第一章 序言 | 第1-21页 |
·研究背景 | 第12-13页 |
·国内外研究现状 | 第13-19页 |
·口蹄疫基因疫苗的构成 | 第13-14页 |
·口蹄疫基因疫苗的免疫机理 | 第14-15页 |
·口蹄疫基因疫苗的不同免疫形式 | 第15-17页 |
·免疫佐剂在口蹄疫基因疫苗研究中的应用 | 第17-19页 |
·研究目的及意义 | 第19-21页 |
第二章 口蹄疫病毒China99株真核表达质粒的构建 | 第21-32页 |
·材料与方法 | 第22-28页 |
·菌株与质粒 | 第22页 |
·主要试剂 | 第22页 |
·主要仪器 | 第22页 |
·FMDV China99株P12X基因(片段Ⅰ)的PCR扩增 | 第22-23页 |
·FMDV China99株P1'2X3C基因(片段Ⅱ)的PCR扩增 | 第23页 |
·P12X3C基因(片段Ⅲ)的PCR扩增 | 第23页 |
·FMDV China99株P12X3C基因的PCR扩增 | 第23-25页 |
·FMDV China99株3D基因的PCR扩增 | 第25页 |
·P12X3C3D基因的PCR扩增 | 第25页 |
·重组质粒的构建、克隆及检测 | 第25-28页 |
·结果 | 第28-30页 |
·片段Ⅰ、片段Ⅱ和片段Ⅲ的扩增及鉴定 | 第28页 |
·P12X3C、3D、P12X3C3D基因片段的扩增及鉴定 | 第28页 |
·重组质粒的构建、克隆及鉴定 | 第28-30页 |
·P12X3C3D基因的序列测定及分析 | 第30页 |
·讨论 | 第30-32页 |
第三章 口蹄疫病毒多基因重组质粒在BHK-21细胞中的表达 | 第32-39页 |
·材料与方法 | 第32-33页 |
·主要材料 | 第32-33页 |
·重组质粒的纯化回收 | 第33页 |
·BHK-21细胞的转染 | 第33页 |
·间接免疫荧光检测 | 第33页 |
·双抗体夹心ELISA检测 | 第33页 |
·病毒空衣壳的电镜观察 | 第33页 |
·结果 | 第33-36页 |
·夹心ELISA的检测结果 | 第33-35页 |
·间接免疫荧光检测结果 | 第35-36页 |
·口蹄疫病毒空衣壳的电镜观察 | 第36页 |
·讨论 | 第36-39页 |
第四章 节口蹄疫裸基因疫苗对豚鼠的免疫效果研究 | 第39-47页 |
·材料与方法 | 第39-42页 |
·质粒、病毒、实验动物 | 第39-40页 |
·主要试剂 | 第40页 |
·质粒大量提取 | 第40页 |
·实验动物免疫 | 第40-41页 |
·FMOV特异抗体检测 | 第41页 |
·血清中和抗体的检测 | 第41页 |
·豚鼠T淋巴细胞增殖试验 | 第41-42页 |
·攻毒试验 | 第42页 |
·结果 | 第42-44页 |
·FMOV特异抗体水平的动态变化 | 第42页 |
·血清中和抗体水平 | 第42-44页 |
·T淋巴细胞增殖试验 | 第44页 |
·攻毒试验 | 第44页 |
·讨论 | 第44-47页 |
第五章 口蹄疫基因苗多质粒混合免疫方式对豚鼠的免疫效果研究 | 第47-54页 |
·材料与方法 | 第47-50页 |
·质粒、病毒、实验动物 | 第47-48页 |
·主要试剂 | 第48页 |
·真核表达质粒pcDNA3.1/IFN的构建 | 第48-49页 |
·脂质体的制备 | 第49页 |
·质粒及脂质体-质粒混合液的制备 | 第49页 |
·实验动物免疫 | 第49页 |
·FMDV特异抗体的检测 | 第49-50页 |
·豚鼠T淋巴细胞增殖试验 | 第50页 |
·攻毒试验 | 第50页 |
·结果 | 第50-52页 |
·真核表达质粒pcDNA3.1/IFN的构建 | 第50页 |
·脂质体形态观察 | 第50-51页 |
·FMDV特异抗体水平的动态变化 | 第51-52页 |
·T淋巴细胞增殖试验 | 第52页 |
·攻毒试验 | 第52页 |
·讨论 | 第52-54页 |
第六章 口蹄疫基因疫苗对牛的免疫效果研究 | 第54-59页 |
·材料与方法 | 第54-56页 |
·质粒、病毒、实验动物 | 第54-55页 |
·主要试剂 | 第55页 |
·脂质体的制备 | 第55页 |
·质粒及脂质体-质粒混合液的制备 | 第55页 |
·实验动物免疫 | 第55页 |
·FMOV特异抗体的检测 | 第55页 |
·周血淋巴细胞增殖试验 | 第55-56页 |
·试验 | 第56页 |
·结果 | 第56-57页 |
·DV特异抗体水平 | 第56页 |
·淋巴细胞增殖试验 | 第56-57页 |
·毒试验 | 第57页 |
·讨论 | 第57-59页 |
第七章 结论 | 第59-60页 |
第八章 文献综述 | 第60-77页 |
·基因疫苗的免疫机理 | 第60-61页 |
·一般特点 | 第60页 |
·肌肉注射及皮内基因枪接种基因疫苗的免疫机理 | 第60-61页 |
·基因疫苗免疫接种途径及方式 | 第61-64页 |
·免疫途径 | 第61-63页 |
·接种方式 | 第63-64页 |
·免疫佐剂在基因疫苗研究中的应用 | 第64-74页 |
·细胞因子 | 第65-67页 |
·CpG DNA | 第67-69页 |
·化学佐剂 | 第69-72页 |
·共刺激信号分子 | 第72页 |
·化学因子 | 第72页 |
·黏附分子 | 第72-73页 |
·弱化细菌体 | 第73页 |
·病毒载体 | 第73-74页 |
·基因疫苗研究新进展 | 第74-76页 |
·基因组免疫(genomic immunization)或表达库免疫(expression library immunization,ELI) | 第74页 |
·基因免疫毒素(genetic immunotoxin) | 第74页 |
·mRNA基因免疫 | 第74-75页 |
·基因疫苗靶向细胞腔或细胞表面(Targeting DNA vaccine to cellular compartment or the cell surface) | 第75页 |
·嵌合抗原DNA(DNA for chimeric antigens) | 第75-76页 |
·DNA初免-蛋白/病毒加强免疫(DNA prime-protein/viral boost immunization) | 第76页 |
·基因疫苗的应用前景 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-90页 |
致谢 | 第90-91页 |
附录 | 第91-103页 |
作者简历 | 第103页 |