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噬菌体内溶素基因分离、鉴定及功能研究

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
第一章 绪论第9-22页
   ·内溶素第9-14页
     ·对链球菌作用的内溶素第11页
     ·对龋齿细菌作用的内溶素第11页
     ·对葡萄球菌作用的内溶素第11-12页
     ·对芽孢杆菌作用的内溶素第12页
     ·对肠球菌、沙门氏菌和梭菌属作用的内溶素第12页
     ·内溶素其它方面的应用第12-13页
     ·抗菌肽第13-14页
   ·噬菌体第14-19页
     ·噬菌体的发现第14页
     ·噬菌体的分类第14-16页
     ·噬菌体的裂解机制第16页
     ·噬菌体在治疗上的应用前景第16-17页
     ·噬菌体在食物去污和保护方面的应用第17-18页
     ·噬菌体在细菌检测方面的应用第18-19页
     ·噬菌体的其它方面的应用第19页
   ·本研究的内容与意义第19-22页
     ·技术路线第19-20页
     ·研究内容第20页
     ·研究意义第20-22页
第二章 实验仪器和材料第22-32页
   ·实验仪器汇总第22-28页
   ·实验材料汇总第28-32页
     ·实验试剂第28-31页
     ·其他器材第31-32页
第三章 噬菌体的分离纯化及鉴定第32-40页
   ·材料与方法第32-35页
     ·培养基及试剂第32页
     ·粗培养第32页
     ·宿主菌的分离纯化及初步鉴定第32-33页
     ·噬菌体富集第33页
     ·噬菌体的检测第33-34页
     ·噬菌体的分离纯化第34页
     ·噬菌体的液体扩大培养第34页
     ·噬菌体基因组DNA 的提取第34页
     ·噬菌体的初步鉴定第34-35页
   ·实验结果第35-37页
     ·宿主菌的鉴定第35-36页
     ·噬菌体的检测及分离纯化第36页
     ·噬菌体的液体扩大培养第36-37页
     ·噬菌体鉴定第37页
   ·讨论第37-40页
第四章 内溶素 E 基因及改造基因的克隆第40-52页
   ·材料与方法第40-46页
     ·主要菌株、噬菌体、质粒及试剂第40-41页
     ·克隆载体构建原理第41页
     ·E 基因的克隆第41-42页
     ·RI 基因的克隆第42页
     ·E 基因的分析第42-44页
     ·E1-87、E34-157 和E110-157 基因的克隆第44页
     ·RI 和E 基因连接基因的克隆第44-46页
   ·实验结果第46-50页
     ·E 基因的克隆第46-48页
     ·RI 基因的克隆第48-49页
     ·E1-87、E34-157 和E10-157 基因的克隆第49页
     ·RIE 基因的克隆第49-50页
   ·讨论第50-52页
第五章 体内抑菌实验第52-58页
 引言第52页
   ·材料与方法第52-53页
     ·材料与仪器第52页
     ·种子液培养第52页
     ·扩大培养第52-53页
     ·OD_(600) 值的测定第53页
     ·活菌稀释计数法第53页
     ·菌株形态观察第53页
   ·实验结果第53-57页
     ·体内抑菌活性的鉴定第53-56页
     ·活菌稀释计数及菌株形态的观察第56-57页
   ·讨论第57-58页
第六章 蛋白的表达与纯化第58-74页
   ·材料与方法第58-68页
     ·材料与试剂第58-59页
     ·pHERD 系统表达载体的构建第59页
     ·pTYB11 系统表达载体的构建第59-60页
     ·pHERD30T 系统诱导表达蛋白及检测第60-64页
     ·pHERD30T 表达系统的蛋白纯化第64-66页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第66页
     ·pTYaB11 表达系统诱导表达蛋白第66页
     ·pTYB11 表达系统蛋白纯化第66-67页
     ·透析与冷冻干燥第67-68页
   ·实验结果第68-71页
     ·pHERD-30T 表达载体的构建、表达与纯化第68-70页
     ·pTYB11 表达载体的构建、表达与纯化第70-71页
   ·讨论第71-74页
第七章 体外抑菌实验第74-77页
   ·材料与方法第74页
     ·材料与试剂第74页
     ·方法步骤第74页
   ·实验结果第74-75页
   ·讨论第75-77页
第八章 结论第77-79页
参考文献第79-86页
附录第86-91页
致谢第91-92页
作者简介第92页

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