| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-26页 |
| ·绿色荧光蛋白(GFP)的研究概况 | 第11-15页 |
| ·GFP基础理论研究进展 | 第11-14页 |
| ·GFP在转基因动物研究中的应用 | 第14-15页 |
| ·转基因动物 | 第15-19页 |
| ·转基因动物生产程序和制作方法 | 第16-18页 |
| ·转基因动物的检测方法 | 第18-19页 |
| ·转基因动物的发展前景 | 第19页 |
| ·体细胞核移植技术(克隆)在转基因动物生产中的应用 | 第19-25页 |
| ·供体体细胞的准备 | 第20-21页 |
| ·体细胞的转染 | 第21-22页 |
| ·卵母细胞的培养 | 第22页 |
| ·重构胚的构建和激活 | 第22-24页 |
| ·转基因克隆猪的研究进展 | 第24-25页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-37页 |
| ·实验材料 | 第26-28页 |
| ·质粒、菌株和猪胎儿 | 第26页 |
| ·工具酶、试剂盒及其它试剂 | 第26页 |
| ·主要器材 | 第26-27页 |
| ·缓冲液及主要试剂的配制 | 第27-28页 |
| ·DNA分析软件 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-37页 |
| ·pEGFP-C1质粒DNA的制备 | 第28-31页 |
| ·猪胎儿成纤维细胞(PFF)的分离培养 | 第31-33页 |
| ·脂质体法转染猪胎儿成纤维细胞(PFF)方法的建立 | 第33-34页 |
| ·猪卵母细胞体外成熟 | 第34-35页 |
| ·体细胞核移植与转基因克隆猪的出生 | 第35-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-50页 |
| ·pEGFP-C1质粒DNA的制备 | 第37-38页 |
| ·质粒转化结果 | 第37页 |
| ·质粒的酶切鉴定结果 | 第37-38页 |
| ·DNA浓度和质量的检测结果 | 第38页 |
| ·脂质体法转染猪胎儿成纤维细胞(PFF)方法的建立 | 第38-45页 |
| ·PFF细胞对G418毒性敏感性检测结果 | 第38-40页 |
| ·转染条件的优化 | 第40-45页 |
| ·GFP阳性PFF核移植与转基因克隆猪的出生 | 第45-50页 |
| 4 讨论 | 第50-54页 |
| ·关于转染方法 | 第50页 |
| ·关于转染效率 | 第50-51页 |
| ·关于供体细胞的选择 | 第51页 |
| ·关于G418筛选 | 第51-52页 |
| ·关于早期胚胎GFP的表达 | 第52页 |
| ·转基因克隆猪的GFP表达情况 | 第52-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第61页 |
