| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-26页 |
| ·热激蛋白 | 第10-13页 |
| ·热激蛋白的定义 | 第10页 |
| ·热激蛋白的分类 | 第10-11页 |
| ·热激蛋白的定位 | 第11页 |
| ·热激蛋白的特征 | 第11-12页 |
| ·热激蛋白基因表达的调控 | 第12-13页 |
| ·HSP70s | 第13-24页 |
| ·HSP70s的分类 | 第14-16页 |
| ·HSP70s的分子结构 | 第16-19页 |
| ·HSP70s的功能 | 第19-24页 |
| ·本课题研究的目的及意义 | 第24-26页 |
| ·烟草概况 | 第24页 |
| ·PHSP1 基因 | 第24-25页 |
| ·本研究的思路及意义 | 第25-26页 |
| 第二章 材料与方法 | 第26-39页 |
| ·实验材料 | 第26-29页 |
| ·生物材料 | 第26页 |
| ·实验仪器 | 第26页 |
| ·主要化学试剂 | 第26-27页 |
| ·主要培养基及溶液配制 | 第27-29页 |
| ·PCR 引物设计 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-39页 |
| ·质粒pMD18-T-PHSP1 构建和鉴定 | 第29页 |
| ·质粒pET-28a-PHSP1 构建和鉴定 | 第29-32页 |
| ·pET-His-PHSP1 构建和鉴定 | 第32页 |
| ·PHSP1 在大肠杆菌中的表达及Western blotting 检测 | 第32-35页 |
| ·真核重组质粒pBI121-PHSP1 构建和鉴定 | 第35页 |
| ·pBI121-PHSP1 转化农杆菌EHA105 | 第35页 |
| ·烟草遗传转化及转基因烟草的获得 | 第35-36页 |
| ·转基因烟草PCR 检测 | 第36页 |
| ·烟草蛋白Western blotting 检测 | 第36-37页 |
| ·转基因烟草耐盐性分析 | 第37-39页 |
| 第三章 结果与分析 | 第39-54页 |
| ·原核表达载体的构建及表达 | 第39-48页 |
| ·pMD18-T-PHSP1 质粒的构建 | 第39页 |
| ·pET-28a-PHSP1 质粒的构建及鉴定 | 第39-42页 |
| ·pET-His-PHSP1 质粒的构建及鉴定 | 第42-44页 |
| ·PHSP1 在大肠杆菌中的表达及条件优化 | 第44-46页 |
| ·PHSP1 蛋白的Western blotting 分析 | 第46-48页 |
| ·植物表达载体的构建及表达 | 第48-51页 |
| ·植物表达载体pBI121-PHSP1 的构建 | 第48页 |
| ·转基因烟草植株的获得 | 第48-49页 |
| ·转基因烟草分子鉴定 | 第49-51页 |
| ·NaCl对转基因烟草的影响 | 第51-54页 |
| 第四章 讨论 | 第54-61页 |
| ·原核表达载体的构建及表达 | 第54-56页 |
| ·大肠杆菌表达系统 | 第54页 |
| ·载体磷酸化处理 | 第54-55页 |
| ·表达载体构建 | 第55页 |
| ·不同诱导条件对外源基因表达的影响 | 第55-56页 |
| ·不同菌株对PHSP1 蛋白表达的影响 | 第56页 |
| ·不同载体对PHSP1 蛋白表达的影响 | 第56页 |
| ·植物表达载体的构建及表达 | 第56-59页 |
| ·植物表达载体 | 第56页 |
| ·农杆菌介导法转化烟草 | 第56-58页 |
| ·直接分化再生系统 | 第58页 |
| ·烟草高效遗传转化体系 | 第58页 |
| ·转基因沉默 | 第58-59页 |
| ·PHSP1 与烟草的抗盐性 | 第59-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 缩略词对照表 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
