| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-34页 |
| 1. 植物组织培养研究进展 | 第14-21页 |
| ·植物组培技术的发展概况 | 第14-15页 |
| ·植物快繁技术与品种改良 | 第15-16页 |
| ·原生质体培养与基因工程育种 | 第15页 |
| ·单倍体培养 | 第15-16页 |
| ·苗木脱毒复壮 | 第16页 |
| ·植物器官与细胞生物反应器 | 第16页 |
| ·细胞无性系变异及其利用 | 第16页 |
| ·木本植物组织培养研究 | 第16-21页 |
| ·木本植物外植体组织培养技术 | 第17页 |
| ·木本植物细胞培养及突变体筛选 | 第17-18页 |
| ·植物组织培养中存在的问题及解决方案 | 第18-21页 |
| 2. 植物抗寒生理研究进展 | 第21-26页 |
| ·植物抗寒的特性与类型 | 第21页 |
| ·抗寒生理生化指标 | 第21-23页 |
| ·细胞膜电解质渗透率 | 第22页 |
| ·渗透调节代谢物 | 第22-23页 |
| ·抗氧化酶活力 | 第23页 |
| ·寒胁迫诱导植物冷调节基因与植物抗冻蛋白 | 第23-24页 |
| ·低温诱导植物细胞凋亡 | 第24-26页 |
| ·细胞凋亡的意义与特征 | 第24-25页 |
| ·低温诱导植物细胞凋亡 | 第25-26页 |
| ·提高植物抗寒性的措施 | 第26页 |
| 3. 蛋白质组学研究进展 | 第26-32页 |
| ·蛋白质组(Proteome)与蛋白质组学(Proteomics) | 第27页 |
| ·蛋白质组学的研究手段 | 第27-30页 |
| ·双向电泳技术 | 第28页 |
| ·生物质谱技术 | 第28-29页 |
| ·生物信息学 | 第29-30页 |
| ·逆境蛋白质组学研究 | 第30-31页 |
| ·植物热休克蛋白的研究 | 第30页 |
| ·植物抗寒相关蛋白质组的研究 | 第30-31页 |
| ·植物抗旱相关蛋白质组的研究 | 第31页 |
| ·植物耐盐相关蛋白质组的研究 | 第31页 |
| ·蛋白质组学的发展前景和展望 | 第31-32页 |
| 4 本研究的目的、意义及主要研究内容 | 第32-34页 |
| ·研究目的及意义 | 第32-33页 |
| ·主要研究内容 | 第33-34页 |
| 第二章 灰木相思离体培养与再生体系的构建 | 第34-44页 |
| 1 材料与方法 | 第34-36页 |
| ·实验材料 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-36页 |
| ·优树外植体的消毒与培养 | 第34-35页 |
| ·灰木相思种子处理及培养 | 第35页 |
| ·防止不定芽玻璃化培养条件的筛选 | 第35-36页 |
| ·灰木相思不定芽增殖壮苗培养基的筛选 | 第36页 |
| ·再生植株生根培养 | 第36页 |
| ·炼苗移栽 | 第36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-42页 |
| ·外植体消毒方法的筛选 | 第36-37页 |
| ·外植体不定芽诱导培养 | 第37-38页 |
| ·灰木相思种子预处理方式与培养 | 第38-40页 |
| ·灰木相思种子预处理方式的筛选 | 第38-39页 |
| ·灰木相思种子苗不定芽的诱导 | 第39-40页 |
| ·不定芽继代增殖培养,减少玻璃化 | 第40-41页 |
| ·灰木相思组培苗的生根培养 | 第41页 |
| ·炼苗移植 | 第41-42页 |
| 3 讨论 | 第42-44页 |
| 第三章 灰木相思抗寒性评估 | 第44-51页 |
| 1 材料与方法 | 第44-46页 |
| ·实验材料与设计 | 第44-45页 |
| ·主要仪器 | 第45页 |
| ·生理指标测定的内容与方法 | 第45-46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-49页 |
| ·不同无性系的半致死温度(LT_(50))及抗寒能力的确立 | 第46-47页 |
| ·低温胁迫下可溶性糖含量的变化 | 第47-48页 |
| ·低温胁迫下游离脯氨酸含量的变化 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-51页 |
| ·细胞质膜相对电导率变化与抗寒性的关系 | 第49页 |
| ·可溶性糖含量变化与抗寒性的关系 | 第49-50页 |
| ·脯氨酸含量的变化与抗寒性的关系 | 第50-51页 |
| 第四章 寒胁迫诱导灰木相思细胞凋亡的研究 | 第51-62页 |
| 1 材料与方法 | 第51-54页 |
| ·供试材料 | 第51页 |
| ·溶液配置 | 第51-52页 |
| ·DNA提取及DNA凝胶电泳试剂配置 | 第52页 |
| ·细胞核形态观察试剂配置 | 第52页 |
| ·TUNEL检测试剂配置 | 第52页 |
| ·试验方法 | 第52-54页 |
| ·寒胁迫实验设计 | 第52页 |
| ·DNA提取及纯度测定 | 第52-53页 |
| ·细胞核形态观察 | 第53页 |
| ·TUNEL检测 | 第53-54页 |
| ·仪器与试剂 | 第54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-59页 |
