| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 1.文献综述 | 第10-35页 |
| ·前言 | 第10-11页 |
| ·重金属的污染途径及对人类健康的危害 | 第11-14页 |
| ·微生物对重金属的耐受机制 | 第14-28页 |
| ·微生物对重金属的累积 | 第14-18页 |
| ·重金属的微生物转化 | 第18-20页 |
| ·金属硫蛋白 | 第20-23页 |
| ·重金属输出系统 | 第23-28页 |
| ·假单胞菌的金属抗性研究进展 | 第28-32页 |
| ·双组分信号转导系统简介 | 第32-33页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第33-35页 |
| 2.材料和方法 | 第35-49页 |
| ·材料 | 第35-42页 |
| ·菌株与质粒 | 第35-36页 |
| ·培养基 | 第36-39页 |
| ·试剂和缓冲液 | 第39-42页 |
| ·抗生素 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-49页 |
| ·分子生物学常规操作 | 第42页 |
| ·菌株CD2的形态学观察和生理生化鉴定 | 第42-45页 |
| ·菌株CD2对金属的最大耐受浓度(MTC)的测定 | 第45页 |
| ·假单胞菌总DNA的提取 | 第45页 |
| ·16S rDNA的序列测定 | 第45-46页 |
| ·接合实验 | 第46页 |
| ·Inverse PCR反应 | 第46-48页 |
| ·β-Galactosidase的活性测定 | 第48页 |
| ·核酸及蛋白质序列分析 | 第48-49页 |
| 3.结果与讨论 | 第49-77页 |
| ·耐镉细菌CD2的分离鉴定 | 第49-56页 |
| ·菌株的分离 | 第49页 |
| ·形态学观察 | 第49页 |
| ·生理生化实验 | 第49-52页 |
| ·16S rDNA序列分析 | 第52-54页 |
| ·抗药性实验 | 第54-55页 |
| ·Pseudomonas putida CD2的重金属耐受能力 | 第55页 |
| ·小结与讨论 | 第55-56页 |
| ·突变体库的构建及镉敏感突变体的筛选 | 第56-59页 |
| ·Tn5-B21插入突变体库的构建 | 第56-57页 |
| ·镉敏感突变菌株的筛选 | 第57-58页 |
| ·突变菌株的重金属耐受能力 | 第58页 |
| ·小结与讨论 | 第58-59页 |
| ·抗性基因的克隆 | 第59-63页 |
| ·Tn5-B21插入失活基因部分片段的PCR扩增 | 第59页 |
| ·Tn5-B21插入失活基因扩增片段的测序及序列分析 | 第59-61页 |
| ·小结与讨论 | 第61-63页 |
| ·colRS全基因克隆及互补实验 | 第63-75页 |
| ·colRS全基因克隆 | 第63页 |
| ·colRS核酸序列分析 | 第63-67页 |
| ·ColRS蛋白质序列的分析 | 第67-71页 |
| ·互补实验验证colRS的功能 | 第71-74页 |
| ·小结与讨论 | 第74-75页 |
| ·抗性基因的金属诱导活性 | 第75-77页 |
| 总结和展望 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-91页 |
| 课题资助 | 第91页 |
| 博士研究生期间发表论文情况 | 第91-92页 |
| 附录 | 第92-96页 |
| 致谢 | 第96页 |