中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-13页 |
1 引言 | 第13-28页 |
·植物转基因 | 第13-16页 |
·植物基因工程研究 | 第13-14页 |
·植物转基因技术 | 第14-16页 |
·目的基因 | 第14页 |
·遗传转化方法 | 第14-15页 |
·影响根癌农杆菌介导的遗传转化的主要因素 | 第15-16页 |
·基因转化体的筛选 | 第16页 |
·基因转化体的鉴定 | 第16页 |
·桑树基因工程的研究进展 | 第16-22页 |
·应用于桑树基因工程研究的目的基因 | 第18-20页 |
·大豆球蛋白基因 | 第18页 |
·Β-葡萄糖苷酸酶(GUS)基因 | 第18-19页 |
·抗菌肽基因 | 第19页 |
·几丁质酶基因 | 第19页 |
·水稻半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因 | 第19-20页 |
·应用于桑树的遗传转化方法 | 第20-21页 |
·叶盘转化法 | 第20页 |
·基因枪法 | 第20-21页 |
·整株转化法 | 第21页 |
·桑树基因工程的发展方向及问题 | 第21-22页 |
·分离具有优良性状的外源基因并提高其遗传稳定性 | 第21页 |
·建立高频再生基因转化受体系统 | 第21页 |
·桑树转基因工程与常规育种、资源多样性保护及病虫抗药性的关系 | 第21-22页 |
·景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶(SBPase)的研究进展 | 第22-27页 |
·SBPase 的研究进展 | 第22-25页 |
·SBPase 的生物化学研究 | 第22-23页 |
·SBPase 的分子生物学研究 | 第23-24页 |
·SBPase 的结构研究 | 第24页 |
·SBPase 基因的表达调控研究 | 第24-25页 |
·SBPase 基因工程研究 | 第25-26页 |
·SBPase 活性对植株营养生长的影响 | 第25-26页 |
·MSBPase 基因的基因工程研究进展 | 第26-27页 |
·本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
2 材料与方法 | 第28-37页 |
·材料 | 第28-29页 |
·供试材料 | 第28页 |
·植物激素 | 第28页 |
·质粒与菌株 | 第28-29页 |
·主要试剂 | 第29页 |
·叶盘转化培养基 | 第29页 |
·抗性筛选培养基 | 第29页 |
·培养基与培养条件 | 第29页 |
·方法 | 第29-37页 |
·桑树无菌体系的建立 | 第29-31页 |
·试验材料处理 | 第29页 |
·最佳启动培养筛选 | 第29-30页 |
·分化培养筛选 | 第30-31页 |
·桑叶再生体系的建立 | 第31-32页 |
·叶片愈伤组织诱导 | 第31页 |
·叶片不定芽的诱导 | 第31-32页 |
·诱导培养中叶片褐化的抑制 | 第32页 |
·生根诱导 | 第32页 |
·桑树遗传转化 | 第32-37页 |
·抗生素对桑叶片培养的影响 | 第32页 |
·大肠杆菌质粒DNA 的扩增 | 第32页 |
·质粒DNA(P81121)的提取 | 第32-33页 |
·感受态细胞的制备 | 第33页 |
·冻融法转化农杆菌 | 第33页 |
·质粒DNA 的提取 | 第33页 |
·阳性克隆质粒DNA 的酶切鉴定 | 第33-34页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第34页 |
·浸染菌液的制备 | 第34页 |
·叶盘转化法 | 第34页 |
·影响转化效果因子的研究 | 第34页 |
·抗性桑芽总DNA 的提取(CTAB 法) | 第34-35页 |
·PCR 检测 | 第35-36页 |
·统计方法 | 第36-37页 |
3 结果与分析 | 第37-52页 |
·桑树无菌体系的建立 | 第37-43页 |
·不同桑芽类型在启动培养基中的生长状况 | 第37-39页 |
·不同桑芽类型的启动生长速度 | 第37-38页 |
·不同类型桑芽启动培养30 天的生长高度 | 第38-39页 |
·不同激素配比对桑芽继代生长的影响 | 第39-43页 |
·不同激素配比对桑芽继代生长高度的影响 | 第39-41页 |
·不同激素配比对桑芽增殖的影响 | 第41-43页 |
·桑树叶片再生体系的建立 | 第43-47页 |
·影响桑树叶片愈伤组织诱导的因素 | 第43-44页 |
·培养基中6-BA 浓度对不定芽分化的影响 | 第44-45页 |
·桑树叶片褐化抑制剂的筛选 | 第45-46页 |
·生根诱导 | 第46-47页 |
·桑树遗传转化 | 第47-52页 |
·农杆菌阳性转化子的鉴定 | 第47页 |
·抗生素对桑叶盘培养的影响 | 第47-48页 |
·供试农杆菌生长曲线及菌液稀释曲线分析 | 第48页 |
·菌液侵染浓度对转化率的影响 | 第48-49页 |
·菌液侵染时间对转化率的影响 | 第49页 |
·Cef 抑菌浓度的确定 | 第49-50页 |
·共培养时间对转化率的影响 | 第50页 |
·桑树遗传转化体系的获得 | 第50页 |
·桑树转MSBPase 基因Kan 抗性芽的获得 | 第50-51页 |
·转基因抗性桑芽的PCR 检测 | 第51-52页 |
4 讨论 | 第52-55页 |
5 结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
附录 | 第62-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第67-68页 |
硕士学位论文内容简介及自评 | 第68页 |