| ·DNA纯度及浓度检测 | 第54页 |
| ·细胞凋亡率的统计 | 第54-55页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳图谱 | 第55-56页 |
| ·细胞核形态观察结果 | 第56-58页 |
| ·TUNEL检测结果 | 第58-59页 |
| 3 讨论 | 第59-62页 |
| ·DNA ladder检测 | 第59-60页 |
| ·细胞核形态观察及TUNEL检测 | 第60-62页 |
| 第五章 灰木相思蛋白质组双向电泳技术平台的建立 | 第62-75页 |
| 1 材料与方法 | 第62-66页 |
| ·实验材料 | 第62页 |
| ·试剂与设备 | 第62-63页 |
| ·溶液配置 | 第63页 |
| ·双向电泳试剂配置 | 第63页 |
| ·Braford蛋白质定量试剂配置 | 第63页 |
| ·样品制备 | 第63-64页 |
| ·总蛋白的提取 | 第63-64页 |
| ·制备蛋白溶液样品 | 第64页 |
| ·Braford法测定蛋白含量 | 第64页 |
| ·向电泳条件的优化 | 第64-66页 |
| ·第一向固相pH梯度等电聚焦(IEF) | 第64-65页 |
| ·第二向垂直板SDS—PAGE电泳 | 第65-66页 |
| ·凝胶染色 | 第66页 |
| ·硝酸银染色法 | 第66页 |
| ·胶体考马斯亮兰染色法 | 第66页 |
| 2. 结果与分析 | 第66-72页 |
| ·制备样品材料的选择 | 第66-67页 |
| ·蛋白样品裂解液的选择 | 第67-69页 |
| ·组培苗样品溶液蛋白上样量的比较 | 第69-70页 |
| ·不同SDS-PAGE浓度对总蛋白分离效果的影响 | 第70-71页 |
| ·不同pH范围的IPG胶条2-DE图谱比较 | 第71页 |
| ·不同凝胶染色方法的选择 | 第71-72页 |
| 3 讨论 | 第72-75页 |
| 第六章 寒胁迫诱导灰木相思无性系差异蛋白质组的分析 | 第75-107页 |
| 1 材料与方法 | 第75-79页 |
| ·实验材料与设计 | 第75页 |
| ·试剂与设备 | 第75-76页 |
| ·溶液配置 | 第76页 |
| ·样品制备及双向电泳实验 | 第76页 |
| ·干胶制备 | 第76-77页 |
| ·凝胶图像分析 | 第77页 |
| ·MALDI—TOF—MS分析 | 第77-79页 |
| ·蛋白质胶内酶解 | 第77-78页 |
| ·质谱仪检测参数设置 | 第78页 |
| ·数据库检索 | 第78-79页 |
| 2 结果与分析 | 第79-104页 |
| ·选用pH3-10的IPG分析寒胁迫下灰木相思不同无性系差异蛋白表达 | 第79-88页 |
| ·寒胁迫下灰木相思不同无性系差异蛋白点的检测 | 第79-82页 |
| ·寒胁迫诱导灰木相思无性系ZH-01表达差异蛋白点的检测 | 第82-84页 |
| ·寒胁迫诱导灰木相思无性系ZH-73表达差异蛋白点的检测 | 第84-85页 |
| ·差异蛋白点的MALDI-TOF-MS分析及PMF的数据库查询结果 | 第85-86页 |
| ·寒胁迫诱导下灰木相思无性系差异蛋白的生物学功能分析 | 第86-88页 |
| ·选用pH4-7的IPG分析寒胁迫下灰木相思不同无性系差异蛋白表达 | 第88-96页 |
| ·寒胁迫下灰木相思不同无性系差异蛋白点的检测 | 第88-90页 |
| ·寒胁迫诱导灰木相思无性系ZH-01表达差异蛋白点的检测 | 第90-92页 |
| ·寒胁迫诱导灰木相思无性系ZH-73表达差异蛋白点的检测 | 第92-93页 |
| ·差异蛋白点的MALDI-TOF-MS分析及PMF的数据库查询结果 | 第93-94页 |
| ·寒胁迫诱导下灰木相思无性系差异蛋白的生物学功能分析 | 第94-96页 |
| ·选用pH 7-11的IPG分析寒胁迫下灰木相思不同无性系差异蛋白表达 | 第96-104页 |
| ·寒胁迫下灰木相思不同无性系差异蛋白点的检测 | 第96-98页 |
| ·寒胁迫诱导灰木相思无性系ZH-01表达差异蛋白点的检测 | 第98-100页 |
| ·寒胁迫诱导灰木相思无性系ZH-73表达差异蛋白点的检测 | 第100页 |
| ·差异蛋白点的MALDI-TOF-MS分析及PMF的数据库查询结果 | 第100-102页 |
| ·寒胁迫诱导下灰木相思无性系差异蛋白的生物学功能分析 | 第102-104页 |
| 3 讨论 | 第104-107页 |
| ·双向电泳图谱分析 | 第104页 |
| ·蛋白胶粒酶解 | 第104页 |
| ·PMF数据搜索 | 第104页 |
| ·鉴定结果分析 | 第104-107页 |
| 第七章 总结与展望 | 第107-111页 |
| 1 总结与讨论 | 第107-109页 |
| ·灰木相思离体培养再生体系的建立 | 第107页 |
| ·灰木相思不同无性系抗寒能力的评估 | 第107-108页 |
| ·寒胁迫诱导灰木相思细胞凋亡的发生 | 第108页 |
| ·寒胁迫诱导灰木相思无性系差异蛋白的表达 | 第108-109页 |
| 2 主要创新点 | 第109-110页 |
| 3 展望 | 第110-111页 |
| 参考文献 | 第111-127页 |
| 附录 | 第127-132页 |
| 博士在学期间发表的论文 | 第132页 |
| 博士在学期间参加的科研项目 | 第132-133页 |
| 致谢 | 第133页 |
