| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-9页 |
| 1 前言 | 第9-21页 |
| ·香蕉枯萎病研究概况 | 第9-16页 |
| ·香蕉概况 | 第9-10页 |
| ·病原菌的生物学特征 | 第10-12页 |
| ·病原菌特征 | 第10-11页 |
| ·病原菌的侵染和发病 | 第11页 |
| ·病害症状 | 第11-12页 |
| ·生理小种 | 第12页 |
| ·香蕉枯萎病营养亲和群 | 第12-13页 |
| ·香蕉枯萎病菌 DNA 多态性 | 第13-14页 |
| ·尖孢镰菌遗传多态性分析技术 | 第13页 |
| ·DNA 多态性与病菌 VCG 的关系 | 第13-14页 |
| ·香蕉枯萎病害防治 | 第14-15页 |
| ·抗病育种 | 第14页 |
| ·生物防治 | 第14-15页 |
| ·药剂防治 | 第15页 |
| ·病原菌的检测技术 | 第15-16页 |
| ·致病性测定 | 第15页 |
| ·PCR 检测 | 第15-16页 |
| ·病原菌侵染机制 | 第16-17页 |
| ·植物病原菌致病相关基因研究进展 | 第17-19页 |
| ·植物病原菌基因克隆常用的方法 | 第17-18页 |
| ·差异杂交克隆法 | 第17页 |
| ·功能互补克隆法 | 第17页 |
| ·根据蛋白质克隆基因法 | 第17页 |
| ·染色体步查克隆法（chromosome walking） | 第17-18页 |
| ·转座子标签法 | 第18页 |
| ·枯萎病菌致病相关基因的克隆 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-40页 |
| ·试验材料 | 第21-23页 |
| ·病原菌 | 第21页 |
| ·主要培养基 | 第21页 |
| ·主要试剂、酶和缓冲液 | 第21-22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22页 |
| ·引物合成与 DNA 测序 | 第22页 |
| ·聚丙烯酰胺储液 | 第22页 |
| ·1.0 M Tris-Cl (pH 6.8) | 第22页 |
| ·1.5 M Tris-Cl (pH 8.8) | 第22-23页 |
| ·2×凝胶加样缓冲液的配制 | 第23页 |
| ·5×Tris–甘氨酸电泳缓冲液的配制 | 第23页 |
| ·考马斯亮蓝 R-250 染色液 | 第23页 |
| ·考马斯亮蓝脱色液 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-40页 |
| ·香蕉枯萎病病原菌 DNA 的提取 | 第23-24页 |
| ·香蕉枯萎病病原菌总 RNA 的提取 | 第24-25页 |
| ·FPD1 基因的克隆 | 第25-31页 |
| ·引物设计与合成 | 第25页 |
| ·cDNA 的合成 | 第25-26页 |
| ·基因组 DNA 的 PCR 扩增 | 第26页 |
| ·cDNA 的 RT-PCR 扩增 | 第26-27页 |
| ·PCR 产物的回收 | 第27页 |
| ·宿主菌 E.coli XL1 感受态的制备 | 第27-28页 |
| ·回收产物的连接与转化 | 第28-31页 |
| ·连接 | 第28-29页 |
| ·转化 | 第29页 |
| ·质粒 DNA 的提取及重组质粒的酶切鉴定 | 第29-31页 |
| ·碱裂解法少量提取质粒 | 第29-30页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第30-31页 |
| ·DNA 序列测定和分析 | 第31页 |
| ·FPD1 片段的原核表达 | 第31-36页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第31-33页 |
| ·表达载体线性化 | 第31-32页 |
| ·FPD1 片段 PCR 扩增 | 第32页 |
| ·FPD1 片断的制备 | 第32-33页 |
| ·FPD1 片段与线性化载体pET32a 的连接 | 第33页 |
| ·连接产物的转化 | 第33页 |
| ·感受态 E.coli XL1 的制备 | 第33页 |
| ·转化 | 第33页 |
| ·重组子的筛选与鉴定 | 第33-34页 |
| ·碱裂解法少量提取质粒 | 第33页 |
| ·重组子酶切鉴定 | 第33-34页 |
| ·pET-32a-FPD1 转化宿主菌 BL21(DE3) | 第34-36页 |
| ·质粒鉴定 | 第34页 |
| ·诱导表达与检测 | 第34-36页 |
| ·表达产物的制备 | 第34-35页 |
| ·表达产物的 SDS-PAGE 电泳 | 第35页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶的制备 | 第35页 |
| ·上样与电泳 | 第35-36页 |
| ·染色与脱色 | 第36页 |
| ·抗血清的制备与效价测定 | 第36-38页 |
| ·抗原的制备 | 第36页 |
| ·免疫程序 | 第36-37页 |
| ·血液处理及保存 | 第37页 |
| ·抗血清效价测定 | 第37-38页 |
| ·放线菌的分离鉴定 | 第38-40页 |
| ·土壤采集 | 第38页 |
| ·放线菌的分离 | 第38页 |
| ·抗菌活性测定 | 第38页 |
| ·形态观察 | 第38-39页 |
| ·16S rDNA 的 PCR 扩增和序列分析 | 第39页 |
| ·系统发育分析 | 第39-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-55页 |
| ·香蕉枯萎病病原菌的总 DNA 的提取 | 第40页 |
| ·香蕉枯萎病病原菌 RNA 的提取 | 第40-41页 |
| ·FPD1 基因的基因组 DNA 和cDNA 的 PCR 扩增 | 第41页 |
| ·pMD18-T-FPD1F1 和pMD18-T-FPD1F4 鉴定 | 第41-42页 |
| ·序列分析比对 | 第42-49页 |
| ·生理小种1 号 FPD1 基因序列分析 | 第42-44页 |
| ·生理小种4 号 FPD1 基因序列分析 | 第44-46页 |
| ·同源性分析 | 第46-49页 |
| ·FPD1 片段 PCR 扩增 | 第49页 |
| ·表达载体的构建 | 第49-50页 |
| ·工程菌株 BL21（DE3）/pET-32a-FPD1 的鉴定 | 第50-51页 |
| ·目的片段的诱导表达 | 第51-52页 |
| ·抗血清制备及效价测定 | 第52-53页 |
| ·抗血清制备 | 第52页 |
| ·抗血清效价测定 | 第52-53页 |
| ·放线菌 JFA-001 抗菌活性 | 第53页 |
| ·放线菌 JFA-001 菌株形态特征 | 第53-54页 |
| ·16S rDNA 的序列分析 | 第54-55页 |
| 4 讨论 | 第55-58页 |
| ·FPD1 基因克隆 | 第55页 |
| ·FPD1 片段的表达 | 第55-56页 |
| ·制备多克隆抗体 | 第56页 |
| ·生防放线菌筛选 | 第56-58页 |
| 5 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
