| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 1 文献综述 | 第14-21页 |
| ·鱼类免疫系统的研究进展 | 第14-17页 |
| ·鱼类免疫器官和组织 | 第14-15页 |
| ·鱼类免疫细胞 | 第15-16页 |
| ·体液免疫因子 | 第16-17页 |
| ·V(D)J 重组与 RAG 蛋白 | 第17-20页 |
| ·V(D)J 重组 | 第17-18页 |
| ·RAG 蛋白 | 第18-20页 |
| ·本研究的目的意义 | 第20-21页 |
| 2 红笛鲷 rag1 和 rag2 基因的克隆及序列分析 | 第21-45页 |
| ·实验材料 | 第21-23页 |
| ·实验用鱼 | 第21页 |
| ·质粒和受体菌 | 第21页 |
| ·实验仪器 | 第21-22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·主要溶液和试剂的配制 | 第22页 |
| ·生物信息学分析所用软件 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-32页 |
| ·红笛鲷总 RNA 的提取 | 第23页 |
| ·DH5α感受态的制备 | 第23页 |
| ·红笛鲷 rag1 和 rag2 基因的 RACE 克隆 | 第23-32页 |
| ·结果与分析 | 第32-43页 |
| ·红笛鲷总 RNA 的提取 | 第32页 |
| ·3' RACE cDNA 一链的合成 | 第32-33页 |
| ·rag1 基因的克隆结果与分析 | 第33-39页 |
| ·rag2 基因的克隆结果与分析 | 第39-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 3 红笛鲷 rag1 和 rag2 基因的差异表达研究 | 第45-51页 |
| ·实验仪器及试剂 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-47页 |
| ·灭活溶藻弧菌的制备 | 第45页 |
| ·红笛鲷的暂养 | 第45页 |
| ·红笛鲷免疫实验及样品采集 | 第45页 |
| ·引物设计 | 第45-46页 |
| ·总 RNA 的 DNase I 消化 | 第46页 |
| ·荧光定量 PCR | 第46-47页 |
| ·数据统计与分析 | 第47页 |
| ·结果与分析 | 第47-50页 |
| ·灭活溶藻弧菌免疫红笛鲷前后 rag1 和 rag2 的组织表达差异 | 第47-48页 |
| ·灭活溶藻弧菌免疫红笛鲷后 rag1 和 rag2 在各个组织中的时间表达差异 | 第48-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| 4 红笛鲷 rag1 和 rag2 基因的原核表达 | 第51-72页 |
| ·实验材料 | 第51-54页 |
| ·菌株和质粒 | 第51页 |
| ·实验仪器 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51-52页 |
| ·蛋白电泳所用溶液 | 第52-53页 |
| ·包涵体提取所用溶液和试剂 | 第53页 |
| ·融合蛋白纯化所用溶液和试剂 | 第53-54页 |
| ·Western blot 所用溶液和试剂 | 第54页 |
| ·实验方法 | 第54-61页 |
| ·rag1 基因的原核表达 | 第54-59页 |
| ·rag2 基因的原核表达 | 第59-61页 |
| ·结果与分析 | 第61-69页 |
| ·rag1 基因的原核表达 | 第61-65页 |
| ·rag2 基因的原核表达 | 第65-69页 |
| ·讨论 | 第69-72页 |
| 5 兔抗红笛鲷 RAG2 多克隆抗体的制备及免疫组织化学分析 | 第72-78页 |
| ·实验材料 | 第72-73页 |
| ·实验动物 | 第72页 |
| ·实验仪器 | 第72页 |
| ·主要试剂 | 第72页 |
| ·ELISA 所用溶液和试剂 | 第72-73页 |
| ·冰冻切片相关试剂 | 第73页 |
| ·实验方法 | 第73-75页 |
| ·免疫原的制备 | 第73页 |
| ·取空白对照血清 | 第73页 |
| ·免疫方案与操作 | 第73页 |
| ·抗血清的制备 | 第73页 |
| ·血清效价的测定 | 第73-74页 |
| ·RAG2 融合蛋白的免疫反应性 | 第74页 |
| ·免疫组织化学分析 | 第74-75页 |
| ·结果与分析 | 第75-76页 |
| ·兔抗 RAG2 多克隆抗体效价测定 | 第75页 |
| ·RAG2 融合蛋白的免疫反应性 | 第75-76页 |
| ·免疫组织化学分析 | 第76页 |
| ·讨论 | 第76-78页 |
| 6 结论 | 第78-79页 |
| ·红笛鲷 rag1 和 rag2 基因的克隆 | 第78页 |
| ·红笛鲷 rag1 和 rag2 基因差异表达分析 | 第78页 |
| ·红笛鲷 rag1 和 rag2 基因的原核表达 | 第78页 |
| ·兔抗红笛鲷 RAG2 多克隆抗体的制备及免疫组织化学分析 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 作者简介 | 第89-90页 |
| 导师简介 | 第90页 |
