目录 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-10页 |
ABSTRACT | 第10-14页 |
本文缩写词表 | 第14-15页 |
第一章 绪论 | 第15-32页 |
1.1 充分利用木质纤维素资源的重大意义 | 第15-16页 |
1.2 木质纤维素及其利用的研究现状 | 第16-17页 |
1.3 木糖的代谢 | 第17-21页 |
1.3.1 木糖代谢途径 | 第17-18页 |
1.3.2 发酵木糖的微生物 | 第18-20页 |
1.3.3 木糖代谢工程 | 第20-21页 |
1.4 酿酒酵母工程菌发酵木糖产乙醇的研究 | 第21-27页 |
1.4.1 木糖代谢途径在酿酒酵母中的建立 | 第21-24页 |
1.4.2 木糖代谢流下游的疏通 | 第24-25页 |
1.4.3 木糖的运输 | 第25-26页 |
1.4.4 辅酶工程在木糖代谢中的应用 | 第26页 |
1.4.5 其他与木质纤维材料全利用产乙醇的代谢途径改造 | 第26-27页 |
1.5 利用木糖的其他工程菌研究现状 | 第27-28页 |
1.6 酿酒酵母分泌蛋白以及酿酒酵母表面展示系统 | 第28-30页 |
1.6.1 酿酒酵母细胞表面蛋白 | 第28-29页 |
1.6.2 外源基因在酿酒酵母细胞表面的锚定表达策略 | 第29页 |
1.6.3 外源蛋白表达位置的检测 | 第29-30页 |
1.6.4 酿酒酵母表面展示系统的应用 | 第30页 |
1.7 展望 | 第30页 |
1.8 本文的研究工作 | 第30-32页 |
第二章 超表达木酮糖激酶的酿酒酵母木糖代谢工程菌的构建及其代谢产物分析 | 第32-52页 |
2.1 导言 | 第32页 |
2.2 材料与方法 | 第32-39页 |
2.2.1 菌株和质粒 | 第32页 |
2.2.2 分子克隆用酶和试剂 | 第32页 |
2.2.3 培养基 | 第32-34页 |
2.2.4 微生物学技术 | 第34页 |
2.2.5 分子生物学方法 | 第34-37页 |
2.2.6 粗酶液的制备 | 第37页 |
2.2.7 酶活测定方法 | 第37-38页 |
2.2.8 蛋白质含量的测定 | 第38页 |
2.2.9 菌株平板生长试验 | 第38页 |
2.2.10 葡萄糖木糖共发酵试验 | 第38-39页 |
2.2.11 发酵生长曲线的测定 | 第39页 |
2.2.12 发酵产物分析 | 第39页 |
2.3 结果与讨论 | 第39-51页 |
2.3.1 超表达木酮糖激酶的重组质粒的构建 | 第39-45页 |
2.3.2 表达木糖代谢关键酶基因的重组菌株的构建 | 第45-46页 |
2.3.3 重组菌XK酶活性测定 | 第46页 |
2.3.4 重组菌株以木糖为唯一碳源的生长 | 第46-47页 |
2.3.5 木酮糖激酶对重组菌株在葡萄糖木糖共底物发酵中的影响 | 第47-51页 |
2.4 本章小结 | 第51-52页 |
第三章 在酿酒酵母体外表达木糖异构酶 | 第52-76页 |
3.1 导言 | 第52页 |
3.2 材料与方法 | 第52-56页 |
3.2.1 菌株和质粒 | 第52-54页 |
3.2.2 分子克隆用酶和试剂 | 第54页 |
3.2.3 培养基及培养条件 | 第54页 |
3.2.4 微生物学技术 | 第54页 |
3.2.5 分子生物学方法 | 第54-55页 |
3.2.6 免疫荧光显微镜试验 | 第55页 |
3.2.7 粗酶液的制备 | 第55页 |
3.2.8 酶活测定方法 | 第55页 |
3.2.9 SDS-PAGE | 第55页 |
3.2.10 菌株平板生长试验 | 第55页 |
3.2.11 重组菌EBY100/pYD-xy1A的木糖生长试验 | 第55页 |
3.2.12 底物产物分析 | 第55-56页 |
3.3 结果与讨论 | 第56-75页 |
3.3.1 a-型凝集素表面展示系统对XI的表面展示 | 第56-61页 |
3.3.2 alpha-凝集素表面展示系统对XI的表面展示 | 第61-68页 |
3.3.3 酿酒酵母分泌表达XI | 第68-75页 |
3.4 本章小结 | 第75-76页 |
第四章 嗜热细菌xy1A的分子改造以及纤维堆囊菌木糖异构酶基因的克隆 | 第76-90页 |
4.1 导言 | 第76-77页 |
4.2 材料与方法 | 第77-79页 |
4.2.1 菌株和质粒 | 第77页 |
4.2.2 分子克隆用酶和试剂 | 第77页 |
4.2.3 培养基及培养条件 | 第77页 |
4.2.4 微生物学技术 | 第77页 |
4.2.5 分子生物学方法 | 第77-79页 |
4.2.6 粗酶液的制备 | 第79页 |
4.2.7 酶活测定方法 | 第79页 |
4.2.8 蛋白质含量的测定 | 第79页 |
4.3 结果与讨论 | 第79-89页 |
4.3.1 嗜热细菌xy1A的分子改造 | 第79-86页 |
4.3.2 纤维堆囊菌木糖异构酶基因的克隆 | 第86-89页 |
4.4 本章小结 | 第89-90页 |
全文总结 | 第90-92页 |
参考文献 | 第92-103页 |
致谢 | 第103-104页 |
在读期间已发表或录用的论文 | 第104页 |