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稻瘟病菌MgKIN1、MgS20和MgS32基因的克隆与分析

第一章 文献综述第1-40页
 1 稻瘟病与稻瘟病菌第13页
 2 稻瘟病菌的生活史第13-14页
 3.侵染过程与防治第14-15页
 4.稻瘟病菌附着胞形成过程第15-17页
 5.稻瘟病菌附着胞分化的相关基因第17-25页
   ·寄主表面理化信号的识别和信号传导途径第17-24页
   ·附着胞的成熟与膨压形成过程中的功能基因第24-25页
 6.稻瘟病菌是丝状病原真菌分子生物学研究的模式第25-26页
 7.驱动蛋白第26-32页
   ·驱动蛋白的简介第26-27页
   ·真菌驱动蛋白的进化第27-28页
   ·子家族 N型马达第28-31页
   ·子家族 C型马达第31-32页
 8.MgS20基因的推测功能第32-34页
   ·Aldo/keto还原酶第32-33页
   ·脂肪酸脱氢酶第33-34页
 9.MgS32基因的推测功能第34-35页
 10.稻瘟病菌致病相关基因的研究方法第35-38页
   ·构建稻瘟病菌突变子库第35-36页
   ·差异表达筛选(Differenfial cDNA screens)第36-37页
   ·基因表达连续分析法(Serial analysis of gene expression,SAGE)第37页
   ·抑制消减杂交技术(Suppression subtractive hybridization,SSH)第37-38页
 11.本研究的目的、内容和意义第38-40页
第二章 材料与方法第40-57页
 第一节 驱动蛋白基因部分第40-54页
  1.MgKIN1基因的确定与序列比对第40页
  2.稻瘟病菌菌株、培养基及培养条件第40-42页
  3.细菌菌株、培养基及培养条件第42页
  4.DNA相关操作第42-51页
  5.敲除载体的原生质体的转化第51-53页
  6.MgKIN1基因的eGFP表达分析第53-54页
 第二节 MgS20 MES32基因部分第54-57页
  1.MgS20 MgS32基因的确定与序列比对第54页
  2.MgS20 MgS32基因敲除置换载体的构建第54-57页
第三章 结果与分析第57-74页
 1.MgKIN1 MgS20 MgS32基因的分离和克隆第57-64页
   ·MgKIN1基因的确定、克隆与序列测定第57-60页
   ·MgS20基因的确定与分析第60-62页
   ·MgS32基因的确定与分析第62-64页
 2.MgKIN1 MgS20 MgS32基因敲除载体的构建及目标置换过程第64-67页
   ·MgKIN1基因敲除载体的构建及目标置换过程第64-66页
   ·MgKIN1基因的目标置换过程第66-67页
   ·MgS20 MgS32基因敲除置换载体的构建第67页
 3.多次敲除转化第67-71页
   ·MgKIN1::HPHA载体转化子的PCR初筛与Southern blotting的杂交鉴定第68-70页
   ·MgKIN1::HPHB载体转化子的PCR初筛第70页
   ·MgS20 MgS32 MgS214 MGS273基因转化子的PCR的初筛第70-71页
 4.MgKIN1基因的时空表达第71-74页
   ·融合载体MgKIN1::eGFP::HPH的构建第71-72页
   ·融合载体MgKIN1::eGFP::HPH转化子的荧光表达第72-74页
第四章 讨论第74-77页
 1.与附着胞形成和致病性有关的基因第74-75页
 2.附着胞的机械压力说第75页
 3.MgKIN1基因在稻瘟病菌多个发育阶段表达第75页
 4.敲除过程的几个问题第75-77页
第五章 小结第77-78页
 1.MgKIN1基因第77页
 2.其余四个基因第77-78页
参考文献第78-89页

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