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谷胱甘肽过氧化物酶3在小鼠围着床期子宫中的表达、调节与功能

摘要第1-12页
Abstract第12-14页
1 引言第14-25页
   ·胚胎着床与蜕膜化第14-16页
     ·胚胎着床第14-15页
     ·蜕膜化第15-16页
   ·类固醇激素与生殖第16-17页
     ·雌激素与生殖第16页
     ·孕酮与生殖第16-17页
   ·硒蛋白GPX3 及其家族成员第17-21页
     ·硒元素与硒蛋白第17-18页
     ·GPX 家族第18页
     ·GPX 家族主要成员第18-21页
   ·活性氧的来源和消除第21-23页
   ·HIF1α在子宫中的作用第23页
   ·本研究的目的和意义第23-25页
2 材料与方法第25-44页
   ·实验动物和实验动物模型第25-27页
     ·实验动物第25页
     ·早期妊娠模型第25页
     ·假孕模型第25页
     ·延迟着床和激活模型第25-26页
     ·类固醇激素处理模型第26页
     ·人工诱导蜕膜化模型第26页
     ·腹腔注射巯基琥珀酸和亚硒酸钠第26-27页
   ·原位杂交第27-32页
     ·小鼠Gpx3 cRNA 探针的制备第27-30页
     ·原位杂交流程第30-32页
   ·细胞培养和细胞处理第32-36页
     ·原代子宫内膜基质细胞的分离与培养第32-33页
     ·原代基质细胞的转染第33-34页
     ·原代基质细胞的体外诱导蜕膜化第34-35页
     ·原代基质细胞的缺氧、孕酮和抑制剂处理第35页
     ·原代基质细胞的8Br-cAMP 处理第35页
     ·原代基质细胞的亚硒酸钠浓度梯度处理第35-36页
   ·载体构建与荧光素酶活性分析第36-37页
     ·Gpx3 的3′-UTR 报告载体的构建第36页
     ·荧光素酶活性分析第36-37页
   ·Real-time RT-PCR第37-38页
     ·引物序列第37-38页
     ·总RNA 的提取、消化与反转录第38页
     ·PCR 反应第38页
   ·Western blot第38-42页
     ·相关溶液的制备第38-40页
     ·蛋白样品的提取和准备第40页
     ·SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳第40-41页
     ·免疫印记和显影第41-42页
   ·过氧化氢含量的测定第42页
     ·小鼠子宫组织中过氧化氢含量的测定第42页
     ·培养细胞的上清中过氧化氢含量的测定第42页
   ·数据统计和分析第42-44页
     ·荧光素酶活性数据分析第42-43页
     ·Real-time RT-PCR 数据分析第43页
     ·过氧化氢的测定数据分析第43-44页
3 结果第44-65页
   ·GPX3 在小鼠子宫中的表达第44-47页
     ·GPX3 在早期妊娠小鼠子宫中的表达第44-45页
     ·GPX3 在延迟着床和延迟着床激活小鼠子宫中的表达第45-46页
     ·GPX3 在假孕小鼠子宫中的表达第46页
     ·GPX3 在人工诱导蜕膜化小鼠子宫中的表达第46-47页
     ·GPX3 在激素处理小鼠子宫中的表达第47页
   ·GPX 家族其它成员在早期妊娠小鼠子宫中的表达第47-49页
     ·原位杂交检测GPX 家族其它成员的表达第47-49页
     ·Real-time RT-PCR 检测GPX 家族其它成员的表达第49页
   ·GPX3 的转录和转录后调节第49-56页
     ·硒元素对GPX3 的转录后调节第49-52页
     ·缺氧对GPX3 的调节第52-53页
     ·孕酮对GPX3 的调节第53-54页
     ·8Br-cAMP 对GPX3 的调节第54-56页
     ·miR-138 对GPX3 的调节第56页
   ·GPX3 在小鼠子宫中的功能第56-61页
     ·子宫内膜中的过氧化氢含量第56-58页
     ·体外蜕膜化模型中的过氧化氢含量第58页
     ·干扰Gpx3 后的过氧化氢含量第58-60页
     ·腹腔注射GPX 酶活性抑制剂和过量亚硒酸钠第60-61页
   ·人和恒河猴子宫中GPX3 的表达与功能第61-65页
     ·人和恒河猴子宫内膜中GPX3 的表达第61-63页
     ·人子宫内膜基质细胞中GPX3 的功能第63-65页
4 讨论第65-72页
   ·GPX3 在子宫内膜中的表达第65-66页
   ·GPX3 的相关调节第66-70页
     ·硒元素对GPX3 的调节与功能第66-67页
     ·孕酮通过PR/HIF1α调节GPX3第67-68页
     ·8Br-cAMP 上调GPX3第68页
     ·miR-138 下调GPX3第68-70页
   ·GPX3 的相关功能第70-72页
     ·GPX3 的抗氧化应激功能第70-71页
     ·GPX 与早期妊娠过程第71-72页
5 结论第72-73页
致谢第73-74页
参考文献第74-89页
图版第89-97页
中英文对照表第97-98页
攻读博士期间发表的论文第98页

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