中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-18页 |
1 绪论 | 第18-28页 |
·研究背景 | 第18-23页 |
·植物检疫问题的由来 | 第18-19页 |
·靶标疫害生物检验检疫技术研究意义 | 第19-21页 |
·国内外植物疫害生物检疫检验技术发展趋势 | 第21-23页 |
·研究目的和意义 | 第23页 |
·研究目标和总体设计 | 第23-24页 |
·研究目标 | 第23-24页 |
·研究思路构架 | 第24页 |
·研究的主要内容及技术路线 | 第24页 |
·本研究的创新性 | 第24-28页 |
2 文献综述 | 第28-62页 |
·柑桔溃疡病(Citrus Bacterial Canker Disease)及其检疫检验 | 第28-35页 |
·病害发生历史与经济重要性 | 第28页 |
·病害循环与寄主范围 | 第28-29页 |
·柑桔溃疡病菌的分类及命名变更 | 第29-30页 |
·柑桔溃疡病菌的基因组研究进展 | 第30-31页 |
·柑桔溃疡病菌的检疫检验技术 | 第31-34页 |
·病害根除计划与检疫除害 | 第34-35页 |
·柑桔黄龙病(Citrus Huanglongbing,HLB) | 第35-47页 |
·病害发生及经济重要性 | 第35-38页 |
·柑桔黄龙病综合治理 | 第38-40页 |
·柑桔黄龙病病原菌研究历史与现状 | 第40-42页 |
·柑桔黄龙病诊断鉴定 | 第42-47页 |
·小麦矮腥黑穗病(Dwarf Bunt Disease of Wheat) | 第47-56页 |
·病害发生分布与经济重要性 | 第47-48页 |
·TCK的生物学特性 | 第48-50页 |
·TCK的传统检验检疫技术 | 第50-53页 |
·真菌差异基因筛选与克隆技术研究 | 第53-54页 |
·腥黑穗菌分子鉴别技术 | 第54-56页 |
·马铃薯病毒病(Potato Virus Diseases)及其 RT-PCR同步检测 | 第56-62页 |
·病害发生及经济重要性 | 第56-57页 |
·马铃薯病毒检测技术研究现状 | 第57-59页 |
·核酸斑点杂交技术(NASH) | 第59-60页 |
·逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第60-62页 |
3 柑桔溃疡病分子检测技术研究 | 第62-80页 |
·引言 | 第62-64页 |
·材料和方法 | 第64-71页 |
·试验材料 | 第64-67页 |
·试验方法 | 第67-71页 |
·实际检测与准确性验证 | 第71页 |
·结果与分析 | 第71-77页 |
·特异性引物在核苷酸序列数据库中同源性比对结果 | 第71页 |
·PCR反应条件和扩增程序优化结果 | 第71-72页 |
·PCR检测的性能 | 第72-74页 |
·扩增靶 DNA片段的特异性鉴定 | 第74-76页 |
·柑桔溃疡病菌重组阳性对照的建立 | 第76页 |
·柑桔溃疡病实际应用检测效果 | 第76-77页 |
·讨论 | 第77-79页 |
·溃疡病菌不同引物对的检测性能比较 | 第77-78页 |
·靶标片段的克隆与测序 | 第78页 |
·PCR样品制备 | 第78页 |
·无害化参照体系的构建与意义 | 第78-79页 |
·本章小结 | 第79-80页 |
4 柑桔黄龙病菌分子检测技术研究 | 第80-102页 |
·引言 | 第80-81页 |
·材料与方法 | 第81-85页 |
·供试柑桔样品和柑桔木虱 | 第81页 |
·DNA阳性对照品LA靶片段的重组质粒 DNA克隆转化 | 第81-82页 |
·PCR引物和探针来源与序列 | 第82页 |
·柑桔黄龙病 DNA样品制备方法比较 | 第82-83页 |
·柑桔黄龙病菌 PCR扩增体系 | 第83-84页 |
·柑桔黄龙病的实际检测与果园动态监测 | 第84-85页 |
·结果与分析 | 第85-96页 |
·柑桔黄龙病高效制样技术 | 第85-87页 |
·常规 PCR的检测性能 | 第87-88页 |
·常规 PCR检测灵敏度 | 第88-89页 |
·柑桔黄龙病 PCR检测体系优化 | 第89-90页 |
·柑桔黄龙病田间PCR实际检测 | 第90-91页 |
·实时荧光 PCR的检测性能 | 第91-96页 |
·讨论 | 第96-98页 |
·本章小结 | 第98-102页 |
5 小麦矮腥黑穗菌差异基因克隆与 PCR检验检疫技术 | 第102-118页 |
·引言 | 第102-103页 |
·材料与方法 | 第103-110页 |
·材料 | 第103-105页 |
·方法 | 第105-107页 |
·差异 DNA片段的RAPD引物介导的半特异性 PCR法筛选与克隆 | 第107-110页 |
·结果与分析 | 第110-116页 |
·TCK、TCT冬孢子萌发结果 | 第110-111页 |
·基因组 DNA的提取结果以及定量 | 第111页 |
·RAPD引物介导的半特异性 PCR法筛选差异 DNA片段 | 第111-116页 |
·讨论 | 第116-117页 |
·RAPD引物介导的半特异性 PCR法筛选差异基因分析 | 第116-117页 |
·差异基因片段的同源性分析 | 第117页 |
·小结 | 第117-118页 |
6 马铃薯种苗病毒同步分子检测技术研究 | 第118-140页 |
·引言 | 第118-119页 |
·实验材料与方法 | 第119-124页 |
·供试材料 | 第119-120页 |
·方法 | 第120-124页 |
·研究结果与分析 | 第124-136页 |
·马铃薯病毒ssRNA的提取 | 第124-126页 |
·马铃薯病毒的两步法 RT-PCR检测 | 第126-131页 |
·多重RT-PCR检测 | 第131-132页 |
·RT-PCR扩增产物的克隆与测序 | 第132-133页 |
·RT-PCR对马铃薯病毒检测性能测定 | 第133页 |
·两步法多重RT-PCR检测试剂盒及实际运用 | 第133-136页 |
·讨论 | 第136-137页 |
·马铃薯病毒RNA的快速制备方法 | 第136页 |
·两步法RT-PCR检测体系 | 第136页 |
·检测体系的稳定性,特异性与灵敏度 | 第136-137页 |
·本章小结 | 第137-140页 |
7 固相化分子检测试剂盒研制与测评 | 第140-146页 |
·前言-诊断检测试剂的共性问题 | 第140页 |
·材料与方法 | 第140-141页 |
·供试靶标生物及试剂 | 第140页 |
·试验方法 | 第140-141页 |
·结果与分析 | 第141-144页 |
·生物活性大分子稳定剂的组成优化 | 第141页 |
·不同贮存方式对贮存效果的影响 | 第141-142页 |
·固相化检测试剂盒的研制与应用 | 第142-144页 |
·本章小结 | 第144-146页 |
8 结论与展望 | 第146-148页 |
·主要结论 | 第146-147页 |
·论文创新点 | 第147-148页 |
9 后续研究工作的展望 | 第148-150页 |
致谢 | 第150-152页 |
参考文献 | 第152-164页 |
附录 A | 第164-166页 |
附录 B | 第166-168页 |
附录 C | 第168-170页 |
附录 D | 第170-174页 |
附录 E | 第174-176页 |
附录 F | 第176-178页 |
附录 G | 第178-179页 |
独创性声明 | 第179页 |
学位论文版权使用授权书 | 第179页 |