| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第10-18页 |
| 1．1 CPV的研究概况 | 第10-15页 |
| 1．1．1 羊痘病的发病概况 | 第10页 |
| 1．1．2 CPV的基本特征 | 第10-11页 |
| 1．1．3 CPV的基因组结构 | 第11-12页 |
| 1．1．4 CPV各毒株之间的关系 | 第12-13页 |
| 1．1．5 CPV的诊断与预防 | 第13-15页 |
| 1．2 CPV的P32蛋白概述 | 第15-17页 |
| 1．2．1 P32分子生物学特征 | 第15-16页 |
| 1．2．2 P32的应用 | 第16-17页 |
| 1．3 研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-26页 |
| 2．1 材料 | 第18-19页 |
| 2．1．1 种毒与细胞 | 第18页 |
| 2．1．2 真核及原核表达系统 | 第18页 |
| 2．1．3 羊胎皮肤细胞以及细胞培养基的制备 | 第18页 |
| 2．1．4 引物的设计与合成 | 第18-19页 |
| 2．1．5 主要试剂 | 第19页 |
| 2．1．6 主要实验仪器设备 | 第19页 |
| 2．2 实验方法 | 第19-26页 |
| 2．2．1 组织病料的处理及其病毒DNA的提取 | 第19-20页 |
| 2．2．2 山羊痘疫苗毒的培养以及病毒 DNA的提取 | 第20页 |
| 2．2．3 目的片段的PCR扩增及引物特异性鉴定 | 第20页 |
| 2．2．4 P32基因的克隆与鉴定 | 第20-22页 |
| 2．2．5 P32基因的真核表达 | 第22-24页 |
| 2．2．6 P32基因的原核表达 | 第24-25页 |
| 2．2．7 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第25-26页 |
| 3 实验结果 | 第26-33页 |
| 3．1 疫苗株CPV的培养 | 第26-27页 |
| 3．1．1 细胞病变 | 第26页 |
| 3．1．2 电镜观察 | 第26-27页 |
| 3．2 P32基因克隆及序列测定 | 第27-29页 |
| 3．2．1 PCR扩增结果 | 第27页 |
| 3．2．2 重组克隆载体的酶切鉴定 | 第27-28页 |
| 3．2．3 P32的序列测定及同源性比较 | 第28-29页 |
| 3．3 P32基因的真核表达结果 | 第29-30页 |
| 3．3．1 重组转移载体的鉴定 | 第29页 |
| 3．3．2 重组表达载体PCR鉴定结果 | 第29-30页 |
| 3．3．3 表达产物的SDS-PAGE | 第30页 |
| 3．4 P32基因的原核表达结果 | 第30-33页 |
| 3．4．1 重组表达载体的鉴定 | 第30-31页 |
| 3．4．2 表达产物的SDS-PAGE鉴定 | 第31-32页 |
| 3．4．3 pPRO-TRUNCP32表达效率 | 第32-33页 |
| 4 讨论 | 第33-35页 |
| 4．1 CPV的培养 | 第33页 |
| 4．2 CPV P32基因序列的保守性 | 第33页 |
| 4．3 引物P1/P2用于CPV核酸诊断的可行性 | 第33-34页 |
| 4．4 P32的表达 | 第34-35页 |
| 5 结论 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-43页 |
| 附录 | 第43-48页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49页 |