| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-21页 |
| ·烟草真菌病研究进展 | 第13-15页 |
| ·烟草真菌病简介 | 第13页 |
| ·烟草真菌病害防卫反应机理 | 第13-14页 |
| ·烟草真菌病发生与防治 | 第14-15页 |
| ·R 基因的研究 | 第15-17页 |
| ·R 基因研究简介 | 第15-16页 |
| ·R 基因结构 | 第16页 |
| ·R 基因结构在抗病基因鉴定上的作用 | 第16-17页 |
| ·RNA 干涉技术 | 第17-18页 |
| ·RNA 干涉的发现 | 第17页 |
| ·RNA 干涉作用机理 | 第17页 |
| ·RNA 干涉的特征 | 第17-18页 |
| ·RNA 干涉技术在基因功能研究中的应用 | 第18页 |
| ·GATEWAY 技术 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的、意义、主要内容和技术路线 | 第19-21页 |
| ·研究目的 | 第19页 |
| ·研究意义 | 第19-20页 |
| ·研究内容 | 第20页 |
| ·技术路线 | 第20-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-34页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·质粒和菌株 | 第21页 |
| ·酶和试剂 | 第21-22页 |
| ·培养基 | 第22页 |
| ·主要实验仪器 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-34页 |
| ·Gateway 克隆技术构建烟草抗真菌病相关基因的 RNA 干涉载体 | 第23-28页 |
| ·RNA 干涉载体的农杆菌转化 | 第28-29页 |
| ·农杆菌介导法转化普通烟草 | 第29-30页 |
| ·转基因植株的锻炼、移栽及检测 | 第30-32页 |
| ·转基因植株的抗黑胫病病接种鉴定 | 第32-34页 |
| 第三章 结果与分析 | 第34-43页 |
| ·RNA 干涉载体的构建 | 第34-38页 |
| ·候选基因结构分析 | 第34-35页 |
| ·干扰片段的 PCR 扩增 | 第35-36页 |
| ·RNA 干涉载体的获得 | 第36-37页 |
| ·酶切检测及测序结果的比对 | 第37-38页 |
| ·农杆菌介导法获得转基因植株 | 第38-41页 |
| ·转基因烟草植株的获得 | 第38-39页 |
| ·潮霉素筛选阳性转基因植株 | 第39页 |
| ·分子生物学方法鉴定阳性转基因植株 | 第39-40页 |
| ·RT-PCR 检测干扰基因的表达量 | 第40-41页 |
| ·转基因烟草黑胫病接病性状 | 第41-43页 |
| 第四章 讨论 | 第43-46页 |
| ·RNA 干涉载体构建体系的优化 | 第43页 |
| ·RNA 干涉载体的构建及其转化效果分析可用于进一步基因功能研究 | 第43-44页 |
| ·发卡 RNA 干涉载体具有较好的沉默效率 | 第44页 |
| ·黑胫病有关研究 | 第44-46页 |
| 第五章 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-54页 |
| 附录 | 第54-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 作者简历 | 第57页 |