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植物疫害生物分子检验检疫技术研究与固相化检测试剂盒研制

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-18页
1 绪论第18-28页
   ·研究背景第18-23页
     ·植物检疫问题的由来第18-19页
     ·靶标疫害生物检验检疫技术研究意义第19-21页
     ·国内外植物疫害生物检疫检验技术发展趋势第21-23页
   ·研究目的和意义第23页
   ·研究目标和总体设计第23-24页
     ·研究目标第23-24页
     ·研究思路构架第24页
   ·研究的主要内容及技术路线第24页
   ·本研究的创新性第24-28页
2 文献综述第28-62页
   ·柑桔溃疡病(Citrus Bacterial Canker Disease)及其检疫检验第28-35页
     ·病害发生历史与经济重要性第28页
     ·病害循环与寄主范围第28-29页
     ·柑桔溃疡病菌的分类及命名变更第29-30页
     ·柑桔溃疡病菌的基因组研究进展第30-31页
     ·柑桔溃疡病菌的检疫检验技术第31-34页
     ·病害根除计划与检疫除害第34-35页
   ·柑桔黄龙病(Citrus Huanglongbing,HLB)第35-47页
     ·病害发生及经济重要性第35-38页
     ·柑桔黄龙病综合治理第38-40页
     ·柑桔黄龙病病原菌研究历史与现状第40-42页
     ·柑桔黄龙病诊断鉴定第42-47页
   ·小麦矮腥黑穗病(Dwarf Bunt Disease of Wheat)第47-56页
     ·病害发生分布与经济重要性第47-48页
     ·TCK的生物学特性第48-50页
     ·TCK的传统检验检疫技术第50-53页
     ·真菌差异基因筛选与克隆技术研究第53-54页
     ·腥黑穗菌分子鉴别技术第54-56页
   ·马铃薯病毒病(Potato Virus Diseases)及其 RT-PCR同步检测第56-62页
     ·病害发生及经济重要性第56-57页
     ·马铃薯病毒检测技术研究现状第57-59页
     ·核酸斑点杂交技术(NASH)第59-60页
     ·逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)第60-62页
3 柑桔溃疡病分子检测技术研究第62-80页
   ·引言第62-64页
   ·材料和方法第64-71页
     ·试验材料第64-67页
     ·试验方法第67-71页
     ·实际检测与准确性验证第71页
   ·结果与分析第71-77页
     ·特异性引物在核苷酸序列数据库中同源性比对结果第71页
     ·PCR反应条件和扩增程序优化结果第71-72页
     ·PCR检测的性能第72-74页
     ·扩增靶 DNA片段的特异性鉴定第74-76页
     ·柑桔溃疡病菌重组阳性对照的建立第76页
     ·柑桔溃疡病实际应用检测效果第76-77页
   ·讨论第77-79页
     ·溃疡病菌不同引物对的检测性能比较第77-78页
     ·靶标片段的克隆与测序第78页
     ·PCR样品制备第78页
     ·无害化参照体系的构建与意义第78-79页
   ·本章小结第79-80页
4 柑桔黄龙病菌分子检测技术研究第80-102页
   ·引言第80-81页
   ·材料与方法第81-85页
     ·供试柑桔样品和柑桔木虱第81页
     ·DNA阳性对照品LA靶片段的重组质粒 DNA克隆转化第81-82页
     ·PCR引物和探针来源与序列第82页
     ·柑桔黄龙病 DNA样品制备方法比较第82-83页
     ·柑桔黄龙病菌 PCR扩增体系第83-84页
     ·柑桔黄龙病的实际检测与果园动态监测第84-85页
   ·结果与分析第85-96页
     ·柑桔黄龙病高效制样技术第85-87页
     ·常规 PCR的检测性能第87-88页
     ·常规 PCR检测灵敏度第88-89页
     ·柑桔黄龙病 PCR检测体系优化第89-90页
     ·柑桔黄龙病田间PCR实际检测第90-91页
     ·实时荧光 PCR的检测性能第91-96页
   ·讨论第96-98页
   ·本章小结第98-102页
5 小麦矮腥黑穗菌差异基因克隆与 PCR检验检疫技术第102-118页
   ·引言第102-103页
   ·材料与方法第103-110页
     ·材料第103-105页
     ·方法第105-107页
     ·差异 DNA片段的RAPD引物介导的半特异性 PCR法筛选与克隆第107-110页
   ·结果与分析第110-116页
     ·TCK、TCT冬孢子萌发结果第110-111页
     ·基因组 DNA的提取结果以及定量第111页
     ·RAPD引物介导的半特异性 PCR法筛选差异 DNA片段第111-116页
   ·讨论第116-117页
     ·RAPD引物介导的半特异性 PCR法筛选差异基因分析第116-117页
     ·差异基因片段的同源性分析第117页
   ·小结第117-118页
6 马铃薯种苗病毒同步分子检测技术研究第118-140页
   ·引言第118-119页
   ·实验材料与方法第119-124页
     ·供试材料第119-120页
     ·方法第120-124页
   ·研究结果与分析第124-136页
     ·马铃薯病毒ssRNA的提取第124-126页
     ·马铃薯病毒的两步法 RT-PCR检测第126-131页
     ·多重RT-PCR检测第131-132页
     ·RT-PCR扩增产物的克隆与测序第132-133页
     ·RT-PCR对马铃薯病毒检测性能测定第133页
     ·两步法多重RT-PCR检测试剂盒及实际运用第133-136页
   ·讨论第136-137页
     ·马铃薯病毒RNA的快速制备方法第136页
     ·两步法RT-PCR检测体系第136页
     ·检测体系的稳定性,特异性与灵敏度第136-137页
   ·本章小结第137-140页
7 固相化分子检测试剂盒研制与测评第140-146页
   ·前言-诊断检测试剂的共性问题第140页
   ·材料与方法第140-141页
     ·供试靶标生物及试剂第140页
     ·试验方法第140-141页
   ·结果与分析第141-144页
     ·生物活性大分子稳定剂的组成优化第141页
     ·不同贮存方式对贮存效果的影响第141-142页
     ·固相化检测试剂盒的研制与应用第142-144页
   ·本章小结第144-146页
8 结论与展望第146-148页
   ·主要结论第146-147页
   ·论文创新点第147-148页
9 后续研究工作的展望第148-150页
致谢第150-152页
参考文献第152-164页
附录 A第164-166页
附录 B第166-168页
附录 C第168-170页
附录 D第170-174页
附录 E第174-176页
附录 F第176-178页
附录 G第178-179页
独创性声明第179页
学位论文版权使用授权书第179页

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