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桑树转景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶基因(MSBPase)的研究

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-13页
1 引言第13-28页
   ·植物转基因第13-16页
     ·植物基因工程研究第13-14页
     ·植物转基因技术第14-16页
       ·目的基因第14页
       ·遗传转化方法第14-15页
       ·影响根癌农杆菌介导的遗传转化的主要因素第15-16页
       ·基因转化体的筛选第16页
       ·基因转化体的鉴定第16页
   ·桑树基因工程的研究进展第16-22页
     ·应用于桑树基因工程研究的目的基因第18-20页
       ·大豆球蛋白基因第18页
       ·Β-葡萄糖苷酸酶(GUS)基因第18-19页
       ·抗菌肽基因第19页
       ·几丁质酶基因第19页
       ·水稻半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因第19-20页
     ·应用于桑树的遗传转化方法第20-21页
       ·叶盘转化法第20页
       ·基因枪法第20-21页
       ·整株转化法第21页
     ·桑树基因工程的发展方向及问题第21-22页
       ·分离具有优良性状的外源基因并提高其遗传稳定性第21页
       ·建立高频再生基因转化受体系统第21页
       ·桑树转基因工程与常规育种、资源多样性保护及病虫抗药性的关系第21-22页
   ·景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶(SBPase)的研究进展第22-27页
     ·SBPase 的研究进展第22-25页
       ·SBPase 的生物化学研究第22-23页
       ·SBPase 的分子生物学研究第23-24页
       ·SBPase 的结构研究第24页
       ·SBPase 基因的表达调控研究第24-25页
     ·SBPase 基因工程研究第25-26页
       ·SBPase 活性对植株营养生长的影响第25-26页
     ·MSBPase 基因的基因工程研究进展第26-27页
   ·本研究的目的和意义第27-28页
2 材料与方法第28-37页
   ·材料第28-29页
     ·供试材料第28页
     ·植物激素第28页
     ·质粒与菌株第28-29页
     ·主要试剂第29页
     ·叶盘转化培养基第29页
     ·抗性筛选培养基第29页
     ·培养基与培养条件第29页
   ·方法第29-37页
     ·桑树无菌体系的建立第29-31页
       ·试验材料处理第29页
       ·最佳启动培养筛选第29-30页
       ·分化培养筛选第30-31页
     ·桑叶再生体系的建立第31-32页
       ·叶片愈伤组织诱导第31页
       ·叶片不定芽的诱导第31-32页
       ·诱导培养中叶片褐化的抑制第32页
       ·生根诱导第32页
     ·桑树遗传转化第32-37页
       ·抗生素对桑叶片培养的影响第32页
       ·大肠杆菌质粒DNA 的扩增第32页
       ·质粒DNA(P81121)的提取第32-33页
       ·感受态细胞的制备第33页
       ·冻融法转化农杆菌第33页
       ·质粒DNA 的提取第33页
       ·阳性克隆质粒DNA 的酶切鉴定第33-34页
       ·琼脂糖凝胶电泳第34页
       ·浸染菌液的制备第34页
       ·叶盘转化法第34页
       ·影响转化效果因子的研究第34页
       ·抗性桑芽总DNA 的提取(CTAB 法)第34-35页
       ·PCR 检测第35-36页
       ·统计方法第36-37页
3 结果与分析第37-52页
   ·桑树无菌体系的建立第37-43页
     ·不同桑芽类型在启动培养基中的生长状况第37-39页
       ·不同桑芽类型的启动生长速度第37-38页
       ·不同类型桑芽启动培养30 天的生长高度第38-39页
     ·不同激素配比对桑芽继代生长的影响第39-43页
       ·不同激素配比对桑芽继代生长高度的影响第39-41页
       ·不同激素配比对桑芽增殖的影响第41-43页
   ·桑树叶片再生体系的建立第43-47页
     ·影响桑树叶片愈伤组织诱导的因素第43-44页
     ·培养基中6-BA 浓度对不定芽分化的影响第44-45页
     ·桑树叶片褐化抑制剂的筛选第45-46页
     ·生根诱导第46-47页
   ·桑树遗传转化第47-52页
     ·农杆菌阳性转化子的鉴定第47页
     ·抗生素对桑叶盘培养的影响第47-48页
     ·供试农杆菌生长曲线及菌液稀释曲线分析第48页
     ·菌液侵染浓度对转化率的影响第48-49页
     ·菌液侵染时间对转化率的影响第49页
     ·Cef 抑菌浓度的确定第49-50页
     ·共培养时间对转化率的影响第50页
     ·桑树遗传转化体系的获得第50页
     ·桑树转MSBPase 基因Kan 抗性芽的获得第50-51页
     ·转基因抗性桑芽的PCR 检测第51-52页
4 讨论第52-55页
5 结论第55-56页
参考文献第56-62页
附录第62-66页
致谢第66-67页
攻读学位期间发表论文情况第67-68页
硕士学位论文内容简介及自评第68页

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