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猪甲状腺激素应答基因(SPOT14)的克隆与原核表达

致谢第1-5页
目录第5-7页
摘要第7-8页
1 文献综述第8-17页
   ·下丘脑-垂体-甲状腺轴参与的生长、体脂调节第8页
   ·甲状腺激素应答基因第8-11页
     ·SPOT14 基因结构第9-10页
     ·SPOT14 蛋白结构第10-11页
   ·SPOT14 基因的研究进展第11-15页
     ·哺乳动物 SPOT14 基因的研究进展第11-13页
     ·鸡 SPOT14 基因的研究进展第13-14页
     ·鸭 SPOT14 基因的研究进展第14-15页
     ·鹅 SPOT14 基因的研究进展第15页
   ·展望第15-17页
2 引言第17-18页
3 材料与方法第18-33页
   ·猪 SPOT14 基因的克隆、序列分析与结构预测第18-26页
     ·样品采集第18页
     ·菌株和质粒第18页
     ·主要仪器设备第18页
     ·试剂第18-22页
     ·猪 SPOT14 基因的克隆第22-25页
     ·DNA 序列分析第25-26页
     ·猪 SPOT14 基因的组织分布第26页
   ·猪 pET-28α(+)-S14 原核表达载体的构建与鉴定第26-29页
     ·样品采集第26页
     ·猪 SPOT14 基因表达引物设计与合成第26-27页
     ·PCR 扩增第27页
     ·PCR 产物纯化回收第27页
     ·连接反应及转化第27页
     ·重组表达载体 pET-28α(+)-S14 的构建第27-29页
     ·重组表达载体 pET-28α(+)-S14 的鉴定第29页
   ·猪 SPOT14 基因在大肠杆菌中的表达第29-31页
     ·重组表达载体 pET-28α(+)-S14 的表达鉴定第29-30页
     ·重组表达载体在原核细胞中的诱导表达第30-31页
   ·猪 S14 蛋白的纯化与 Western blot 鉴定第31-33页
     ·重组蛋白 S14 的纯化第31-32页
     ·Western Blot 鉴定第32-33页
4 结果与分析第33-41页
   ·猪 SPOT14 基因克隆第33-36页
     ·猪 SPOT14 基因的 RT-PCR 扩增第33-34页
     ·猪 SPOT14 克隆序列分析第34页
     ·同源性分析第34-35页
     ·猪 SPOT14 基因的组织分布第35-36页
     ·猪 pET-28α(+)-S14 原核表达载体的构建与鉴定第36-39页
     ·重组表达载体的构建第36页
     ·重组表达载体的鉴定第36-39页
   ·猪 SPOT14 基因在大肠杆菌中的表达第39页
   ·猪 S14 蛋白的纯化与 Western blot 鉴定第39-41页
     ·融合蛋白的纯化第39-40页
     ·Western Blot 鉴定第40-41页
5 讨论与结论第41-44页
   ·讨论第41-42页
     ·猪 SPOT14 基因的克隆与序列分析第41页
     ·猪 SPOT14 基因的组织分布第41-42页
     ·猪 pET-28α(+)-S14 的表达、纯化和鉴定第42页
   ·结论第42-44页
参考文献第44-50页
Abstract第50-51页

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