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梅毒螺旋体TpN17重组抗原的表达、纯化及鉴定

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
第一章 引言第8-19页
   ·梅毒研究进展第8-11页
     ·梅毒螺旋体的生物学特性第8-9页
     ·梅毒螺旋体的致病性第9-10页
     ·梅毒与艾滋病的联合感染第10-11页
   ·梅毒实验室诊断方法研究进展及评价第11-14页
     ·梅毒实验室诊断方法简介第11-12页
     ·梅毒实验室诊断方法评价第12-14页
   ·梅毒螺旋体部分抗原的研究进展第14-16页
   ·本课题的主要研究内容及意义第16-18页
   ·试验流程示意图第18-19页
第二章 实验材料与方法第19-29页
   ·实验材料第19-21页
     ·菌株和质粒第19页
     ·酶及试剂第19-20页
     ·主要仪器第20-21页
   ·实验方法第21-29页
     ·TpN17基因片断的克隆第21页
     ·原核表达重组体pET-28b(+)/tpn17的构建第21-24页
     ·pET-28b(+)/tpn17在大肠杆菌中的表达第24-25页
     ·表达产物的Western-blot分析第25页
     ·表达条件的初步探索第25-26页
     ·His-TpN17融合蛋白的纯化及其免疫原性的鉴定第26-27页
       ·蛋白纯化第26-27页
       ·免疫印迹分析第27页
     ·His-TpN17融合蛋白的透析与定量测定第27-29页
第三章 结果与分析第29-37页
   ·TpN17基因片断的克隆第29页
   ·重组表达质粒pET-28b(+)/tpn17的构建与鉴定第29-31页
     ·菌体PCR鉴定第29-30页
     ·酶切鉴定第30页
     ·重组表达质粒pET-28b(+)/tpn17序列测定及分析第30-31页
   ·His-TpN17融合蛋白的诱导表达第31页
   ·表达产物的Western-blot分析第31-32页
   ·诱导条件的探索及优化第32-34页
     ·诱导温度对产物表达的影响第32-33页
     ·诱导时间对产物表达的影响第33页
     ·IPTG浓度对产物表达的影响第33-34页
   ·His-TpN17融合蛋白的纯化及其免疫原性的鉴定第34-36页
     ·目的蛋白的表达及纯化第34-35页
     ·Western-blot分析第35-36页
   ·His-TpN17融合蛋白的透析与定量测定第36-37页
第四章 讨论第37-44页
致谢第44-45页
参考文献第45-51页
附录 A 攻读学位期间发表论文目录第51-52页
附录 B 主要溶液的配制方法第52-55页
附录 C 实验操作方法第55-61页

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