| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 前言 | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-19页 |
| ·药物基因组学概述 | 第11页 |
| ·几种常用的检测KRAS突变方法的比较 | 第11-14页 |
| ·KRAS、BRAF基因突变的检测与个体化用药 | 第14-17页 |
| ·EGFR单抗类药物及其在结直肠癌治疗中的应用 | 第15页 |
| ·KRAS基因突变与EGFR单抗类药物疗效的关系 | 第15-16页 |
| ·BRAF基因突变与EGFR单抗类药物疗效的关系 | 第16页 |
| ·与EGFR单抗类药物疗效相关的其他基因 | 第16-17页 |
| ·立题背景与意义 | 第17-19页 |
| 第二章 KRAS七个热点突变、BRAF V600E阳性质控的建立 | 第19-29页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·培养基 | 第19-20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·方法 | 第20-24页 |
| ·PCR引物 | 第20-21页 |
| ·定点突变法克隆实验 | 第21-24页 |
| ·结果 | 第24-27页 |
| ·LDR结合琼脂糖凝胶电泳验证克隆结果 | 第24-26页 |
| ·测序验证克隆结果 | 第26-27页 |
| ·小结 | 第27-29页 |
| 第三章 基于缺口-连接酶链反应(Gap-LCR)检测突变方法的建立与优化 | 第29-40页 |
| ·材料与仪器 | 第29页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·试剂 | 第29页 |
| ·仪器 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-34页 |
| ·突变检测方法的总体设计 | 第29-30页 |
| ·检测探针的设计、合成及溶解 | 第30-32页 |
| ·Gap-LCR检测突变方法的建立 | 第32-33页 |
| ·扩增产物的检测 | 第33-34页 |
| ·结果与讨论 | 第34-39页 |
| ·小结 | 第39-40页 |
| 第四章 基于LDR检测突变方法的建立与优化 | 第40-62页 |
| ·材料与仪器 | 第40页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·试剂 | 第40页 |
| ·仪器 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-47页 |
| ·突变检测方法的总体设计 | 第40-41页 |
| ·检测探针的设计、合成及溶解 | 第41-43页 |
| ·LDR检测突变方法的建立 | 第43页 |
| ·扩增产物的检测 | 第43-46页 |
| ·多重LDR检测突变方法的建立优化 | 第46-47页 |
| ·结果与讨论 | 第47-60页 |
| ·检测条件的优化和检测灵敏度的确定 | 第47-51页 |
| ·野生型基因组DNA的检测 | 第51-53页 |
| ·临床样本的检测 | 第53-58页 |
| ·多重LDR结合琼脂糖凝胶电泳和2100芯片生物分析仪检测结的比较 | 第58-60页 |
| ·小结 | 第60-62页 |
| 第五章 LDR、Gap-LCR检测突变方法的比较 | 第62-64页 |
| 全文小结 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 附录 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
