牛传染性鼻气管炎病毒抗体间接ELISA的建立及其在流行病学研究中的应用
| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-27页 |
| ·IBR的发展史 | 第13页 |
| ·IBR的流行病学 | 第13-15页 |
| ·IBRV的特性 | 第15页 |
| ·IBR的分子生物学特征 | 第15-17页 |
| ·IBR的临床症状 | 第17-19页 |
| ·呼吸道型 | 第18页 |
| ·生殖器型 | 第18页 |
| ·脑膜炎型 | 第18-19页 |
| ·结膜炎型 | 第19页 |
| ·流产型 | 第19页 |
| ·肠炎型 | 第19页 |
| ·诊断 | 第19-22页 |
| ·病毒中和实验 | 第19-20页 |
| ·ELISA | 第20页 |
| ·琼脂扩散试验 | 第20页 |
| ·间接血凝试验 | 第20-21页 |
| ·病毒分离 | 第21页 |
| ·PCR法 | 第21-22页 |
| ·核酸探针检测 | 第22页 |
| ·免疫荧光试验 | 第22页 |
| ·变态反应 | 第22页 |
| ·鉴别诊断 | 第22页 |
| ·预防和控制 | 第22-27页 |
| ·常规疫苗 | 第23-24页 |
| ·DNA疫苗 | 第24页 |
| ·亚单位疫苗 | 第24页 |
| ·基因工程缺失苗 | 第24-25页 |
| ·病毒活载体重组疫苗 | 第25-27页 |
| 2 研究目的与意义 | 第27-28页 |
| 3 材料与方法 | 第28-39页 |
| ·试验材料 | 第28-32页 |
| ·病毒与菌种 | 第28页 |
| ·质粒及相关试剂 | 第28页 |
| ·参考血清和酶标抗体 | 第28页 |
| ·血清样本 | 第28-29页 |
| ·主要试剂及溶液的配制 | 第29-32页 |
| ·试验方法 | 第32-39页 |
| ·病毒增殖与纯化 | 第32页 |
| ·模板制备 | 第32页 |
| ·引物设计与合成 | 第32-33页 |
| ·gG基因的PCR扩增 | 第33页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第33-34页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第34页 |
| ·表达载体的构建 | 第34页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第34页 |
| ·细菌的转化 | 第34-35页 |
| ·重组质粒小量制备(碱裂解法) | 第35页 |
| ·重组质粒大量制备(碱裂解法) | 第35-36页 |
| ·原核表达 | 第36页 |
| ·表达蛋白的鉴定 | 第36-37页 |
| ·ELISA诊断方法的建立 | 第37-39页 |
| 4 结果与分析 | 第39-49页 |
| ·病毒纯化结果 | 第39页 |
| ·PCR扩增和克隆结果 | 第39-41页 |
| ·gG在大肠杆菌中的表达与检测 | 第41-42页 |
| ·gG-ELISA诊断方法的建立 | 第42-45页 |
| ·ELISA最适条件及阴阳界限的确定 | 第42-43页 |
| ·pGEX-KG空载体表达蛋白工作浓度的确定 | 第43页 |
| ·重复性试验 | 第43-44页 |
| ·特异性试验 | 第44页 |
| ·符合率试验 | 第44-45页 |
| ·血清流行病学调查结果 | 第45-49页 |
| ·IBR在全国的流行情况 | 第45-48页 |
| ·IBR在湖北省的流行情况 | 第48-49页 |
| 5 讨论 | 第49-54页 |
| 6 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 附录 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
