| 中文摘要 | 第1-14页 |
| 英文摘要 | 第14-16页 |
| 前言 | 第16-36页 |
| 1 对虾白斑综合症病毒(WSSV)及其分子生物学研究 | 第16-34页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的研究概况 | 第16-19页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的发现及其命名 | 第16-17页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的大小和形态结构 | 第17-18页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的感染宿主及感染动物模型 | 第18页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的组织病理学 | 第18-19页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的分离及主要检测技术 | 第19-23页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的分离纯化 | 第19-20页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的检测 | 第20-23页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的基因组学研究 | 第23-25页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的蛋白质组学研究 | 第25-34页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的结构蛋白 | 第25-30页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的功能酶类 | 第30-32页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的其它功能基因 | 第32-34页 |
| 2 本论文研究的内容、目的和意义 | 第34-36页 |
| 第一部分 对虾白斑综合症病毒结构蛋白的质谱鉴定及生化分析 | 第36-51页 |
| 1 前言 | 第36页 |
| 2 材料和方法 | 第36-40页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-40页 |
| ·WSSV完整病毒和核衣壳的制备 | 第36-38页 |
| ·WSSV结构蛋白质谱鉴定 | 第38-39页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第39页 |
| ·Western blot分析 | 第39页 |
| ·WSSV结构蛋白糖基化分析 | 第39-40页 |
| 3 结果 | 第40-47页 |
| ·病毒粒子纯化及膜蛋白、核衣壳蛋白的分离 | 第40-42页 |
| ·WSSV结构蛋白的质谱鉴定 | 第42-45页 |
| ·部分质谱鉴定的结构蛋白的Western blot分析 | 第45-46页 |
| ·病毒结构蛋白的生化分析 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-51页 |
| 第二部分 对虾白斑综合症病毒膜蛋白VP26的功能研究 | 第51-63页 |
| 1 前言 | 第51页 |
| 2 材料和方法 | 第51-54页 |
| ·材料 | 第51页 |
| ·方法 | 第51-54页 |
| ·重组VP26(rVP26)和Actin(rActin)的表达纯化 | 第51-52页 |
| ·rVP26与病毒核衣壳的相互作用 | 第52-53页 |
| ·异硫氰酸荧光黄荧光标记rVP26 | 第53页 |
| ·细胞结合实验 | 第53页 |
| ·VP26亲和柱制备 | 第53页 |
| ·亲和层析纯化与VP26相互作用的细胞蛋白 | 第53-54页 |
| ·免疫共沉淀 | 第54页 |
| 3 结果 | 第54-60页 |
| ·vp26基因的结构 | 第54-55页 |
| ·rVP26的诱导表达和纯化 | 第55-56页 |
| ·VP26在病毒粒子中的定位 | 第56-57页 |
| ·VP26的细胞结合活性 | 第57-58页 |
| ·rVP26亲和柱纯化特异的结合蛋白并进行质谱鉴定 | 第58-59页 |
| ·免疫共沉淀 | 第59-60页 |
| 4 讨论 | 第60-63页 |
| 第三部分 对虾白斑综合症病毒结构蛋白VP24的功能研究 | 第63-71页 |
| 1 前言 | 第63页 |
| 2 材料和方法 | 第63-65页 |
| ·材料 | 第63页 |
| ·方法 | 第63-65页 |
| ·Triton X-114处理完整病毒粒子 | 第63页 |
| ·VP24的免疫电镜定位 | 第63-64页 |
| ·抗血清的Protein A纯化 | 第64页 |
| ·体内中和实验 | 第64-65页 |
| 3 结果 | 第65-69页 |
| ·vp24基因的结构 | 第65页 |
| ·重组VP24(rVP24)的诱导表达和纯化 | 第65-66页 |
| ·VP24在病毒粒子中的定位 | 第66-68页 |
| ·VP24抗体的体内中和实验 | 第68-69页 |
| 4 讨论 | 第69-71页 |
| 第四部分 对虾白斑综合症病毒结构蛋白之间以及与螯虾细胞膜蛋白之间的相互作用 | 第71-78页 |
| 1 前言 | 第71页 |
| 2 材料和方法 | 第71-73页 |
| ·材料 | 第71-72页 |
| ·方法 | 第72-73页 |
| ·Ni-NTA柱变性条件下纯化重组蛋白及蛋白复性 | 第72页 |
| ·生物素标记目的蛋白 | 第72页 |
| ·Far-Western分析 | 第72页 |
| ·螯虾细胞膜蛋白提取 | 第72-73页 |
| 3 结果 | 第73-76页 |
| ·重组VP28(rVP28)的诱导表达和纯化 | 第73页 |
| ·VP28与VP26以及VP28与VP24之间的相互作用 | 第73-75页 |
| ·与病毒膜蛋白结合的细胞膜蛋白的分离 | 第75-76页 |
| 4 讨论 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-92页 |
| 缩略词 | 第92-93页 |
| 附录1 主要仪器设备、常规溶液配制和常规实验方法 | 第93-102页 |
| 附录2 对虾白斑综合症病毒结构蛋白质谱测定及序列比对 | 第102-113页 |
| 博士期间发表的文章 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114页 |
