独创性声明 | 第1页 |
论文使用授权的说明 | 第4-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
英文摘要 | 第11-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-46页 |
第一节 农药残留及危害概况 | 第14-21页 |
1 农药残留对食品的污染 | 第14-16页 |
2 残留农药对饲料的影响 | 第16-18页 |
3 残留农药对环境的影响 | 第18-20页 |
4 农药的危害 | 第20-21页 |
第二节 农药残留的控制概况 | 第21-28页 |
1 控制农药残留的对策 | 第21-23页 |
2 消除农药残留的研究 | 第23-28页 |
·化学降解 | 第23-25页 |
·光化学降解法 | 第25-26页 |
·超声波诱导降解法 | 第26-27页 |
·电离辐射 | 第27页 |
·洗涤剂 | 第27-28页 |
3 生物降解 | 第28页 |
第三节 有机磷农药微生物降解的研究进展 | 第28-44页 |
1 有机磷农药降解微生物的种类 | 第29-30页 |
2 有机农药微生物降解的途径 | 第30-33页 |
3 有机磷农药降解酶及基因的研究 | 第33-41页 |
4 有机磷农药微生物降解的研究方向及发展趋势 | 第41-42页 |
5 存在的问题及展望 | 第42-44页 |
第五节 研究目的、意义与设计策略 | 第44-46页 |
第二章 甲基1605降解菌的分离和鉴定 | 第46-66页 |
第一节 甲基1605降解菌的分离、筛选 | 第46-51页 |
1 材料与方法 | 第46-49页 |
·实验材料 | 第46-47页 |
·甲基1605降解菌的分离 | 第47页 |
·降解产物的分析 | 第47页 |
·内生菌、JS018菌对甲基1605降解能力的测定 | 第47-49页 |
2.结果及分析 | 第49-51页 |
·土样农药降解菌的分离 | 第49页 |
·降解产物的鉴定 | 第49-50页 |
·内生菌、JS018菌对甲基1605的降解能力 | 第50-51页 |
3 小结与讨论 | 第51页 |
第二节 JS018菌株的鉴定 | 第51-66页 |
1 材料和方法 | 第51-55页 |
·实验材料 | 第51-52页 |
·JS018菌的形态观察 | 第52页 |
·JS018菌生长曲线,最适温度、最适pH的测定 | 第52-53页 |
·生理生化特性测定 | 第53-55页 |
·抗生素敏感性试验 | 第55页 |
·16SrDNA序列分析 | 第55页 |
·细菌自动鉴定系统鉴定 | 第55页 |
2 结果与分析 | 第55-64页 |
·JS018菌的形态观察 | 第55-56页 |
·JS018生长曲线 | 第56-57页 |
·JS018菌抗药性测定 | 第57-58页 |
·JS018生理生化特性 | 第58-60页 |
·16SrDNA序列分析 | 第60-63页 |
·细菌自动鉴定系统鉴定 | 第63-64页 |
3、小结与计论 | 第64-66页 |
第三章 JS018菌农药降解谱的测定 | 第66-79页 |
第一节 JS018菌农药降解谱的测定 | 第66-70页 |
1 材料与方法 | 第66-68页 |
·实验材料 | 第66页 |
·JS018菌对几种有机磷农药的耐受浓度(平板生长法) | 第66-67页 |
·JS018菌种子液的培养 | 第67页 |
·JS018菌对有机磷农药的降解能力的测定 | 第67页 |
·JS018菌对拟除虫菊酯类农药降解能力的测定 | 第67-68页 |
2 结果与分析 | 第68-69页 |
·JS018菌在有机磷含农药和拟菊酯类农药平板上的生长 | 第68页 |
·JS018菌对几种有机磷农药和菊酯类农药的降解能力的测定 | 第68-69页 |
3 小结与讨论 | 第69-70页 |
第二节 JS018菌生长及产酶条件的研究 | 第70-79页 |
1 材料与方法 | 第70-71页 |
·实验材料 | 第70页 |
·菌体生长量测定方法 | 第70页 |
