| 目录 | 第1-6页 |
| 缩略语表 | 第6-8页 |
| 中文摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 1.实验材料 | 第12-19页 |
| ·菌株 | 第12页 |
| ·载体 | 第12页 |
| ·培养基 | 第12-13页 |
| ·工具酶 | 第13页 |
| ·试剂盒 | 第13页 |
| ·试剂 | 第13-14页 |
| ·溶液 | 第14-17页 |
| ·仪器 | 第17-19页 |
| 2.实验方法 | 第19-47页 |
| ·表达载体的构建 | 第19-32页 |
| ·目的基因Rv3602c的扩增 | 第19-22页 |
| ·克隆载体的构建及测序分析 | 第22-29页 |
| ·表达载体的构建及测序分析 | 第29-32页 |
| ·蛋白表达 | 第32-38页 |
| ·蛋白表达株的构建 | 第32页 |
| ·蛋白的诱导表达 | 第32-33页 |
| ·SDS-PAGE检测蛋白表达 | 第33-35页 |
| ·蛋白诱导表达条件的优化 | 第35-38页 |
| ·蛋白纯化 | 第38-41页 |
| ·柱的预处理(column preparation) | 第38-39页 |
| ·样品的预处理(sample preparation) | 第39页 |
| ·使用(?)KTA prime系统纯化蛋白 | 第39-41页 |
| ·抑制剂筛选 | 第41-47页 |
| ·酶活测定体系的建立 | 第41-42页 |
| ·从化合物库中筛选抑制剂 | 第42-43页 |
| ·从发酵液筛选抑制剂 | 第43-44页 |
| ·抑制率(Inhibition Rate,IR) | 第44-45页 |
| ·阳性标准 | 第45页 |
| ·复筛 | 第45-46页 |
| ·细胞活性的验证 | 第46-47页 |
| 3.结果 | 第47-64页 |
| ·PCR | 第47页 |
| ·克隆质粒pGEM~(?)-T Easy：panC | 第47-48页 |
| ·表达质粒pET-30a(+)：panC | 第48-54页 |
| ·表达质粒酶切初步验证 | 第48-49页 |
| ·表达质粒中目的基因测序结果 | 第49-54页 |
| ·蛋白表达 | 第54-58页 |
| ·诱导时间的选择 | 第54页 |
| ·表达培养基的选择 | 第54-55页 |
| ·表达温度的选择 | 第55-58页 |
| ·IPTG浓度的选择 | 第58页 |
| ·蛋白纯化 | 第58-60页 |
| ·酶活测定 | 第60页 |
| ·抑制剂筛选 | 第60-64页 |
| ·化合物 | 第60-63页 |
| ·发酵液 | 第63-64页 |
| 4.讨论 | 第64-68页 |
| 5.结论 | 第68-69页 |
| 6.参考文献 | 第69-71页 |
| 文献综述 | 第71-85页 |
| 抗结核药物靶点研究最新进展 | 第71-85页 |
| 1.Abstract | 第71-72页 |
| 2.前言 | 第72页 |
| 3.与胞壁合成相关的新靶点 | 第72-74页 |
| ·dTDP-4-酮基-6-脱氧葡萄糖差向异构酶(RmIC,Rv3465) | 第72-73页 |
| ·肌醇-1-磷酸合成酶(Rv0046c,Ino1) | 第73-74页 |
| 4.与抗耐药有关的新靶点 | 第74-76页 |
| ·烷化过氧氢过氢化物酶(AphD) | 第74-75页 |
| ·芳香胺N-乙酰基转移酶(NATs) | 第75-76页 |
| 5.与核酸稳定性相关的靶点—m~1A58 tRNA甲基转移酶(Rv2118c) | 第76-77页 |
| 6.与电子传递及氧化还原相关的靶点 | 第77-78页 |
| ·,4-二羟基-2-萘甲酰辅酶A合成酶(Rv0548c,MenB) | 第77页 |
| ·P450氧化还原系统 | 第77-78页 |
| 7.研究现有未知作用机制的有效药物而发现的新靶点—脂肪酸去饱和酶(DesA3) | 第78-79页 |
| 8.重要代谢途径中的关键代谢酶相关的靶点—泛酸合成酶(Rv3602c,PanC) | 第79-80页 |
| 9.结语 | 第80-81页 |
| 10.参考文献 | 第81-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
