摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-15页 |
第一章 绪论 | 第15-34页 |
·Xanthomonas oryzae pv. oryzae PX099~A 菌株基因组特征 | 第15页 |
·选择性σ因子对病原菌致病性及运动性的调控 | 第15-20页 |
·σ~B 因子 | 第17页 |
·σ~(38) 因子 | 第17页 |
·σ~(32) 因子 | 第17-18页 |
·σ~(28) 因子 | 第18页 |
·σ~(ECF) 因子 | 第18-19页 |
·σ~(54) 因子 | 第19-20页 |
·细菌鞭毛的合成调控机制 | 第20-24页 |
·周生鞭毛系统调控 | 第21页 |
·极生鞭毛的调控系统 | 第21-24页 |
·双组分信号系统的结构与功能 | 第24-27页 |
·双组分信号系统组氨酸激酶传感蛋白的结构与功能 | 第24-25页 |
·双组分信号系统效应调节蛋白的结构与功能 | 第25-27页 |
·细菌鞭毛素对植物免疫防卫反应及其信号机制的激发 | 第27-32页 |
·鞭毛素的识别位点 | 第28-29页 |
·鞭毛素f1922 的受体 | 第29-30页 |
·f1922 诱导的防卫反应 | 第30-32页 |
·本研究的目的意义和技术路线 | 第32-34页 |
·研究目的和意义 | 第32-33页 |
·技术路线 | 第33-34页 |
第二章 水稻白叶枯病菌σ~(28)因子 FliAxoo 的基因功能分析 | 第34-61页 |
·实验材料 | 第34-36页 |
·菌株和质粒 | 第34-35页 |
·主要生化试剂与仪器 | 第35页 |
·培养基和菌株培养条件 | 第35-36页 |
·实验方法 | 第36-44页 |
·PX099~A 基因组DNA 的提取 | 第36页 |
·目的基因fliA 片段的扩增 | 第36-37页 |
·目的基因片段的纯化回收 | 第37页 |
·目的基因片段的连接转化 | 第37-38页 |
·质粒DNA 的提取 | 第38页 |
·突变体自杀载体的构建 | 第38-39页 |
·fliAxoo 基因突变体的构建 | 第39页 |
·△fliAxoo 互补菌株的构建 | 第39-40页 |
·基因序列的生物信息学分析 | 第40页 |
·鞭毛运动性测定 | 第40页 |
·透射电镜观察鞭毛形态 | 第40页 |
·生长曲线的测定 | 第40-41页 |
·胞外酶活性检测 | 第41页 |
·胞外多糖分泌检测及菌落形态观察 | 第41页 |
·突变体致病性测定 | 第41页 |
·细菌总RNA 的提取 | 第41-42页 |
·细菌总RNA 的反转录 | 第42-43页 |
·相关基因实时荧光定量PCR 引物设计 | 第43-44页 |
·相关基因实时荧光定量PCR 反应程序及体系 | 第44页 |
·结果与分析 | 第44-57页 |
·PX099~A 鞭毛基因簇结构分析 | 第44-45页 |
·目的基因的克隆 | 第45-46页 |
·fliAxoo 生物信息学分析 | 第46-49页 |
·△fliAxoo 突变体菌株的构建 | 第49-50页 |
·△fliAxoo 互补菌株的构建 | 第50-51页 |
·△fliAxoo 鞭毛运动性测定 | 第51-52页 |
·透射电镜观察△fliAxoo 鞭毛形态 | 第52页 |
·△fliAxoo 生长曲线的测定 | 第52-53页 |
·△fliAxoo 胞外酶活性检测 | 第53页 |
·△fliAxoo 胞外多糖分泌测定 | 第53页 |
·△fliAxoo 致病性测定 | 第53-55页 |
·σ~(54) 因子、FleQ 和σ~(28) 因子共同调控鞭毛合成 | 第55-57页 |
·小结与讨论 | 第57-61页 |
第三章 水稻白叶枯病菌应答调节蛋白 FlgRRxoo 功能分析 | 第61-76页 |
·实验材料 | 第61-62页 |
·菌株和质粒 | 第61页 |
·主要生化试剂与仪器 | 第61-62页 |
·培养基和菌株培养条件 | 第62页 |