·甲基对硫磷降解酶活性测定方法 | 第70页 |
·不同N源对JS018菌生长和产酶的影响 | 第70页 |
·不同C源对JS018菌生长与产酶的影响 | 第70页 |
·不同浓度的葡萄糖对菌生长以及产酶的影响 | 第70页 |
·不同浓度的酵母粉对菌生长以及产酶的影响 | 第70页 |
·不同离子、添加物和微量元素对菌生长以及产酶的影响 | 第70-71页 |
·培养条件的优化 | 第71页 |
·差异显著性分析 | 第71页 |
2 结果与分析 | 第71-78页 |
·不同N源对JS018菌生长和产酶的影响 | 第71-72页 |
·不同C源对JS018菌生长与产酶的影响 | 第72-74页 |
·不同浓度的葡萄糖对菌生长以及产酶的影响 | 第74-75页 |
·不同浓度的酵母粉对菌生长以及产酶的影响 | 第75-77页 |
·不同离子、添加物和微量元素对菌生长以及产酶的影响 | 第77页 |
·培养条件的优化 | 第77-78页 |
3 小结与讨论 | 第78-79页 |
第四章 JS018菌有机磷农药降解酶特性的研究 | 第79-105页 |
第一节 JS018菌有机磷农药降解酶的分离纯化 | 第79-93页 |
1 材料与方法 | 第79-84页 |
·实验材料 | 第79-81页 |
·细菌培养 | 第81页 |
·产酶曲线的测定 | 第81页 |
·降解酶(OPD)存在位置的研究 | 第81-82页 |
·硫酸铵盐析沉淀OPD | 第82页 |
·Sephadex G-100柱层析纯化OPD | 第82页 |
·PAGE非变性胶电泳检测OPD纯度 | 第82页 |
·DEAE-52柱层析 | 第82-83页 |
·SDS-PAGE法测定OPD分子量 | 第83页 |
·降解酶N末端氨基酸残基序列测定 | 第83页 |
·酶活力测定 | 第83-84页 |
·蛋白质浓度的测定 | 第84页 |
2 结果与分析 | 第84-93页 |
·对硝基苯酚标准曲线的制作 | 第84-85页 |
·蛋白质浓度的测定 | 第85-86页 |
·JS018菌在发酵培养液中的产酶曲线 | 第86-87页 |
·OPD存在位置 | 第87页 |
·最适酶盐析硫酸铵饱和度的确定 | 第87-88页 |
·Sephadex G-100柱层析 | 第88-89页 |
·PAGE电泳检测OPD | 第89-90页 |
·DEAE-52柱层析及酶N末端氨基酸残基序列测定 | 第90-91页 |
·SDS-PAGE电泳确定OPD分子量 | 第91-93页 |
3小结与讨论 | 第93页 |
第二节 JS018菌有机磷农药降解酶的特性的研究 | 第93-105页 |
1 材料与方法 | 第93-95页 |
·实验材料 | 第93-94页 |
·反应时间对产物生成量的影响 | 第94页 |
·酶浓度与酶活力的关系 | 第94页 |
·不同试剂对甲基对硫磷降解酶的影响性 | 第94页 |
·pH对甲基对硫磷降解酶的影响及酸碱稳定 | 第94页 |
·温度对甲基对硫磷降解酶的影响及酶的热稳定性 | 第94-95页 |
·有机溶剂对甲基对硫磷降解酶的影响 | 第95页 |
·不同金属离子对甲基对硫磷降解酶的影响 | 第95页 |
·甲基对硫磷降解酶活性的动力学常数测定 | 第95页 |
2 结果与分析 | 第95-104页 |
·反应时间对产物生成量的影响 | 第95-96页 |
·酶浓度与酶活力的关系 | 第96-97页 |
·不同试剂对酶活的影响 | 第97-98页 |
·pH对甲基对硫磷降解酶的影响及酶的酸碱稳定性 | 第98-99页 |
·温度对甲基对硫磷降解酶的影响及酶的热稳定性 | 第99-101页 |
·有机溶剂对酶活的影响 | 第101页 |
·不同金属离子对JS018菌降解酶活性的影响 | 第101-102页 |
·甲基对硫磷降解酶活性的动力学分析 | 第102-104页 |
3 小结与讨论 | 第104-105页 |
总结与讨论 | 第105-107页 |
参考文献 | 第107-121页 |
附录1 | 第121-122页 |
附录2 | 第122-125页 |
附录3 | 第125-131页 |
附录4 | 第131-132页 |
致谢 | 第132页 |