| 第一章 文献综述 | 第1-44页 |
| ·前言 | 第10页 |
| ·液相色谱固定相的研究进展 | 第10-16页 |
| ·传统色谱介质 | 第10-14页 |
| ·无机基质固定相 | 第11-13页 |
| ·有机高分子固定相 | 第13-14页 |
| ·流通色谱介质 | 第14-16页 |
| ·液相色谱手性固定相的研究进展 | 第16-30页 |
| ·“刷型”手性色谱固定相 | 第18-20页 |
| ·第一代“刷型”固定相 | 第19页 |
| ·第二代 Pirkle CSP | 第19页 |
| ·第三代 Pirkle CSP | 第19-20页 |
| ·Pirkle CSP 的拆分机理 | 第20页 |
| ·蛋白质类手性色谱固定相 | 第20-24页 |
| ·大环类手性色谱固定相 | 第24-27页 |
| ·β-环糊精类色谱固定相 | 第24-27页 |
| ·其它大环类手性色谱固定相 | 第27页 |
| ·纤维素及其衍生物类手性色谱固定相 | 第27-29页 |
| ·配体交换(LEC)手性色谱固定相 | 第29-30页 |
| ·人工合成的聚合物手性色谱固定相 | 第30页 |
| ·质粒DNA 及核酸疫苗分离纯化的研究进展 | 第30-42页 |
| ·质粒的大规模分离纯化过程 | 第33页 |
| ·细胞裂解和质粒提取液的制备 | 第33-34页 |
| ·质粒提取液的净化和浓缩 | 第34-35页 |
| ·质粒的色谱纯化 | 第35-42页 |
| ·离子交换色谱 | 第37-38页 |
| ·体积排阻色谱 | 第38-39页 |
| ·疏水性作用色谱 | 第39-40页 |
| ·反相色谱 | 第40-41页 |
| ·亲和色谱 | 第41-42页 |
| ·本文的主要内容 | 第42-44页 |
| 第二章 蛋白质手性色谱固定相的合成及其性能 | 第44-56页 |
| ·前言 | 第44-45页 |
| ·实验器材与方法 | 第45-50页 |
| ·实验试剂及器材 | 第45页 |
| ·蛋白质手性色谱固定相的合成 | 第45-48页 |
| ·双孔微球的制备 | 第45-46页 |
| ·致孔剂的脱除 | 第46-47页 |
| ·用蛋白质对基质进行修饰 | 第47-48页 |
| ·双孔球形分离介质的结构表征 | 第48-49页 |
| ·粒径分布分析 | 第48页 |
| ·微观结构分析 | 第48页 |
| ·孔径分布分析 | 第48页 |
| ·含水量的测定 | 第48-49页 |
| ·湿密度的测定 | 第49页 |
| ·色谱实验 | 第49-50页 |
| ·流动性能 | 第49-50页 |
| ·手性分离 | 第50页 |
| ·结果与讨论 | 第50-55页 |
| ·介质的孔结构和物理性能 | 第50-51页 |
| ·介质的流动性能 | 第51-52页 |
| ·蛋白质手性柱对色氨酸的分离 | 第52-55页 |
| ·结论 | 第55-56页 |
| 第三章 硫酸铵和氯化钙对质粒提取的影响 | 第56-67页 |
| ·前言 | 第56页 |
| ·实验器材与方法 | 第56-61页 |
| ·实验试剂及器材 | 第56页 |
| ·菌种与质粒 | 第56-57页 |
| ·质粒菌的培养 | 第57-58页 |
| ·质粒纯品的制备 | 第58页 |
| ·质粒粗品的制备 | 第58-59页 |
| ·用硫酸铵沉淀质粒提取液中的蛋白质和 RNA | 第59-60页 |
| ·用氯化钙沉淀质粒裂解液中的蛋白质和 RNA | 第60页 |
| ·分析方法 | 第60-61页 |
| ·核酸的定量分析 | 第60页 |
| ·质粒产品中蛋白质含量的测定 | 第60-61页 |
| ·实验结果与讨论 | 第61-66页 |
| ·质粒浓度的测定 | 第61-63页 |
| ·硫酸铵对质粒提取的影响 | 第63-65页 |
| ·氯化钙对质粒提取的影响 | 第65-66页 |
| ·结论 | 第66-67页 |
| 第四章 双孔型疏水性介质的制备及其对质粒的纯化 | 第67-80页 |
| ·前言 | 第67-68页 |
| ·实验器材与方法 | 第68-70页 |
| ·实验试剂及器材 | 第68页 |
| ·菌种与质粒 | 第68页 |
| ·双孔球形分离介质的结构表征 | 第68页 |
| ·疏水色谱固定相的制备 | 第68-69页 |
| ·基质的制备 | 第68页 |
| ·基质的修饰 | 第68-69页 |
| ·质粒菌的培养及质粒提取液的制备 | 第69页 |
| ·质粒纯品的制备 | 第69页 |
| ·色谱实验 | 第69页 |
| ·分析方法 | 第69-70页 |
| ·核酸的定性、定量分析 | 第69-70页 |
| ·质粒样品中蛋白质含量的测定 | 第70页 |
| ·结果与讨论 | 第70-79页 |
| ·介质的物理特性及流体力学特性 | 第70-73页 |
| ·疏水性色谱介质对质粒的纯化 | 第73-79页 |
| ·硫酸铵的浓度对分离效果的影响 | 第73-75页 |
| ·高流速下对质粒进行纯化 | 第75-79页 |
| ·结论 | 第79-80页 |
| 第五章 以巯基吡啶为配基的固定相的制备及对质粒的纯化 | 第80-91页 |
| ·前言 | 第80页 |
| ·实验器材与方法 | 第80-82页 |
| ·实验试剂及器材 | 第80页 |
| ·菌种及质粒 | 第80页 |
| ·介质的制备 | 第80-81页 |
| ·基质的制备 | 第80页 |
| ·基质的修饰 | 第80-81页 |
| ·介质的配基修饰密度 | 第81页 |
| ·双孔球形分离介质的结构表征 | 第81页 |
| ·质粒菌的培养及质粒提取液的制备 | 第81页 |
| ·质粒纯品的制备 | 第81页 |
| ·色谱实验 | 第81-82页 |
| ·分析方法 | 第82页 |
| ·核酸的定性与定量分析 | 第82页 |
| ·质粒产品中蛋白质含量的测定 | 第82页 |
| ·结果与讨论 | 第82-90页 |
| ·介质的物理特性 | 第82页 |
| ·以巯基吡啶为配基的双孔型介质对质粒的纯化 | 第82-90页 |
| ·硫酸铵对质粒、RNA 和蛋白质吸附性能的影响 | 第82-85页 |
| ·巯基吡啶的修饰对基质分离性能的影响 | 第85-86页 |
| ·分离机理的探讨 | 第86-87页 |
| ·高流速下对质粒的分离 | 第87-90页 |
| ·结论 | 第90-91页 |
| 第六章 结论与展望 | 第91-93页 |
| ·结论 | 第91-92页 |
| ·对今后工作的建议与展望 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-109页 |
| 博士期间发表的论文和参加的科研项目 | 第109-110页 |
| 附录 | 第110-114页 |
| 附录 1 BSA 标准曲线的绘制 | 第110-111页 |
| 附录 2 质粒DNA 标准曲线的绘制 | 第111-112页 |
| 附录 3 BRADFORD 法测定蛋白质浓度标准曲线的绘制 | 第112-113页 |
| 附录 4 几种缓冲液的配制 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114页 |