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谷胱甘肽过氧化物酶的人工模拟及其抗肿瘤活性研究

提要第1-6页
英文缩写词表第6-13页
第一章 本论文立论依据第13-20页
 1. 硒代谷胱甘肽硫转移酶模拟 GPX第15页
 2. 2-硒桥-β-环糊精抗肿瘤效应及机制研究第15-16页
 3. 硒化蛋白多糖制备及抗肿瘤活性研究第16页
 参考文献第16-20页
第二章 含硒谷胱甘肽硫转移酶模拟 GPX第20-41页
 第一节 绪论第20-22页
 第二节 含硒谷胱甘肽硫转移酶Zeta 1-1 模拟GPX第22-41页
  一、实验材料第22-24页
  二、实验方法第24-28页
   ·GST zeta 1-1 和GST zeta mutant 表达第24-25页
   ·蛋白纯化第25页
   ·蛋白含量测定第25-26页
   ·NaSeH 的制备第26页
   ·硒化谷胱甘肽硫转移酶的制备第26页
   ·硒含量的测定第26-27页
   ·酶活力的测定第27页
   ·稳态动力学研究第27-28页
   ·统计学分析第28页
  三、结果第28-33页
   ·酶的纯度及收率第28-29页
   ·含硒蛋白酶的制备和表征第29-30页
   ·含硒蛋白酶的活力测定第30-31页
   ·含硒蛋白酶的动力学分析第31-33页
  四、讨论第33-35页
  五、结论第35页
  六、参考文献第35-41页
第三章 2-硒桥联-β-环糊精抗肿瘤效应及机制研究第41-71页
 第一节 绪论第41-42页
 第二节 2-硒桥联-β-环糊精抗肿瘤活性研究第42-71页
  一、实验材料第42-45页
  二、实验方法第45-49页
   ·细胞培养和生长抑制实验第45-46页
   ·2-SeCD 的细胞毒性实验第46页
   ·细胞形态学检测第46页
   ·DNA提取及DNA片断检测第46页
   ·caspase 活性分析第46-47页
   ·细胞内GSH 含量测定第47页
   ·细胞内蛋白巯醇含量测定第47-48页
   ·脱氢抗坏血酸还原酶活力分析第48页
   ·巯醇转移酶活力分析第48页
   ·统计学分析第48-49页
  三、结果第49-62页
   ·2-SeCD 引起的HeLa 细胞生长抑制第49-51页
   ·2-SeCD 诱导HeLa 细胞凋亡实验第51-54页
   ·caspase-3 的活力测定第54-56页
   ·细胞内GSH 含量测定第56-58页
   ·细胞内蛋白硫醇测定第58-59页
   ·鉴定2-SeCD 潜在的脱氢抗坏血酸还原酶活性第59-61页
   ·鉴定2-SeCD 潜在的巯醇转移酶活性第61-62页
  四、讨论第62-66页
  五、结论第66页
  六、参考文献第66-71页
第四章 硒化蛋白多糖制备及抗肿瘤活性研究第71-93页
 第一节 绪论第71-72页
 第二节 蛋白多糖硒化及性质研究第72-93页
  一、实验材料第72-76页
  二、实验方法第76-81页
   ·蛋白多糖硒化第76-77页
     ·NaSeH 的制备第76页
     ·蛋白多糖硒化第76-77页
     ·硒含量测定第77页
     ·GPX 活性测定第77页
   ·GTP 蛋白多糖及硒化GTP 抗肿瘤活性的研究第77-81页
     ·GTP 蛋白多糖整体抗肿瘤实验方法第77-78页
     ·NK 细胞活性的测定第78页
     ·小鼠脾淋巴细胞增殖的实验第78页
     ·IL-2 活性测定实验第78-79页
     ·体外诱导肿瘤坏死因子TNFα的产生实验第79-80页
       ·用鲎试剂方法定量样品本身内毒素含量第79页
       ·用GTP 处理THP-1 细胞第79页
       ·TNFα的含量测定第79-80页
       ·体外诱导肿瘤细胞死亡实验第80页
     ·RT-PCR 实验第80-81页
       ·GTP 处理后的THP-1 细胞的总RNA 的提取第80页
       ·互补链cDNA 的合成第80页
       ·PCR 反应第80-81页
       ·水平板电泳第81页
     ·统计学处理第81页
  三、实验结果第81-88页
   ·硒化蛋白多糖Se-GTP 的硒含量第81页
   ·硒化蛋白多糖Se-GTP 的GPX活力测定第81-82页
   ·GTP 蛋白多糖抗肿瘤活性的研究第82-85页
     ·GTP 蛋白多糖整体抗肿瘤实验第82页
     ·GTP对NK细胞活性的增强作用第82-83页
     ·GTP 对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响第83页
     ·GTP 对IL-2 产生的增强作用第83-84页
     ·GTP 诱导TNFα的产生及TNFαmRNA 的表达第84-85页
       ·鲎试剂定量样品内毒素含量第84页
       ·GTP对人组织巨噬细胞瘤THP-1细胞产生TNFα的影响第84-85页
       ·GTP 诱导肿瘤坏死因子TNFαmRNA 的表达第85页
   ·Se-GTP 抗肿瘤活性的研究第85-88页
     ·Se-GTP 体外诱导肿瘤细胞死亡实验第85-87页
     ·Se-GTP 诱导肿瘤细胞死亡机制研究第87页
     ·Se-GTP 免疫活性的研究第87-88页
       ·Se-GTP 对NK 细胞活性的增强作用第87-88页
       ·Se-GTP 对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响第88页
  四、讨论第88-90页
  五、结论第90页
  六、参考文献第90-93页
第五章 文献综述第93-167页
 第一节 硒的生物学功能第93-102页
 第二节 谷胱甘肽过氧化物酶的人工模拟第102-121页
 第三节 硒多糖的生物功能研究及应用第121-128页
 第四节 含硒生物大分子的抗肿瘤作用第128-167页
中文摘要第167-171页
英文摘要第171-175页

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