| 中文摘要 | 第1-3页 |
| 英文摘要 | 第3-7页 |
| 第一章 前言 | 第7-19页 |
| ·野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris pv.campestris)的概述 | 第7页 |
| ·胞外多糖(EPS) | 第7-8页 |
| ·胞外多糖(EPS)与致病性的关系 | 第8-9页 |
| ·Xcc胞外多糖(EPS)的分子结构 | 第9-10页 |
| ·胞外多糖(EPS)的生物合成及调控 | 第10-15页 |
| ·胞外多糖的粘度 | 第15页 |
| ·黄单胞菌色素 | 第15-17页 |
| ·Tn5gusA5转座子 | 第17-18页 |
| ·本研究工作的目的、内容及意义 | 第18-19页 |
| ·研究内容 | 第18页 |
| ·目的意义 | 第18-19页 |
| 第二章 材料与方法 | 第19-38页 |
| ·培养基及培养条件 | 第19-20页 |
| ·培养基 | 第19页 |
| ·培养条件 | 第19-20页 |
| ·抗菌素 | 第20页 |
| ·溶液，缓冲液和试剂 | 第20-21页 |
| ·总DNA的提取 | 第21页 |
| ·DNA质粒的提取 | 第21页 |
| ·限制性内切酶酶切 | 第21页 |
| ·DNA连接 | 第21-22页 |
| ·转化 | 第22页 |
| ·三亲本接合 | 第22-23页 |
| ·RNA操作 | 第23-24页 |
| ·试验器具的处理 | 第23页 |
| ·溶液处理 | 第23页 |
| ·操作过程注意事项 | 第23页 |
| ·Xcc细胞总RNA的提取 | 第23-24页 |
| ·RNA中DNA的去除 | 第24页 |
| ·直接从细胞中少量快速提取总DNA | 第24页 |
| ·RNA浓度及纯度的测定 | 第24页 |
| ·RNA快速电泳检测 | 第24页 |
| ·PCR反应 | 第24-33页 |
| ·TAIL-PCR用于扩增Tn5 gusA5旁测序列 | 第24-27页 |
| ·RT-PCR反应 | 第27-31页 |
| ·整合突变体引物 | 第31页 |
| ·常规反应PCR反应 | 第31-33页 |
| ·重复 | 第33页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第33页 |
| ·DNA的回收 | 第33-34页 |
| ·电洗脱法回收DNA片段 | 第33-34页 |
| ·PCR扩增产物回收 | 第34页 |
| ·ABI DNA自动测序系统测定DNA序列 | 第34-35页 |
| ·胞外多糖的分离与提纯 | 第35页 |
| ·胞外多糖纯度鉴定采用凝胶过滤法 | 第35页 |
| ·胞外多糖理化特性测定 | 第35-36页 |
| ·胞外多糖的特性粘度测定 | 第35页 |
| ·胞外多糖的组分测定 | 第35-36页 |
| ·胞外酶的平板定性检测 | 第36-37页 |
| ·胞外蛋白酶的检测 | 第36页 |
| ·胞外纤维素酶的检测 | 第36-37页 |
| ·胞外淀粉酶的检测 | 第37页 |
| ·色素的测定 | 第37页 |
| ·DSF因子检测 | 第37-38页 |
| 第三章 结果与分析 | 第38-48页 |
| ·Tn5gusA5转座子的极性效应 | 第38-48页 |
| ·Xcc8004及其gum基因突变体的总RNA | 第38页 |
| ·RT-PCR扩增的gum基因簇中的gum基因的DNA片段 | 第38-42页 |
| ·单一gum基因的Tn5gusA5插入位点前后的RT-PCR扩增的DNA片断 | 第42-48页 |
| 第四章 讨论 | 第48-49页 |
| 第五章 结果与分析 | 第49-76页 |
| ·Tn5gusA5突变体在Xcc8004基因组上插入的定位 | 第49-50页 |
| ·通过TAIL-PCR扩增Tn5gusA5旁侧序列: | 第49-50页 |
| ·Tn5gusA5旁侧序列的测定 | 第50页 |
| ·插入突变体的GUS的活性 | 第50-51页 |
| ·营养缺陷型鉴定 | 第51页 |
| ·插入突变体的DSF | 第51-53页 |
| ·插入突变体的胞外酶产量 | 第53-54页 |
| ·插入突变体的胞外多糖产量 | 第54-55页 |
| ·插入突变体和Xcc8004的色素产量 | 第55-56页 |
| ·黄原胶的粘度 | 第56-57页 |
| ·胞外多糖的组份 | 第57-61页 |
| ·测定结果 | 第57-60页 |
| ·测定计算结果: | 第60-61页 |
| ·gumA-gumB间隔区的转录区段 | 第61-67页 |
| ·Tn5gusA5插入突变体及Xcc8004的总RNA | 第62页 |
| ·Tn5gusA5插入突变体TGL243转录区段的RT-PCR | 第62-63页 |
| ·Tn5gusA5插入突变体TGL243位点前后的RT-PCR | 第63-64页 |
| ·Tn5gusA5插入突变体TGL233转录区段的RT-PCR | 第64-66页 |
| ·Tn5gusA5插入突变体TGL233位点前后的RT-PCR | 第66-67页 |
| ·ORF243和ORF233与gum操纵子 | 第67-68页 |
| ·ORF243和ORF233的整合突变体 | 第68-72页 |
| ·ORF243和ORF233的内嵌DNA | 第69-70页 |
| ·重组质粒的酶切 | 第70-71页 |
| ·三亲本接合 | 第71页 |
| ·标准PCR验证整合突变体 | 第71-72页 |
| ·整合突变体的色素 | 第72-74页 |
| ·整合突变体胞外多糖的粘度 | 第74-76页 |
| 第六章 讨论 | 第76-79页 |
| 参考文献 | 第79-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
