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苏云金芽孢杆菌cry1Ac与蛛毒蛋白酶抑制剂基因hwtx-11融合表达及其功能研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-14页
引言第14-40页
 1. 苏云金芽孢杆菌概述第14-15页
 2. 苏云金芽孢杆菌毒素第15-16页
 3. 苏云金芽孢杆菌ICPs基因第16-23页
   ·ICPs基因的存在模式第16-17页
   ·ICPs基因的命名与分类第17-18页
   ·cry基因的表达调控机制第18-23页
 4. 苏云金芽孢杆菌杀虫伴孢晶体蛋白的作用机理第23-27页
   ·伴孢晶体蛋白的结构第24页
   ·伴孢晶体蛋白的作用机理和模型第24-27页
 5. 苏云金芽孢杆菌的研究应用现状第27-36页
   ·昆虫抗性机理研究和抗性管理第27-30页
   ·定点突变研究第30页
   ·利用转座子构建重组质粒和重组菌株研究第30-32页
   ·转cry基因植物的研究第32页
   ·融合基因的研究第32-35页
   ·Bt工程菌的研究第35-36页
 6. 蛛毒蛋白酶抑制剂基因hwtx-11的概述第36-38页
 7. 立题依据和意义第38-40页
材料与方法第40-56页
 1. 材料第40-46页
   ·菌株与质粒第40页
   ·培养基和抗生素第40-41页
   ·试剂和引物第41-45页
   ·仪器设备第45-46页
 2. 方法第46-56页
   ·融合基因的构建第46-48页
   ·融合基因在Cry~-B中的表达第48-52页
   ·hwtx-11在BL21(DE3)中的克隆表达第52-53页
   ·生测第53-56页
结果与分析第56-70页
 1. cry1Ac-hwtx-11融合基因的构建第56-59页
   ·优化设计hwtx-11序列第56页
   ·中间重组质粒pUA11的构建第56-58页
   ·cry1Ac-hwtx-11融合基因的构建路线第58-59页
 2. cry1Ac-hwtx-11触合基因在Cry~-B中的表达第59-65页
   ·融合基因表达载体的构建第59-62页
   ·表达载体pHA11、pHA11T电转化Cry~-B和鉴定第62-63页
   ·融合蛋白的SDS-PAGE及Western blot分析第63-65页
   ·重组菌株的生测分析第65页
 3. hwtx-11在BL21(DE3)中的克隆表达第65-70页
   ·hwtx-11在大肠杆菌中的克隆第65-66页
   ·BL21(pGEX4T-1/hwtx-11)重组菌株的诱导表达及检测第66-67页
   ·HWTX-11蛋白生物活性测定第67-70页
讨论第70-76页
 1. cry1Ac-hwtx-11融合基因的构建和表达策略第70-71页
 2. Cry1Ac C-端的缺失对融合表达的影响第71-72页
 3. HWTX-11与cry1Ac的协同作用第72-74页
 4. Bt工程菌株的杀虫机理及安全性探讨第74-76页
结语第76-78页
 1.Bt工程菌的研究第76页
 2.今后的工作设想第76-78页
参考文献第78-98页
附录第98-100页
致谢第100-102页

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