| 引言 | 第1-24页 |
| 1 芸薹属作物分子标记和基因组研究进展 | 第14-17页 |
| ·芸薹属作物分子遗传图谱的构建 | 第14-15页 |
| ·芸薹属作物利用分子标记进行的基因定位研究 | 第15页 |
| ·芸薹属作物的比较基因组研究 | 第15-16页 |
| ·芸薹属作物的亲缘关系与进化研究 | 第16-17页 |
| 2 荧光原位杂交技术及其发展 | 第17-20页 |
| ·FISH技术发展过程中杂交分辨率的变化 | 第18页 |
| ·提高低(单)拷贝DNA序列FISH灵敏度的几种方法 | 第18-19页 |
| ·荧光原位杂交技术的几种衍生技术 | 第19-20页 |
| 3 重复序列在芸薹属作物上的研究 | 第20-22页 |
| 4 本项研究的背景、内容和目的 | 第22-24页 |
| 第一章 大白菜FISH技术体系的建立 | 第24-40页 |
| 1 材料与方法 | 第24-30页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·供试探针 | 第24页 |
| ·试剂盒 | 第24-25页 |
| ·常用储液配制 | 第25页 |
| ·试验方法 | 第25-30页 |
| ·根尖中期染色体制片 | 第25页 |
| ·DNA纤维制片 | 第25-26页 |
| ·探针的标记、标记效果的检测与纯化 | 第26-27页 |
| ·荧光原位杂交技术参数的筛选 | 第27-28页 |
| ·染色体原位杂交及信号检测程序 | 第28-29页 |
| ·DNA纤维原位杂交及信号检测 | 第29-30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-35页 |
| ·大白菜染色体制片技术体系的建立 | 第30-31页 |
| ·两种染色体制片技术效果比较 | 第30页 |
| ·酶解去壁低渗法制片过程中相关因子的研究 | 第30-31页 |
| ·酶解去壁低渗法制片技术流程的建立 | 第31页 |
| ·探针标记效率的检测 | 第31-32页 |
| ·大白菜荧光原位杂交体系的建立 | 第32-34页 |
| ·荧光原位杂交技术参数的筛选结果 | 第32-33页 |
| ·大白菜FISH杂交体系的建立 | 第33页 |
| ·45S rDNA在大白菜和甘蓝染色体上的杂交 | 第33-34页 |
| ·细胞核及伸展DNA纤维质量的检查 | 第34-35页 |
| ·细胞核的提取 | 第34页 |
| ·DNA纤维标本的制备 | 第34页 |
| ·基因组DNA做探针对基因组DNA纤维杂交 | 第34-35页 |
| 3 讨论 | 第35-40页 |
| ·关于染色体制片技术的探讨 | 第35页 |
| ·酶解去壁低渗法制片过程中应注意的两个因素 | 第35-36页 |
| ·对荧光原位杂交技术的几点讨论 | 第36-37页 |
| ·探针的标记和杂交液中的浓度 | 第36-37页 |
| ·变性处理和杂交时间 | 第37页 |
| ·杂交后洗脱 | 第37页 |
| ·对DNA fiber-FISH技术的探索 | 第37-40页 |
| ·细胞核悬液的制备 | 第37-38页 |
| ·DNA纤维的制备 | 第38页 |
| ·fiber-FISH荧光信号的特点 | 第38-39页 |
| ·在大白菜上建立fiber-FISH技术体系的意义 | 第39-40页 |
| 第二章 rDNA在大白菜二倍体和初级三体的染色体定位 | 第40-58页 |
| 1 材料与方法 | 第41-42页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·植物材料 | 第41页 |
| ·供试探针 | 第41页 |
| ·常用储液配制 | 第41页 |
| ·试验方法 | 第41-42页 |
| ·根尖中期染色体制片 | 第41页 |
| ·核型分析 | 第41页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第41-42页 |
| ·探针标记、纯化与标记效果的检测 | 第42页 |
| ·染色体荧光原位杂交和信号检测 | 第42页 |
| ·DNA纤维原位杂交及信号检测 | 第42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-53页 |
