中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-12页 |
缩略词 | 第12-14页 |
前言 | 第14-17页 |
第1章 家蚕质多角体病毒RDRP 基因的序列测定 | 第17-43页 |
·材料 | 第17-19页 |
·BmCPV(C)病毒多角体的繁殖与纯化 | 第17页 |
·质粒和菌株 | 第17-18页 |
·缓冲液 | 第18-19页 |
·培养基 | 第19页 |
·限制性内切酶及其它工具酶 | 第19页 |
·试剂盒 | 第19页 |
·方法 | 第19-24页 |
·BmCPV(C)总dsRNA 的提取 | 第19-20页 |
·BmCPV(C)的RDRP 基因RT-PCR | 第20-21页 |
·PCR 产物与pMD18-T 载体连接 | 第21-22页 |
·TG1 感受态细胞的制备 | 第22页 |
·质粒DNA 的转化 | 第22页 |
·质粒DNA 的纯化 | 第22-23页 |
·质粒DNA的鉴定 | 第23-24页 |
·BmCPV(C)的RDRP 基因ORF 序列测定 | 第24页 |
·BmCPV(C)的RDRP 基因ORF 序列及同源性分析 | 第24页 |
·结果与分析 | 第24-38页 |
·BmCPV(C)的RDRP 基因RT-PCR | 第24-25页 |
·BmCPV(C) RDRP 基因 PCR 产物的克隆和重组质粒的酶切鉴定 | 第25-26页 |
·BmCPV(C) RDRP 基因的测序及序列分析 | 第26-33页 |
·BmCPV(C) RDRP 基因的同源性比较及分子进化分析 | 第33-35页 |
·质多角体病毒 RDRP 基因的保守序列分析 | 第35-38页 |
·小结 | 第38-39页 |
·讨论 | 第39-43页 |
·RT-PCR | 第39-40页 |
·质多角体病毒 RDRP 核苷酸和氨基酸同源性分析 | 第40-43页 |
第2章 BmCPV(C) RDRP 基因在原核系统中的表达 | 第43-68页 |
·材料 | 第43-46页 |
·质粒和菌株 | 第43-44页 |
·培养基 | 第44页 |
·缓冲液 | 第44-45页 |
·工具酶及相关试剂 | 第45-46页 |
·试剂盒 | 第46页 |
·方法 | 第46-51页 |
·BmCPV(C)的 RDRP 表达引物的设计 | 第46页 |
·BmCPV(C)的 RDRP 逆转录反应 | 第46页 |
·PCR 扩增双链 DNA | 第46页 |
·PCR 产物的回收纯化 | 第46-47页 |
·PCR 产物与pMD18-T 载体连接 | 第47页 |
·TG1 感受态细胞的制备 | 第47页 |
·质粒DNA的转化 | 第47页 |
·质粒DNA 的Kit 提取及纯化 | 第47页 |
·质粒DNA的酶切 | 第47-48页 |
·BmCPV(C)的RDRP 基因的拼接 | 第48-49页 |
·DE3感受态细胞的制备 | 第49页 |
·BmCPV(C) RDRP 基因在大肠杆菌中的表达 | 第49-50页 |
·表达产物的检测 | 第50页 |
·透射电镜的观察 | 第50页 |
·融合蛋白的可溶性鉴定 | 第50-51页 |
·抗血清的制备及检测 | 第51页 |
·结果 | 第51-64页 |
·BmCPV(C) RDRP 基因引物设计 | 第51-56页 |
·BmCPV(C) RDRP 基因的分段逆转录及PCR 扩增 | 第56-57页 |
·BmCPV(C) RDRP 基因的分段酶切鉴定 | 第57-58页 |
·BmCPV(C) RDRP 基因的拼接及鉴定 | 第58-59页 |
·pET286-RDRP 表达载体的构建 | 第59页 |
·BmCPV(C) RDRP 基因在大肠杆菌中的表达 | 第59-61页 |
·透射电镜的观察 | 第61-62页 |
·融合蛋白的可溶性鉴定 | 第62-63页 |
·BmCPV(C)-RDRP 抗体的制备及检测 | 第63-64页 |
·小结 | 第64-65页 |
·讨论 | 第65-68页 |
·表达载体的构建 | 第65页 |
·重组蛋白的诱导表达 | 第65-68页 |
第3章 BmCPV(C) RDRP 的免疫电镜定位研究 | 第68-82页 |
·材料 | 第68-70页 |
·实验材料 | 第68页 |
·试剂 | 第68-69页 |
·仪器 | 第69-70页 |
·方法 | 第70-72页 |
·BmCPV(C)病毒多角体的扫描电镜观察 | 第70页 |
·BmCPV(C)病毒粒子的电镜负染色观察 | 第70页 |
·免疫电镜样品制备 | 第70-71页 |
·免疫标记 | 第71-72页 |
·透射电镜定位观察 | 第72页 |
·结果 | 第72-77页 |
·BmCPV(C)病毒多角体的扫描观察 | 第72-73页 |
·BmCPV(C)病毒粒子的电镜负染色观察 | 第73-74页 |
·BmCPV(C) RDRP 蛋白的定位 | 第74-77页 |
·小结 | 第77-78页 |
·讨论 | 第78-82页 |
·免疫电镜样品制备 | 第78-79页 |
·胶体金标记率分析 | 第79-80页 |
·抗体的处理和纯化 | 第80-81页 |
·免疫电镜定位 | 第81-82页 |
全文结论 | 第82-83页 |
第4章 昆虫质多角体病毒的研究进展 | 第83-100页 |
参考文献 | 第100-116页 |
致谢 | 第116-117页 |
原创性声明 | 第117页 |