目录 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第一章 乙酰胆碱受体与重症肌无力(综述) | 第11-23页 |
1 引言 | 第11页 |
2 乙酰胆碱受体结构与功能 | 第11-16页 |
·乙酰胆碱受体的结构 | 第11-12页 |
·乙酰胆碱受体的作用机理 | 第12-14页 |
·乙酰胆碱受体结构与功能关系的研究 | 第14-16页 |
3 重症肌无力形成机理及其治疗战略 | 第16-20页 |
·重症肌无力的形成机理 | 第16-18页 |
·重症肌无力的细胞免疫机理 | 第18页 |
·重症肌无力的可能治疗方法 | 第18-20页 |
参考文献 | 第20-23页 |
第二章 AChRα亚基N端主要免疫区阅读框的克隆及表达 | 第23-53页 |
1 材料 | 第23-25页 |
·菌株与质粒 | 第23-24页 |
·工具酶及主要生化试剂 | 第24页 |
·免疫分析试剂 | 第24页 |
·主要试剂配制 | 第24页 |
·主要仪器 | 第24-25页 |
2 方法 | 第25-40页 |
·pUC-AChR_(α205)重组质粒的构建及在大肠杆菌JM109中的表达 | 第25-29页 |
·pUC-AChR_(α205)的改造:pUC-CBD-AChR_(α211)重组质粒的构建及表达 | 第29-34页 |
·pET-AChR_(α211)重组质粒的构建及在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达 | 第34-36页 |
·pET-CBD-AChR_(α211)重组质粒的构建及其表达和复性研究 | 第36-40页 |
3 实验结果 | 第40-48页 |
·pUC-AChR_(α205)重组质粒的构建及在大肠杆菌JM109中的表达 | 第40-41页 |
·pUC-AChR_(α205)的改造:pUC-CBD-AChR_(α211)重组质粒的构建及表达 | 第41-44页 |
·pET-AChR_(α211)重组质粒的构建及在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达 | 第44-46页 |
·pET-AChR_(α211)重组质粒的构建及其表达和复性研究 | 第46-48页 |
4 实验讨论 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-53页 |
第三章 核酸疫苗(综述) | 第53-65页 |
1 引言 | 第53页 |
2 核酸疫苗的优势 | 第53-55页 |
3 核酸疫苗的发展 | 第55-56页 |
4 核酸疫苗可能的作用机理 | 第56页 |
5 核酸疫苗的注射途径和方法 | 第56-58页 |
·注射途径 | 第57-58页 |
·接种方法 | 第58页 |
6 免疫保护效应的评价 | 第58-60页 |
·细胞免疫检测 | 第58-59页 |
·体液免疫检测 | 第59页 |
·保护率的测定 | 第59-60页 |
7 核酸疫苗的安全性问题 | 第60-61页 |
·抗DNA抗体 | 第60页 |
·持续表达外源抗原可能产生的不良后果 | 第60页 |
·宿主细胞恶性转化 | 第60-61页 |
8 应用现状及展望 | 第61页 |
参考文献 | 第61-65页 |
第四章 核酸疫苗pcDNA-AChR_(α211)免疫C57BL/6小鼠所诱导的体液免疫应答 | 第65-75页 |
1 实验材料 | 第65-66页 |
·菌株与质粒 | 第65页 |
·实验动物 | 第65页 |
·工具酶及主要生化试剂 | 第65-66页 |
·免疫分析试剂 | 第66页 |
·主要试剂配制 | 第66页 |
2 实验方法 | 第66-70页 |
·核酸疫苗pcDNA-AChR_(α211)的构建 | 第66-68页 |
·重组质粒的大量提取及纯化 | 第68页 |
·重组质粒的免疫接种 | 第68-69页 |
·抗血清的制备 | 第69页 |
·小鼠血清中AChRAb的ELISA检测 | 第69页 |
·小鼠组织DNA的提取 | 第69-70页 |
·PCR检测组织中的目的基因 | 第70页 |
3 实验结果 | 第70-73页 |
·重组质粒pUC-AChR_(α205)的鉴定 | 第70页 |
·重组质粒pcDNA-AChR_(α211)的纯化及定量 | 第70页 |
·临床症状 | 第70-71页 |
·血清中AChRAb的检测 | 第71页 |
·组织中目的基因的检测及序列测定 | 第71-73页 |
4 实验讨论 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-75页 |
附录一 基本方法与技术 | 第75-83页 |
1 各种试剂的配置 | 第75页 |
2 E.coli感受态细胞的制备 | 第75-76页 |
3 碱裂解法小量制备质粒DNA | 第76-77页 |
4 考马斯亮蓝染色法(Bradford法) | 第77-78页 |
5 Western Blot和ELISA | 第78-81页 |
6 实验动物的取血方法 | 第81页 |
7 小鼠组织DNA的提取 | 第81-83页 |
附录二 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第83-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
承诺书 | 第86页 |