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乙酰胆碱受体α-亚基胞外编码区(AChRα211)的表达及其基因免疫

目录第1-7页
摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
第一章 乙酰胆碱受体与重症肌无力(综述)第11-23页
 1 引言第11页
 2 乙酰胆碱受体结构与功能第11-16页
   ·乙酰胆碱受体的结构第11-12页
   ·乙酰胆碱受体的作用机理第12-14页
   ·乙酰胆碱受体结构与功能关系的研究第14-16页
 3 重症肌无力形成机理及其治疗战略第16-20页
   ·重症肌无力的形成机理第16-18页
   ·重症肌无力的细胞免疫机理第18页
   ·重症肌无力的可能治疗方法第18-20页
 参考文献第20-23页
第二章 AChRα亚基N端主要免疫区阅读框的克隆及表达第23-53页
 1 材料第23-25页
   ·菌株与质粒第23-24页
   ·工具酶及主要生化试剂第24页
   ·免疫分析试剂第24页
   ·主要试剂配制第24页
   ·主要仪器第24-25页
 2 方法第25-40页
   ·pUC-AChR_(α205)重组质粒的构建及在大肠杆菌JM109中的表达第25-29页
   ·pUC-AChR_(α205)的改造:pUC-CBD-AChR_(α211)重组质粒的构建及表达第29-34页
   ·pET-AChR_(α211)重组质粒的构建及在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达第34-36页
   ·pET-CBD-AChR_(α211)重组质粒的构建及其表达和复性研究第36-40页
 3 实验结果第40-48页
   ·pUC-AChR_(α205)重组质粒的构建及在大肠杆菌JM109中的表达第40-41页
   ·pUC-AChR_(α205)的改造:pUC-CBD-AChR_(α211)重组质粒的构建及表达第41-44页
   ·pET-AChR_(α211)重组质粒的构建及在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达第44-46页
   ·pET-AChR_(α211)重组质粒的构建及其表达和复性研究第46-48页
 4 实验讨论第48-50页
 参考文献第50-53页
第三章 核酸疫苗(综述)第53-65页
 1 引言第53页
 2 核酸疫苗的优势第53-55页
 3 核酸疫苗的发展第55-56页
 4 核酸疫苗可能的作用机理第56页
 5 核酸疫苗的注射途径和方法第56-58页
   ·注射途径第57-58页
   ·接种方法第58页
 6 免疫保护效应的评价第58-60页
   ·细胞免疫检测第58-59页
   ·体液免疫检测第59页
   ·保护率的测定第59-60页
 7 核酸疫苗的安全性问题第60-61页
   ·抗DNA抗体第60页
   ·持续表达外源抗原可能产生的不良后果第60页
   ·宿主细胞恶性转化第60-61页
 8 应用现状及展望第61页
 参考文献第61-65页
第四章 核酸疫苗pcDNA-AChR_(α211)免疫C57BL/6小鼠所诱导的体液免疫应答第65-75页
 1 实验材料第65-66页
   ·菌株与质粒第65页
   ·实验动物第65页
   ·工具酶及主要生化试剂第65-66页
   ·免疫分析试剂第66页
   ·主要试剂配制第66页
 2 实验方法第66-70页
   ·核酸疫苗pcDNA-AChR_(α211)的构建第66-68页
   ·重组质粒的大量提取及纯化第68页
   ·重组质粒的免疫接种第68-69页
   ·抗血清的制备第69页
   ·小鼠血清中AChRAb的ELISA检测第69页
   ·小鼠组织DNA的提取第69-70页
   ·PCR检测组织中的目的基因第70页
 3 实验结果第70-73页
   ·重组质粒pUC-AChR_(α205)的鉴定第70页
   ·重组质粒pcDNA-AChR_(α211)的纯化及定量第70页
   ·临床症状第70-71页
   ·血清中AChRAb的检测第71页
   ·组织中目的基因的检测及序列测定第71-73页
 4 实验讨论第73-74页
 参考文献第74-75页
附录一 基本方法与技术第75-83页
 1 各种试剂的配置第75页
 2 E.coli感受态细胞的制备第75-76页
 3 碱裂解法小量制备质粒DNA第76-77页
 4 考马斯亮蓝染色法(Bradford法)第77-78页
 5 Western Blot和ELISA第78-81页
 6 实验动物的取血方法第81页
 7 小鼠组织DNA的提取第81-83页
附录二 攻读硕士学位期间发表的论文第83-85页
致谢第85-86页
承诺书第86页

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