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马鹿精子膜蛋白纯化与理化性质分析

摘要第1-5页
Abstract第5-17页
1 绪论第17-44页
   ·精子膜蛋白的研究概况第17-31页
     ·精子膜蛋白的研究进展及发展趋势第18-30页
     ·精子膜蛋白的变化第30-31页
   ·当前精子膜蛋白的研究策略与范围第31-32页
   ·精子膜蛋白的技术进步第32-41页
     ·样品制备技术第32-37页
     ·双向电泳技术第37-38页
     ·毛细管电泳技术第38-39页
     ·电泳技术第39-40页
     ·质谱鉴定技术第40-41页
   ·生物信息技术第41-42页
     ·辅助质谱进行蛋白质鉴定第41-42页
     ·蛋白质功能的预测第42页
     ·蛋白质物理化学性质的预测第42页
   ·马鹿精子膜蛋白的研究概况第42-44页
2 马鹿精子膜蛋白的提取第44-60页
   ·引言第44页
   ·马鹿精子膜蛋白的提取第44-47页
     ·实验材料第44页
     ·仪器第44页
     ·试剂第44-46页
     ·马鹿精子膜蛋白的提取第46-47页
   ·SDS-PAGE 电泳第47-50页
     ·试剂第47-48页
     ·实验器材第48页
     ·试剂配制第48-50页
     ·SDS-PAGE 电泳第50页
   ·马鹿精子膜蛋白的纯化第50-51页
     ·试剂第50-51页
     ·实验器材第51页
     ·试剂配制第51页
     ·马鹿精子膜蛋白的纯化第51页
   ·实验结果第51-54页
     ·马鹿精子膜蛋白的提取第51-53页
     ·马鹿精子膜蛋白的 SDS-PAGE 电泳第53-54页
   ·马鹿精子膜蛋白的纯化第54-57页
     ·精子膜蛋白的胶上纯化第54-55页
     ·纯化的马鹿精子膜蛋白第55-57页
   ·讨论第57-59页
     ·马鹿精子膜蛋白的提取第57-58页
     ·马鹿精子膜蛋白的分离纯化第58-59页
   ·本章小结第59-60页
3 马鹿精子膜蛋白的理化性质研究第60-67页
   ·引言第60页
   ·马鹿精子膜蛋白分子量的测定第60-61页
     ·实验仪器第60页
     ·试剂第60页
     ·试剂配制第60页
     ·分子量的测定第60-61页
   ·马鹿精子膜蛋白含量的测定第61页
     ·试剂第61页
     ·实验仪器第61页
     ·试剂配制第61页
     ·含量测定第61页
   ·糖蛋白的测定第61-62页
     ·试剂第61-62页
     ·实验仪器第62页
     ·试剂配制第62页
     ·糖蛋白测定第62页
   ·实验结果第62-65页
     ·精子膜蛋白的分子量测定结果第62-64页
     ·马鹿精子膜蛋白含量的测定结果第64页
     ·糖蛋白的测定第64-65页
   ·讨论第65-66页
     ·精子膜蛋白含量的测定方法第65-66页
     ·精子膜蛋白的糖蛋白检测第66页
   ·本章小结第66-67页
4 马鹿精子膜蛋白的双向电泳研究第67-80页
   ·引言第67页
   ·精子膜蛋白的双向电泳第67-73页
     ·试剂第67-68页
     ·实验仪器第68页
     ·试剂配制第68-69页
     ·双向电泳实验第69-73页
   ·实验结果第73-77页
     ·非离子型去污剂裂解法提取的精子膜蛋白双向电泳结果第73-74页
     ·Bradford 法检测精子膜蛋白含量的结果第74-76页
     ·马鹿精子膜蛋白的双向电泳第76-77页
   ·讨论第77-79页
     ·马鹿精子膜蛋白的双向电泳第77-78页
     ·影响双向电泳图谱效果的因素第78-79页
   ·本章小结第79-80页
5 马鹿精子膜蛋白的多克隆抗血清的制备与检验第80-89页
   ·引言第80页
   ·马鹿精子膜蛋白多克隆抗血清的制备第80-82页
     ·实验材料第80页
     ·实验仪器第80页
     ·试剂第80-81页
     ·试剂配制第81页
     ·抗体制备第81-82页
   ·多克隆抗体的效价检测—间接酶联免疫检测(ELISA)第82页
   ·双向琼脂免疫扩散第82-84页
     ·试剂第82-83页
     ·实验器材第83页
     ·试剂配制第83页
     ·琼脂双向免疫扩散第83-84页
   ·实验结果第84-87页
     ·ELISA 实验结果第84页
     ·多克隆抗血清的琼脂双向免疫扩散活性检测和效价检验第84-85页
     ·多克隆抗血清特异性检验第85-87页
   ·讨论第87-88页
     ·马鹿精子膜蛋白的多克隆抗体第87页
     ·马鹿精子膜蛋多克隆抗血清的特异性第87-88页
   ·本章小结第88-89页
6 马鹿精子膜蛋白的免疫定位研究第89-99页
   ·引言第89页
   ·马鹿精子膜蛋白的免疫定位第89-91页
     ·实验材料第89页
     ·实验器材第89页
     ·试剂第89页
     ·试剂配制第89-90页
     ·精子膜蛋白的定位检测第90-91页
   ·免疫印迹检测第91-93页
     ·Western Blot 蛋白印迹杂交实验所需要的试剂第91页
     ·实验器材第91页
     ·试剂配制第91-92页
     ·Western-blot第92-93页
   ·实验结果第93-96页
     ·马鹿精子膜蛋白免疫定位第93-95页
     ·马鹿精子膜蛋白的免疫印迹检测结果第95-96页
   ·讨论第96-98页
     ·马鹿精子膜蛋白的定位检测分析第96-97页
     ·关于马鹿精子膜蛋白的免疫印迹检测第97-98页
   ·本章小结第98-99页
7 多克隆抗血清对精子功能影响的研究第99-106页
   ·引言第99页
   ·多克隆抗血清对精子运动的影响第99-100页
     ·实验材料第99页
     ·实验器材第99页
     ·试剂第99-100页
     ·试剂配制第100页
     ·多克隆抗血清对精子运动的影响第100页
   ·多克隆抗体对获能精子运动的影响第100-102页
     ·实验材料第100页
     ·试剂第100页
     ·实验器材第100页
     ·试剂配制第100-101页
     ·多克隆抗体对获能精子运动的影响第101-102页
   ·实验结果第102-104页
     ·马鹿精子膜蛋白对未获能精子运动的影响第102-103页
     ·马鹿精子膜蛋白抗血清对获能精子的影响第103-104页
   ·讨论第104-105页
   ·本章小结第105-106页
结论第106-107页
参考文献第107-117页
附录第117-118页
攻读学位期间发表的论文第118-119页
致谢第119-120页

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