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苹果周期蛋白依赖性蛋白激酶基因MdCDKB1的克隆及表达分析

中文摘要第1-11页
Abstract第11-13页
1. 引言第13-29页
   ·苹果果实发育研究进展第13-14页
   ·细胞周期调节机制研究进展第14-25页
     ·细胞分裂第14页
     ·细胞周期第14-15页
     ·细胞周期蛋白和细胞周期蛋白激酶第15-19页
     ·细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂第19-20页
     ·细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶亚单位(CDK subunit, CKS)第20页
     ·成视网膜瘤蛋白(Retinoblastoma, Rbs)和 E2F 转录因子第20-21页
     ·细胞周期各时相的调控第21-23页
     ·外界因素对细胞周期的调控第23-25页
   ·周期蛋白激酶调控果实大小的研究进展第25-26页
   ·苹果叶片愈伤组织培养研究进展第26-28页
     ·苹果叶片愈伤组织的诱导培养的研究第26-27页
     ·影响愈伤组织诱导的因素第27-28页
   ·本研究的目的和意义第28-29页
2. 材料与方法第29-41页
   ·实验材料第29-32页
     ·植物材料与处理第29页
     ·菌株与质粒第29页
     ·主要药品试剂、试剂盒及仪器设备第29-30页
     ·PCR 引物合成与测序第30页
     ·培养基第30-32页
     ·植物生长调节剂及抗生素第32页
   ·实验方法第32-41页
     ·植物材料总 RNA 的提取第32-33页
     ·反转录 cDNA 第一链的合成第33页
     ·cDNA 全长基因序列的获得第33-35页
     ·PCR 产物的回收第35页
     ·DNA 片段与克隆载体的连接第35-36页
     ·质粒 DNA 的提取第36-37页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第37-38页
     ·苹果叶片愈伤组织的诱导第38-39页
     ·实时荧光定量 PCR第39-40页
     ·半定量 RT-PCR第40页
     ·本研究使用的软件第40-41页
3.结果与分析第41-63页
   ·周期蛋白依赖性蛋白激酶基因(MdCDKB1)分离第41-46页
     ·RNA 的提取及质量检测第41页
     ·RACE 扩增 MdCDKB1 基因全长序列第41页
     ·MdCDKB1 基因编码区全长序列扩增第41-42页
     ·MdCDKB1 氨基酸序列的分析第42-45页
     ·富士和国光 CDKB1 蛋白的生物信息学分析第45-46页
   ·苹果 MdCDKB1 基因在果实不同发育时期的表达分析第46-49页
     ·MdCDKB1;1 和 MdCDKB1;2 在国光果实发育过程中的表达第46-47页
     ·MdCDKB1;1 和 MdCDKB1;2 在富士果实发育过程中的表达第47-48页
     ·MdCDKB1 在国光和富士果实中的表达差异分析第48-49页
   ·苹果叶片愈伤组织的诱导以及细胞周期关键基因的表达分析第49-63页
     ·富士和国光叶片愈伤组织的诱导第49-52页
       ·外植体消毒时间的筛选第49-50页
       ·不同培养基对褐变的影响第50页
       ·暗培养条件对苹果叶片愈伤组织形成的影响第50-51页
       ·叶片放置方式对苹果愈伤组织形成的影响第51页
       ·6-BA 和 NAA 不同组合对离体叶片愈伤组织诱导的影响第51-52页
     ·生长素和细胞分裂素对苹果细胞周期关键基因表达的影响第52-55页
       ·生长素和细胞分裂素对苹果 MdCDKB1;1 基因表达的影响第53-54页
       ·生长素和细胞分裂素对苹果 MdCDKB1;2 基因表达的影响第54页
       ·生长素和细胞分裂素对苹果 MdCKS1 基因表达的影响第54-55页
     ·不同温度处理对苹果细胞周期关键基因表达的影响第55-63页
       ·不同温度处理对苹果 MdCDKB1;1 基因表达的影响第56-58页
       ·不同温度处理对苹果 MdCDKB1;2 基因表达的影响第58-60页
       ·不同温度处理对苹果 MdCKS1 基因表达的影响第60-63页
4. 讨论第63-68页
   ·MdCDKB1 在苹果不同发育时期的表达情况第63-64页
   ·国光和富士果实中 CDKB1 基因表达量与果实大小第64-65页
   ·苹果叶片愈伤组织的诱导的培养第65-66页
   ·生长素和细胞分裂素对 CDKB1 和 CKS1 基因表达的影响第66页
   ·低温对 CDKB1 和 CKS1 基因表达的影响第66-68页
5. 结论第68-69页
参考文献第69-83页
致谢第83-84页
硕士在读期间形成的论文第84页

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