| 第一章 羧肽酶B的研究进展 | 第1-17页 |
| ·羧肽酶的分类 | 第12页 |
| ·羧肽酶B 的发现和命名 | 第12-13页 |
| ·羧肽酶B 的结构特征 | 第13页 |
| ·结构与功能的关系 | 第13-14页 |
| ·活化过程 | 第13-14页 |
| ·催化特性 | 第14页 |
| ·CPB 与疾病的关系 | 第14-15页 |
| ·CPB 的分离、纯化、重组表达与应用 | 第15-17页 |
| 第二章 实验部分 | 第17-50页 |
| ·试验材料 | 第17-20页 |
| ·材料 | 第17页 |
| ·试剂 | 第17页 |
| ·引物设计与合成 | 第17-18页 |
| ·主要仪器 | 第18-19页 |
| ·主要培养基 | 第19页 |
| ·主要溶液 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-30页 |
| ·胰腺组织总RNA 的提取 | 第20-21页 |
| ·第一链cDNA 合成 | 第21-22页 |
| ·目的基因的PCR 扩增与回收 | 第22-23页 |
| ·目的基因与载体的双酶切及回收 | 第23-24页 |
| ·双酶切回收产物的连接与转化 | 第24页 |
| ·DH5a 转化子的鉴定 | 第24-25页 |
| ·毕赤酵母GS115 的PEG1000 法转化与鉴定 | 第25-27页 |
| ·酵母重组子的摇瓶诱导表达与分析 | 第27页 |
| ·GS115-proCPB 酵母菌的发酵培养 | 第27-28页 |
| ·摇瓶诱导表达条件的优化 | 第28-29页 |
| ·表达产物的纯化及蛋白浓度测定 | 第29-30页 |
| ·重组CPB 的活性鉴定 | 第30页 |
| ·实验结果 | 第30-45页 |
| ·SD 鼠总RNA 的提取与第一链cDNA 的合成 | 第30页 |
| ·proCPB 基因的扩增及优化 | 第30-31页 |
| ·重组质粒的构建与鉴定 | 第31-35页 |
| ·毕赤酵母的转化与酵母重组子的鉴定 | 第35页 |
| ·毕赤酵母重组子在摇瓶中的诱导表达 | 第35-37页 |
| ·摇瓶诱导表达条件的优化 | 第37-41页 |
| ·GS115-proCPB56 酵母工程菌的发酵培养 | 第41-42页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第42-44页 |
| ·重组CPB 的活性鉴定 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-50页 |
| ·胰腺组织总RNA 的提取 | 第45页 |
| ·巴斯德毕赤酵母菌的转化 | 第45页 |
| ·外源蛋白在巴斯德毕赤酵母中的表达 | 第45-46页 |
| ·巴斯德毕赤酵母工程菌的摇瓶诱导条件 | 第46-47页 |
| ·巴斯德毕赤酵母工程菌在5 升发酵罐中的发酵条件 | 第47-49页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第49-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 附录 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 个人简介 | 第59页 |
