| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-15页 |
| 第1章 绪论 | 第15-43页 |
| ·前言 | 第15页 |
| ·生产转基因动物的技术方法 | 第15-17页 |
| ·逆转录病毒载体法 | 第15-16页 |
| ·原核注射法 | 第16页 |
| ·精子载体法 | 第16页 |
| ·胚胎干细胞嵌合体法 | 第16-17页 |
| ·体细胞核移植法 | 第17页 |
| ·猪核移植技术研究进展 | 第17-25页 |
| ·克隆猪技术研究历史 | 第19-21页 |
| ·克隆猪技术主要技术环节及其影响因素 | 第21-25页 |
| ·卵母细胞 | 第21-22页 |
| ·供体细胞 | 第22-23页 |
| ·核移植重构胚胎的构建 | 第23-24页 |
| ·胚胎移植 | 第24-25页 |
| ·猪核移植技术在转基因猪生产中的应用 | 第25-33页 |
| ·用于基因修饰的供体细胞 | 第26-27页 |
| ·基因修饰策略 | 第27-30页 |
| ·随机整合转基因 | 第27页 |
| ·基因定点修饰 | 第27-30页 |
| ·转基因猪技术在农业领域的应用 | 第30页 |
| ·转基因猪技术在医学领域的应用 | 第30-33页 |
| ·作为疾病模型运用于疾病诊断、治疗 | 第30-31页 |
| ·作为器官移植供体 | 第31-32页 |
| ·作为生物反应器生产药用蛋白 | 第32-33页 |
| ·诱导性多能干细胞(Induced pluripotent stem cells,iPSCs) | 第33-38页 |
| ·诱导载体系统 | 第33-34页 |
| ·培养条件 | 第34-36页 |
| ·诱导iPSCs细胞来源 | 第36页 |
| ·Naive iPSCs | 第36-37页 |
| ·重编程机制 | 第37-38页 |
| ·猪iPS Cells(piPSCs) | 第38-41页 |
| ·缺乏真正的猪ES | 第38-39页 |
| ·piPSCs的诱导 | 第39-40页 |
| ·猪品系和供体细胞 | 第39页 |
| ·诱导方法 | 第39-40页 |
| ·piPSCs特征 | 第40-41页 |
| ·本课题选题依据及研究内容 | 第41-43页 |
| 第2章 以piPSCs为供体细胞的克隆猪研究 | 第43-54页 |
| ·引言 | 第43页 |
| ·实验材料与方法 | 第43-50页 |
| ·实验材料和试剂 | 第43-46页 |
| ·实验动物 | 第43页 |
| ·细胞 | 第43页 |
| ·试剂及溶液的配制 | 第43-45页 |
| ·仪器与耗材 | 第45-46页 |
| ·实验方法 | 第46-50页 |
| ·细胞培养 | 第46-47页 |
| ·克隆猪的制作 | 第47-50页 |
| ·结果 | 第50-52页 |
| ·用于克隆猪研究的piPSCs | 第50-52页 |
| ·piPSC克隆胚胎体内发育 | 第52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| 第3章 以piPSCs分化细胞为供体细胞的克隆猪研究 | 第54-77页 |
| ·引言 | 第54页 |
| ·实验材料与方法 | 第54-64页 |
| ·实验材料和试剂 | 第54-55页 |
| ·实验动物 | 第54页 |
| ·细胞 | 第54页 |
| ·试剂及溶液的配制 | 第54-55页 |
| ·仪器与耗材 | 第55页 |
| ·实验方法 | 第55-64页 |
| ·piPSCs细胞培养及体外分化 | 第55-56页 |
| ·未分化和分化piPSCs外源基因表达检测 | 第56-58页 |
| ·克隆猪的制作 | 第58页 |
| ·未分化和分化piPSCs克隆胚胎体外发育比较 | 第58页 |
| ·36天克隆胎儿的剖取 | 第58页 |
| ·克隆猪剖腹产 | 第58-59页 |
| ·36天克隆胎儿和克隆猪的鉴定 | 第59-61页 |
| ·石蜡切片和HE染色 | 第61-64页 |
| ·结果 | 第64-74页 |
| ·piPSCs分化后细胞形态和外源基因表达变化 | 第64-66页 |
| ·未分化和分化piPSCs克隆胚胎体外发育比较 | 第66-67页 |
| ·piPSCs分化细胞克隆胚胎体内发育 | 第67-73页 |
| ·piPSC克隆猪病理分析 | 第73-74页 |
| ·讨论 | 第74-77页 |
| 全文小结 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-92页 |
| 致谢 | 第92-94页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第94页 |