目录 | 第1-5页 |
摘要 | 第5-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
英文缩略词表 | 第11-13页 |
前言 | 第13-14页 |
实验材料 | 第14-19页 |
1. 实验细胞系 | 第14-15页 |
2. 主要试剂与药品 | 第15-17页 |
(1) 细胞培养试剂 | 第15页 |
(2) 离子通道记录用药 | 第15-16页 |
(3) 受体激动剂、拮抗剂及信号转导工具药 | 第16页 |
(4) 液闪相关试剂和固体 | 第16-17页 |
3. 主要实验仪器 | 第17-19页 |
(1) 膜片钳工作站 | 第17-18页 |
(2) 细胞培养用仪器 | 第18页 |
(3) 放射性同位素相关实验用仪器 | 第18-19页 |
实验方法 | 第19-35页 |
一、细胞培养技术 | 第19-20页 |
1. 常用溶液的配制 | 第19-20页 |
2. 细胞复苏 | 第20页 |
3. 细胞传代 | 第20页 |
4. 细胞冻存 | 第20页 |
二、膜片钳实验方法 | 第20-30页 |
1. 膜片钳技术简介 | 第20-23页 |
2. 膜片钳记录实验操作流程 | 第23-26页 |
3. 常用溶液的配制 | 第26-27页 |
4. 常用的刺激方案 | 第27-30页 |
5. 数据的处理与统计 | 第30页 |
三、配体受体结合的实验方法 | 第30-31页 |
四、蛋白竞争结合法测定细胞内腺苷酸环化酶的活性 | 第31-35页 |
实验结果 | 第35-114页 |
第一部分 U50488对未分化PC12细胞外向整流钾通道的作用机制研究 | 第35-98页 |
一、外向整流钾通道的通道特性研究 | 第35-51页 |
(一) 全细胞记录电流的特性 | 第35-45页 |
(二) 单通道记录电流的特性 | 第45-51页 |
二、K阿片受体激动剂U50488对PC12外向整流钾通道的调节作用 | 第51-70页 |
(一) 全细胞模式下观察U50488对外向整流钾通道的影响 | 第51-59页 |
(二) 单通道记录模式下观察U50488对外向钾通道的影响 | 第59-70页 |
三、U50488对PC12外向整流钾通道调节机理的初步探讨 | 第70-89页 |
(一) 阿片受体拮抗剂纳洛酮对U50488作用的影响 | 第70-72页 |
(二) 影响G蛋白作用的因素对U50488抑制作用的影响 | 第72-79页 |
(三) cAMP对U50488抑制外向整流钾电流作用的影响 | 第79-86页 |
(四) 穿孔膜片钳记录PC12细胞外向整流钾通道 | 第86-89页 |
四、U50488对MCF-7和κ-HEK293细胞电压依赖钾电流的作用 | 第89-98页 |
第二部分 U50488对未分化PC12细胞和κ-HEK293细胞内向整流钾通道的调节 | 第98-114页 |
一、PC12细胞内向整流钾通道的通道特性研究 | 第98-102页 |
(一) 全细胞电流特点 | 第98-99页 |
(二) 单通道记录 | 第99-102页 |
二、U50488对PC12细胞内向整流钾电流的作用 | 第102-107页 |
三、κ-HEK293细胞内源性内向钾通道电流 | 第107-110页 |
四、单通道记录U50488对κ-HEK293细胞内向钾电流的作用 | 第110-114页 |
讨论 | 第114-120页 |
小结 | 第120-122页 |
参考文献 | 第122-127页 |
钾通道与阿片镇痛(综述) | 第127-140页 |
个人简历 | 第140-141页 |
致谢 | 第141页 |