·实验方法 | 第62-64页 |
·flgRRxoo 突变体自杀载体的构建 | 第62页 |
·flgRRxoo 突变体的构建 | 第62-63页 |
·△flgRRxoo 互补菌株的构建 | 第63页 |
·基因序列的生物信息学分析 | 第63页 |
·鞭毛运动性测定 | 第63页 |
·生长曲线的测定 | 第63页 |
·胞外酶活性检测 | 第63页 |
·胞外多糖分泌检测及菌落形态观察 | 第63页 |
·突变体致病性测定 | 第63页 |
·real-time 实时荧光定量 PCR 定量分析部分基因转录差异 | 第63-64页 |
·结果与分析 | 第64-73页 |
·flgRRxoo 的生物信息学分析 | 第64-67页 |
·△flgRRxoo 突变体的构建 | 第67-68页 |
·△flgRRxoo 互补菌株的构建 | 第68页 |
·突变体鞭毛运动性分析 | 第68-69页 |
·生长曲线的测定 | 第69页 |
·突变体菌株胞外酶活性分析 | 第69-70页 |
·突变体胞外多糖分泌检测及菌落形态观察 | 第70页 |
·突变体致病性分析 | 第70-72页 |
·△flgRRxoo 中鞭毛合成调控基因及胞外多糖合成相关基因的表达 | 第72-73页 |
·小结与讨论 | 第73-76页 |
·flgRRxoo 对菌体运动性及鞭毛调控因子的影响 | 第73-74页 |
·flgRRxoo 对水稻毒性的影响 | 第74页 |
·flgRRxoo 与其同源基因的功能差异 | 第74-76页 |
第四章 水稻白叶枯病菌鞭毛素蛋白 FliCxoo 基因功能分析 | 第76-97页 |
·实验材料 | 第76-78页 |
·菌株和质粒 | 第76-77页 |
·实验所需溶液及配制 | 第77页 |
·培养基和菌株培养条件 | 第77-78页 |
·实验方法 | 第78-81页 |
·fliCxoo 突变体自杀载体的构建 | 第78-79页 |
·fliCxoo 突变体的构建 | 第79页 |
·△fliCxoo 互补菌株的构建 | 第79页 |
·Xcv Xv18 菌株fliC 基因的扩增 | 第79页 |
·基因序列的生物信息学分析 | 第79页 |
·鞭毛运动性测定 | 第79-80页 |
·透射电镜观察鞭毛形态 | 第80页 |
·生长曲线的测定 | 第80页 |
·胞外酶活性检测 | 第80页 |
·突变体胞外多糖分泌检测 | 第80页 |
·突变体致病性测定 | 第80页 |
·水稻愈伤组织和悬浮细胞的培养 | 第80页 |
·鞭毛蛋白的提取 | 第80-81页 |
·鞭毛蛋白诱导水稻悬浮细胞碱化反应的测定 | 第81页 |
·鞭毛蛋白诱导水稻悬浮细胞产生H202 的测定 | 第81页 |
·鞭毛蛋白诱导水稻悬浮细胞死亡率的测定 | 第81页 |
·结果与分析 | 第81-94页 |
·fliCxoo 的生物信息学分析 | 第81-87页 |
·△fliCxoo 突变体的构建 | 第87-88页 |
·△fliCxoo 互补菌株的构建 | 第88页 |
·△fliCxoo 鞭毛运动性测定 | 第88页 |
·透射电镜观察△fliCxoo 鞭毛形态 | 第88页 |
·△fliCxoo 生长曲线的测定 | 第88-90页 |
·△fliCxoo 胞外酶活性检测 | 第90页 |
·△fliCxoo 胞外多糖分泌测定 | 第90页 |
·△fliCxoo 致病性测定 | 第90-91页 |
·水稻愈伤组织和悬浮细胞的培养 | 第91-92页 |
·鞭毛蛋白的提取 | 第92页 |
·鞭毛蛋白诱导水稻悬浮细胞碱化反应的测定 | 第92-93页 |
·鞭毛蛋白诱导水稻悬浮细胞产生H_2O_2 的测定 | 第93-94页 |
·鞭毛蛋白诱导水稻悬浮细胞死亡率的测定 | 第94页 |
·小结与讨论 | 第94-97页 |
·fliCxoo 的功能分析 | 第94-95页 |
·PX099A 鞭毛素蛋白的糖基化修饰 | 第95-97页 |
第五章 全文结论 | 第97-98页 |
参考文献 | 第98-113页 |
致谢 | 第113-114页 |
作者简历 | 第114页 |