摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 绪论 | 第10-23页 |
1. 基因治疗及其载体分类 | 第10-17页 |
·病毒载体的分类及特点 | 第10-13页 |
·非病毒载体的分类及特点 | 第13-15页 |
·细菌载体分类及特点 | 第15-17页 |
·小结 | 第17页 |
2. 细胞内吞及细胞内吞途径分类 | 第17-20页 |
·吞噬作用 | 第17页 |
·网格蛋白依赖性细胞内吞 | 第17-18页 |
·小窝蛋白介导的细胞内吞 | 第18页 |
·非网格蛋白和非小窝蛋白依赖性细胞内吞 | 第18页 |
·巨胞饮 | 第18页 |
·小结 | 第18-20页 |
3. 课题的提出 | 第20-23页 |
第二章 摄入抑制实验 | 第23-31页 |
1. 试剂、耗材和仪器 | 第23-24页 |
·试剂及耗材 | 第23页 |
·仪器 | 第23-24页 |
2. 主要试剂的配制 | 第24-26页 |
·缓冲液配制 | 第24-25页 |
·内吞途径抑制剂溶液的配置 | 第25页 |
·其它溶液的配置 | 第25-26页 |
3. 实验方法 | 第26-27页 |
·质粒DNA pGL3-Control的提取及荧光标记 | 第26页 |
·TAT-LHRH-CS共聚物的制备 | 第26页 |
·用TAT-LHRH-CS或CS和fDNA制备纳米粒 | 第26页 |
·摄入抑制实验 | 第26-27页 |
·统计学处理 | 第27页 |
4. 结果与讨论 | 第27-30页 |
5. 本章小结 | 第30-31页 |
第三章 共定位实验 | 第31-39页 |
1. 试剂、耗材和仪器 | 第31-32页 |
·试剂及耗材 | 第31页 |
·仪器 | 第31-32页 |
2. 主要试剂的配制 | 第32-34页 |
·缓冲液配制 | 第32-33页 |
·内吞途径标志物溶液的配置 | 第33页 |
·其它溶液的配置 | 第33-34页 |
3. 实验方法 | 第34-35页 |
·质粒DNA pGL3-Control的提取及荧光标记 | 第34页 |
·TAT-LHRH-CS共聚物的制备 | 第34页 |
·用TAT-LHRH-CS或CS和fDNA制备纳米粒 | 第34页 |
·共定位实验 | 第34-35页 |
·统计学处理 | 第35页 |
4. 结果与讨论 | 第35-38页 |
5. 本章小结 | 第38-39页 |
第四章 阻断不同细胞内吞途径对基因转染效率的影响 | 第39-46页 |
1. 试剂、耗材和仪器 | 第39-40页 |
·试剂及耗材 | 第39页 |
·仪器 | 第39-40页 |
2. 主要试剂的配制 | 第40-41页 |
·缓冲液配制 | 第40-41页 |
·内吞途径抑制剂溶液的配置 | 第41页 |
·其它溶液的配置 | 第41页 |
3. 实验方法 | 第41-43页 |
·质粒DNA pGL3-Control的提取 | 第41-42页 |
·TAT-LHRH-CS共聚物的制备 | 第42页 |
·用TAT-LHRH-CS或CS和DNA制备纳米粒 | 第42页 |
·阻断不同内吞途径对基因转染效率的影响 | 第42-43页 |
·统计学处理 | 第43页 |
4. 结果与讨论 | 第43-45页 |
5. 本章小结 | 第45-46页 |
全文总结 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-55页 |
附录:文中所用到的主要实验方法 | 第55-60页 |
1. HepG2细胞的复苏、传代及保存 | 第55页 |
·HepG2细胞的复苏 | 第55页 |
·HepG2细胞的传代 | 第55页 |
·HepG2细胞的保存 | 第55页 |
2. 含质粒DNA pGL3-Control的大肠杆菌DH5a的培养 | 第55-56页 |
3. 质粒DNA pGL3-Control的提取 | 第56-57页 |
4. 质粒DNA pGL3-Control的荧光标记 | 第57-58页 |
5. 荧光素酶检测 | 第58页 |
6. BCA法测定细胞蛋白含量 | 第58-60页 |
致谢 | 第60-61页 |