| ·大白菜有丝分裂中期不同染色体的确定 | 第42-45页 |
| ·大白菜二倍体有丝分裂中期染色体形态图 | 第42-44页 |
| ·大白菜前中期染色体的DAPI显带 | 第44-45页 |
| ·大白菜不同初级三体组培苗核型分析 | 第45-49页 |
| ·大白菜组培苗株系染色体数目的鉴定 | 第45-46页 |
| ·大白菜三体组培苗株系核型分析 | 第46-49页 |
| ·25S rDNA在大白菜二倍体和初级三体上的定位 | 第49-52页 |
| ·25S rDNA在大白菜二倍体上的定位结果 | 第49-50页 |
| ·25S rDNA在大白菜不同初级三体上的定位结果 | 第50-52页 |
| ·5S rDNA在大白菜二倍体和初级三体上的定位 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-58页 |
| ·rDNA基因在大白菜二倍体染色体上定位的两点探讨 | 第53-54页 |
| ·关于rDNA的杂交信号与随体的关系 | 第53-54页 |
| ·2 关于rDNA信号位点的位置与异染色质的关系 | 第54页 |
| ·rDNA在大白菜不同三体染色体上位点的多态性 | 第54-56页 |
| ·rDNA在芸薹属的核型分析和大白菜染色体识别中的应用 | 第56-58页 |
| 第三章 大白菜功能基因片段的克隆与部分基因的定位 | 第58-77页 |
| 1 材料与方法 | 第58-65页 |
| ·材料 | 第58-61页 |
| ·植物材料 | 第58-59页 |
| ·菌株和质粒载体 | 第59页 |
| ·各种酶类 | 第59页 |
| ·试剂盒 | 第59页 |
| ·常用储液配制 | 第59页 |
| ·白菜类作物功能基因的确定 | 第59-61页 |
| ·试验方法 | 第61-65页 |
| ·材料的准备 | 第61-62页 |
| ·基因组DNA的提取和检测 | 第62页 |
| ·引物设计、合成与PCR扩增 | 第62页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第62-63页 |
| ·大肠杆菌DH5a感受态的制备 | 第63页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第63-64页 |
| ·单克隆菌体的鉴定 | 第64页 |
| ·测序 | 第64页 |
| ·探针的获得 | 第64-65页 |
| ·探针的标记、标记效率的检测与标记探针的纯化 | 第65页 |
| ·染色体制片 | 第65页 |
| ·荧光原位杂交 | 第65页 |
| 2.结果与分析 | 第65-75页 |
| ·大白菜基因组DNA质量的检测 | 第65-66页 |
| ·各基因探针的扩增、克隆与测序结果 | 第66-70页 |
| ·PCR条件的优化 | 第67-68页 |
| ·质粒DNA的转化 | 第68页 |
| ·单菌落PCR鉴定结果 | 第68-69页 |
| ·EPSP_(1409)基因克隆等14个PCR产物测序鉴定结果 | 第69-70页 |
| ·EPSP_(1409)、RGA_(944)、RPS2_(671)、CYP_(954)四个基因片段的序列分析 | 第70-74页 |
| ·EPSP_(1409)基因片段的序列分析 | 第71页 |
| ·RGA_(944)基因片段的序列分析 | 第71-72页 |
| ·RPS2_(671)基因片段的序列分析 | 第72-73页 |
| ·CYP_(954)基因片段的序列分析 | 第73-74页 |
| ·EPSP_(1409)、RGA_(944)、RPS2_(671)、CYP_(954)四个基因在大白菜染色体上的定位 | 第74-75页 |
| 3 讨论 | 第75-77页 |
| ·白菜类作物功能基因在大白菜上的克隆和分离 | 第75-76页 |
| ·单低拷贝基因的定位技术探讨 | 第76-77页 |
| 结论 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-90页 |
| 附录A | 第90-105页 |
| 附录B | 第105-109页 |
| 附录C | 第109-116页 |
| 发表的论文 | 第116-117页 |
| 作者简介 | 第117-119页 |
| 致谢 | 第119-123页 |
