·Western Blot 鉴定 | 第32-33页 |
4 结果与分析 | 第33-41页 |
·猪 SPOT14 基因克隆 | 第33-36页 |
·猪 SPOT14 基因的 RT-PCR 扩增 | 第33-34页 |
·猪 SPOT14 克隆序列分析 | 第34页 |
·同源性分析 | 第34-35页 |
·猪 SPOT14 基因的组织分布 | 第35-36页 |
·猪 pET-28α(+)-S14 原核表达载体的构建与鉴定 | 第36-39页 |
·重组表达载体的构建 | 第36页 |
·重组表达载体的鉴定 | 第36-39页 |
·猪 SPOT14 基因在大肠杆菌中的表达 | 第39页 |
·猪 S14 蛋白的纯化与 Western blot 鉴定 | 第39-41页 |
·融合蛋白的纯化 | 第39-40页 |
·Western Blot 鉴定 | 第40-41页 |
5 讨论与结论 | 第41-44页 |
·讨论 | 第41-42页 |
·猪 SPOT14 基因的克隆与序列分析 | 第41页 |
·猪 SPOT14 基因的组织分布 | 第41-42页 |
·猪 pET-28α(+)-S14 的表达、纯化和鉴定 | 第42页 |
·结论 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-50页 |
Abstract | 第50-51页 |