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费氏中华根瘤菌嘌呤合成酶基因purL表达的改造对共生能力的影响及其在生态安全防范中的应用研究

缩略语第1-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-12页
1.文献综述第12-41页
 前言第13-14页
   ·根瘤菌的形态,生理,营养与生存环境第14页
   ·根瘤菌的分类与互接种族关系第14-16页
   ·结瘤的早期过程与基因调控第16-20页
     ·根瘤菌的结瘤过程第16-17页
     ·结瘤基因及其表达调控第17-18页
     ·胞外多糖,脂多糖和荚膜多糖在共生过程中的作用第18-20页
     ·结瘤的宿主专一性第20页
   ·共生固氮体系的建立、功能与基因调控第20-27页
     ·根瘤的发育过程第20-21页
     ·共生固氮基因及其调控表达第21-25页
       ·共生基因与功能第21-22页
       ·共生基因的表达调控第22-25页
     ·根瘤中的代谢调控第25-27页
       ·碳代谢第25-26页
       ·氮代谢第26页
       ·代谢调控第26-27页
   ·影响共生固氮的几个重要因素与研究进展第27-32页
     ·根瘤菌的群体感应现象第27-28页
     ·结瘤的竞争性第28-29页
     ·嘌呤代谢途径第29-32页
   ·重组微生物和生态安全第32-39页
     ·转基因植物与动物第32页
     ·重组微生物第32-33页
     ·重组根瘤菌第33-34页
     ·生态安全第34-35页
     ·生态安全策略第35-39页
       ·管理制度第35-36页
       ·生态防范技术(Biological containment)第36-38页
       ·根瘤菌的生态防范第38-39页
   ·本研究目的第39-41页
2.材料和方法第41-51页
   ·材料第41-48页
     ·菌株和质粒第41-42页
     ·培养基第42-44页
     ·抗生素与外源添加营养物质第44-45页
     ·试剂第45-48页
   ·方法第48-51页
3.结果和讨论第51-107页
   ·费氏中华根瘤菌PurL~-突变株的构建第52-68页
     ·purL结构基因内Xhol-Notl片段置换为luxAB片段第52-60页
       ·基因置换载体pHN701的构建第52-54页
       ·费氏中华根瘤菌中purL基因的置换第54-57页
       ·purL组成型表达载体pBBR-PG的构建第57-59页
       ·突变株P825回复突变的验证第59-60页
     ·purL结构基因内1.98kb片段的缺失第60-64页
       ·基因置换载体pHN711的构建第61-64页
       ·突变株P618回复突变的验证第64页
     ·PurL突变株的共生性状第64-66页
     ·其它供试根瘤菌株PurL~-突变株的构建与筛选第66-67页
     ·小结与讨论第67-68页
   ·利用P_(fixK)和P_(fixR)对purL基因表达的改造第68-74页
     ·含共生特异性启动子P_(fixK)和P_(fixR)的purL诱导表达盒的构建第68-70页
     ·含共生诱导型表达盒P_(fixK)-purL和P_(fixR)-purL的重组根瘤菌生长状况的测定第70-71页
     ·含有共生诱导型表达盒P_(fixK)-purL和P_(fixR)-purL的根瘤菌共生能力第71-73页
     ·小结与讨论第73-74页
   ·利用报告基因gusA研究purL基因的时空表达第74-94页
     ·purL-gusA微弱表达载体pHN811的构建第74-76页
     ·purL-gusA共生诱导型表达载体pTPG-PnifH,pTPG-PfixN和pTPG-PnifQ的构建第76-78页
     ·HH103染色体上purL基因与外源purL-gusA融合单元的重组第78-80页
     ·purL基因表达水平对根瘤菌生长的影响第80-83页
     ·purL表达方式和水平对根瘤菌共生能力的影响第83-92页
     ·小结与讨论第92-94页
   ·purL基因表达方式对竞争结瘤和土壤存活能力的影响第94-101页
     ·重组菌株的竞争结瘤能力第94-98页
     ·重组菌株延迟共接种时的竞争结瘤能力第98-99页
     ·供试菌株在土壤中存活能力第99-100页
     ·小结与讨论第100-101页
   ·费氏中华根瘤菌PurL~-突变株与重组菌株的其它生物学特性研究第101-107页
     ·PurL~-突变株的脂多糖分析第101-102页
     ·purL基因渗漏表达对菌体形态的影响第102-104页
     ·PurL~-突变对菌株接合转移能力的影响第104-106页
     ·小结与讨论第106-107页
4.总结和展望第107-109页
参考文献第109-123页
附录第123-125页
发表文章第125-126页
致谢第126页

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