| 英文缩写词 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一章 综述 | 第12-24页 |
| ·芸薹属作物的遗传转化研究现状以及在育种上的前景 | 第12-19页 |
| ·植物转基因沉默与病毒抗性 | 第19-22页 |
| ·本实验研究意义 | 第22-24页 |
| 第二章 基因TuMV CP反向重复表达载体的构建以及对四九菜心的转化 | 第24-42页 |
| ·材料和方法 | 第24-33页 |
| ·材料 | 第24页 |
| ·TuMV CP反向重复载体的构建 | 第24-29页 |
| ·反向重复结构的引物设计 | 第24-25页 |
| ·目的片段的获得 | 第25页 |
| ·载体的构建 | 第25-26页 |
| ·重组质粒载体的转化 | 第26-28页 |
| ·PCR检测与载体的酶切鉴定 | 第28-29页 |
| ·农杆菌介导法转化四九菜心 | 第29-33页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第29-30页 |
| ·抗性苗的PCR检测 | 第30-32页 |
| ·T1代植株的鉴定 | 第32-33页 |
| ·真空渗入法转化四九菜心 | 第33页 |
| ·种子低温处理和幼苗的准备 | 第33页 |
| ·菌液制备 | 第33页 |
| ·真空渗入法转化 | 第33页 |
| ·种子收获 | 第33页 |
| ·转化株的筛选 | 第33页 |
| ·结果与分析 | 第33-39页 |
| ·TuMV CP反向重复载体的构建 | 第33-34页 |
| ·三亲融合法获得表达载体 | 第34页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化和再生苗的获得 | 第34-35页 |
| ·DNA的提取 | 第35页 |
| ·PCR检测 | 第35-37页 |
| ·PCR扩增NPTII基因 | 第35-36页 |
| ·PCR扩增T区以外的片段 | 第36页 |
| ·PCR扩增目的基因 | 第36-37页 |
| ·pBI TCP载体的转化效率 | 第37页 |
| ·T1代种子的检测 | 第37-39页 |
| ·Kan筛选 | 第37-38页 |
| ·PCR鉴定 | 第38页 |
| ·抗病毒鉴定 | 第38-39页 |
| ·真空渗入法的Kan筛选 | 第39页 |
| ·讨论 | 第39-42页 |
| ·反向重复载体的构建 | 第39-40页 |
| ·农杆菌介导法 | 第40页 |
| ·真空渗入法 | 第40页 |
| ·转基因植株的检测 | 第40-41页 |
| ·TuMV介导的抗性机制 | 第41-42页 |
| 第三章 黄瓜花叶病毒和芜菁花叶病毒嵌合载体(pBI TC3)转化甘蓝 | 第42-57页 |
| ·材料与方法 | 第42-47页 |
| ·材料 | 第42页 |
| ·甘蓝离体再生 | 第42-43页 |
| ·无菌苗的制备 | 第42-43页 |
| ·不定芽的诱导与分化 | 第43页 |
| ·甘蓝的遗传转化 | 第43-44页 |
| ·根癌农杆菌的活化 | 第43页 |
| ·外植体的浸染及筛选 | 第43-44页 |
| ·壮苗生根和移栽驯化 | 第44页 |
| ·转化植株的分子检测 | 第44-47页 |
| ·利用CTAB法小量提取植物总DNA | 第44页 |
| ·NPTⅡ基因PCR检测 | 第44-45页 |
| ·T区以外的排除检测 | 第45页 |
| ·目的片段的PCR检测 | 第45-46页 |
| ·转化植物的Sourthern检测 | 第46-47页 |
| ·结果与分析 | 第47-55页 |
| ·甘蓝离体再生体系的建立 | 第47-51页 |
| ·外植体类型对甘蓝不定芽再生的影响 | 第47页 |
| ·苗龄对甘蓝不定芽分化的影响 | 第47-48页 |
| ·激素对甘蓝不定芽分化的影响 | 第48-50页 |
| ·AgNO_3对甘蓝不定芽离体再生的影响 | 第50页 |
| ·Kan处理对甘蓝不定芽分化频率的影响 | 第50-51页 |
| ·外植体的再生和再生芽的生根 | 第51-53页 |
| ·分子检测 | 第53-54页 |
| ·CTAB法小量提取植物总DNA | 第53页 |
| ·PCR扩增NPTⅡ基因 | 第53页 |
| ·PCR扩增T区以外的目的片段 | 第53-54页 |
| ·PCR扩增目的片段 | 第54页 |
| ·斑点杂交结果 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| ·甘蓝遗传体系的优化 | 第55-56页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第56-57页 |
| 第四章 小结和展望 | 第57-58页 |
| ·小结 | 第57页 |
| ·展望 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 硕士研究生期间发表的论文: | 第68页 |