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水稻白叶枯病菌σ因子对鞭毛运动性调控机制及鞭毛素蛋白FliCxoo功能分析

摘要第1-8页
Abstract第8-15页
第一章 绪论第15-34页
   ·Xanthomonas oryzae pv. oryzae PX099~A 菌株基因组特征第15页
   ·选择性σ因子对病原菌致病性及运动性的调控第15-20页
     ·σ~B 因子第17页
     ·σ~(38) 因子第17页
     ·σ~(32) 因子第17-18页
     ·σ~(28) 因子第18页
     ·σ~(ECF) 因子第18-19页
     ·σ~(54) 因子第19-20页
   ·细菌鞭毛的合成调控机制第20-24页
     ·周生鞭毛系统调控第21页
     ·极生鞭毛的调控系统第21-24页
   ·双组分信号系统的结构与功能第24-27页
     ·双组分信号系统组氨酸激酶传感蛋白的结构与功能第24-25页
     ·双组分信号系统效应调节蛋白的结构与功能第25-27页
   ·细菌鞭毛素对植物免疫防卫反应及其信号机制的激发第27-32页
     ·鞭毛素的识别位点第28-29页
     ·鞭毛素f1922 的受体第29-30页
     ·f1922 诱导的防卫反应第30-32页
   ·本研究的目的意义和技术路线第32-34页
     ·研究目的和意义第32-33页
     ·技术路线第33-34页
第二章 水稻白叶枯病菌σ~(28)因子 FliAxoo 的基因功能分析第34-61页
   ·实验材料第34-36页
     ·菌株和质粒第34-35页
     ·主要生化试剂与仪器第35页
     ·培养基和菌株培养条件第35-36页
   ·实验方法第36-44页
     ·PX099~A 基因组DNA 的提取第36页
     ·目的基因fliA 片段的扩增第36-37页
     ·目的基因片段的纯化回收第37页
     ·目的基因片段的连接转化第37-38页
     ·质粒DNA 的提取第38页
     ·突变体自杀载体的构建第38-39页
     ·fliAxoo 基因突变体的构建第39页
     ·△fliAxoo 互补菌株的构建第39-40页
     ·基因序列的生物信息学分析第40页
     ·鞭毛运动性测定第40页
     ·透射电镜观察鞭毛形态第40页
     ·生长曲线的测定第40-41页
     ·胞外酶活性检测第41页
     ·胞外多糖分泌检测及菌落形态观察第41页
     ·突变体致病性测定第41页
     ·细菌总RNA 的提取第41-42页
     ·细菌总RNA 的反转录第42-43页
     ·相关基因实时荧光定量PCR 引物设计第43-44页
     ·相关基因实时荧光定量PCR 反应程序及体系第44页
   ·结果与分析第44-57页
     ·PX099~A 鞭毛基因簇结构分析第44-45页
     ·目的基因的克隆第45-46页
     ·fliAxoo 生物信息学分析第46-49页
     ·△fliAxoo 突变体菌株的构建第49-50页
     ·△fliAxoo 互补菌株的构建第50-51页
     ·△fliAxoo 鞭毛运动性测定第51-52页
     ·透射电镜观察△fliAxoo 鞭毛形态第52页
     ·△fliAxoo 生长曲线的测定第52-53页
     ·△fliAxoo 胞外酶活性检测第53页
     ·△fliAxoo 胞外多糖分泌测定第53页
     ·△fliAxoo 致病性测定第53-55页
     ·σ~(54) 因子、FleQ 和σ~(28) 因子共同调控鞭毛合成第55-57页
   ·小结与讨论第57-61页
第三章 水稻白叶枯病菌应答调节蛋白 FlgRRxoo 功能分析第61-76页
   ·实验材料第61-62页
     ·菌株和质粒第61页
     ·主要生化试剂与仪器第61-62页
     ·培养基和菌株培养条件第62页
