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柔嫩艾美耳球虫杨凌株cDNA文库的免疫学筛选及其3-1E基因的克隆与表达

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-11页
第一章 寄生虫CDNA 文库的研究进展第11-22页
   ·CDNA 文库的构建第11-12页
     ·cDNA 文库构建的基本原理与方法第11-12页
     ·对cDNA 文库的分析第12页
   ·CDNA 文库的类型第12-15页
     ·经典cDNA 文库第12页
     ·标准化cDNA 文库第12-13页
     ·消减cDNA 文库第13-14页
     ·染色体区域特异性cDNA 文库第14页
     ·PCR cDNA 文库与RACE cDNA 文库第14-15页
     ·固相cDNA 文库第15页
   ·CDNA 文库的应用第15-21页
     ·原虫第15-17页
     ·蠕虫第17-21页
   ·展望第21-22页
第二章 鸡球虫功能基因组学的研究进展第22-31页
   ·虫体的管家基因第22-23页
     ·rRNA 基因第22-23页
     ·热休克蛋白基因第23页
   ·阶段性虫体抗原基因第23-25页
     ·未孢子化卵囊第24页
     ·孢子化卵囊第24页
     ·子孢子第24页
     ·裂殖子第24-25页
     ·大配子体第25页
   ·细胞器抗原基因第25-27页
     ·棒状体第25页
     ·折光体第25-26页
     ·微线蛋白第26-27页
   ·虫体表面抗原基因第27-31页
     ·TA4 基因第27-28页
     ·3-1E 基因第28页
     ·cSZ1 基因第28-29页
     ·gx5401 基因第29页
     ·Eam 20 和Eam 45 基因第29页
     ·Omz5-7 基因第29页
     ·cmz-8 基因第29页
     ·1pmc-61f 基因第29页
     ·p 250 基因第29-31页
第三章 球虫疫苗的研究进展第31-39页
   ·鸡球虫疫苗的种类第31页
   ·鸡球虫苗免疫的作用特点第31-32页
   ·鸡球虫苗的研究概况第32-38页
     ·强毒苗第32页
     ·弱毒苗第32-34页
     ·亚单位疫苗第34页
     ·重组疫苗第34-36页
     ·核酸疫苗第36-38页
   ·展望第38-39页
第四章 柔嫩艾美耳球虫CDNA 表达文库的免疫学筛选与基因克隆第39-53页
   ·材料第39-41页
     ·试剂、NC 膜和阳性血清第39页
     ·仪器和设备第39-40页
     ·培养液、培养基及溶液的配制第40-41页
   ·方法第41-47页
     ·宿主菌的培养第41页
     ·噬菌体的准备第41页
     ·免疫学筛选第41-42页
     ·目的片段与克隆载体的连接第42-45页
     ·重组质粒的鉴定第45-47页
     ·目的片段的序列分析第47页
   ·结果第47-50页
     ·阳性克隆的筛选结果第47页
     ·阳性噬斑PCR 扩增结果第47-48页
     ·阳性克隆的重组质粒鉴定结果第48页
     ·目的片段的序列测定及分析结果第48-50页
   ·讨论第50-53页
第五章 3-1E 基因的表达与功能分析第53-67页
   ·材料第53-54页
     ·菌株、载体和酶第53页
     ·试剂、NC 膜和阳性血清第53页
     ·仪器与设备第53-54页
     ·培养基和溶液的配制第54页
   ·方法第54-60页
     ·3-1E 基因重组表达载体的构建第54-58页
     ·3-1E 基因的诱导表达第58页
     ·3-1E 基因表达产物的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测第58-59页
     ·3-1E 基因表达条件的优化第59页
     ·3-1E 基因编码蛋白结构的预测第59-60页
   ·结果与分析第60-65页
     ·重组表达质粒pGEX-3-1E 的构建及鉴定第60页
     ·3-1E 基因表达产物SDS-PAGE 分析第60页
     ·不同诱导条件下基因编码蛋白的表达结果第60-62页
     ·3-1E 基因及其编码蛋白的结构预测第62-65页
   ·讨论第65-67页
     ·外源蛋白质融合表达策略第65页
     ·外源蛋白质表达部位选择策略第65-66页
     ·生物信息学技术分析预测编码蛋白的结构与功能策略第66页
     ·3-1E 外源蛋白融合表达的特点第66-67页
第六章 重组表达抗原对鸡球虫感染的免疫保护效果研究第67-75页
   ·材料与方法第67-71页
     ·材料第67-68页
     ·方法第68-71页
   ·结果与分析第71-74页
     ·可溶性蛋白的Western-blotting 分析结果第71-72页
     ·蛋白含量第72页
     ·增重变化第72页
     ·每克盲肠内容物卵囊数第72-73页
     ·盲肠病变记分情况第73-74页
   ·讨论第74-75页
结论第75-76页
参考文献第76-84页
附录第84-88页
缩略语英汉对照表第88-89页
致谢第89-90页
作者简介第90页

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