   ·实验方法第62-64页
     ·flgRRxoo 突变体自杀载体的构建第62页
     ·flgRRxoo 突变体的构建第62-63页
     ·△flgRRxoo 互补菌株的构建第63页
     ·基因序列的生物信息学分析第63页
     ·鞭毛运动性测定第63页
     ·生长曲线的测定第63页
     ·胞外酶活性检测第63页
     ·胞外多糖分泌检测及菌落形态观察第63页
     ·突变体致病性测定第63页
     ·real-time 实时荧光定量 PCR 定量分析部分基因转录差异第63-64页
   ·结果与分析第64-73页
     ·flgRRxoo 的生物信息学分析第64-67页
     ·△flgRRxoo 突变体的构建第67-68页
     ·△flgRRxoo 互补菌株的构建第68页
     ·突变体鞭毛运动性分析第68-69页
     ·生长曲线的测定第69页
     ·突变体菌株胞外酶活性分析第69-70页
     ·突变体胞外多糖分泌检测及菌落形态观察第70页
     ·突变体致病性分析第70-72页
     ·△flgRRxoo 中鞭毛合成调控基因及胞外多糖合成相关基因的表达第72-73页
   ·小结与讨论第73-76页
     ·flgRRxoo 对菌体运动性及鞭毛调控因子的影响第73-74页
     ·flgRRxoo 对水稻毒性的影响第74页
     ·flgRRxoo 与其同源基因的功能差异第74-76页
第四章 水稻白叶枯病菌鞭毛素蛋白 FliCxoo 基因功能分析第76-97页
   ·实验材料第76-78页
     ·菌株和质粒第76-77页
     ·实验所需溶液及配制第77页
     ·培养基和菌株培养条件第77-78页
   ·实验方法第78-81页
     ·fliCxoo 突变体自杀载体的构建第78-79页
     ·fliCxoo 突变体的构建第79页
     ·△fliCxoo 互补菌株的构建第79页
     ·Xcv Xv18 菌株fliC 基因的扩增第79页
     ·基因序列的生物信息学分析第79页
     ·鞭毛运动性测定第79-80页
     ·透射电镜观察鞭毛形态第80页
     ·生长曲线的测定第80页
     ·胞外酶活性检测第80页
     ·突变体胞外多糖分泌检测第80页
     ·突变体致病性测定第80页
     ·水稻愈伤组织和悬浮细胞的培养第80页
     ·鞭毛蛋白的提取第80-81页
     ·鞭毛蛋白诱导水稻悬浮细胞碱化反应的测定第81页
     ·鞭毛蛋白诱导水稻悬浮细胞产生H202 的测定第81页
     ·鞭毛蛋白诱导水稻悬浮细胞死亡率的测定第81页
   ·结果与分析第81-94页
     ·fliCxoo 的生物信息学分析第81-87页
     ·△fliCxoo 突变体的构建第87-88页
     ·△fliCxoo 互补菌株的构建第88页
     ·△fliCxoo 鞭毛运动性测定第88页
     ·透射电镜观察△fliCxoo 鞭毛形态第88页
     ·△fliCxoo 生长曲线的测定第88-90页
     ·△fliCxoo 胞外酶活性检测第90页
     ·△fliCxoo 胞外多糖分泌测定第90页
     ·△fliCxoo 致病性测定第90-91页
     ·水稻愈伤组织和悬浮细胞的培养第91-92页
     ·鞭毛蛋白的提取第92页
     ·鞭毛蛋白诱导水稻悬浮细胞碱化反应的测定第92-93页
     ·鞭毛蛋白诱导水稻悬浮细胞产生H_2O_2 的测定第93-94页
     ·鞭毛蛋白诱导水稻悬浮细胞死亡率的测定第94页
   ·小结与讨论第94-97页
     ·fliCxoo 的功能分析第94-95页
     ·PX099A 鞭毛素蛋白的糖基化修饰第95-97页
第五章 全文结论第97-98页
参考文献第98-113页
致谢第113-114页
作者简历第114页

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