| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-19页 |
| 1 核盘菌及其引起的菌核病 | 第9-11页 |
| ·核盘菌的分布及其危害 | 第9页 |
| ·油菜核盘菌的危害症状和发病规律 | 第9-10页 |
| ·油菜菌核病的防治 | 第10-11页 |
| 2 盾壳霉及其防治核盘菌的研究 | 第11-15页 |
| ·盾壳霉的生态学特性 | 第11-12页 |
| ·盾壳霉的生物学特性 | 第12页 |
| ·盾壳霉的寄生特性及其寄生机制 | 第12-13页 |
| ·盾壳霉的生防前景 | 第13-15页 |
| 3 微生物几丁质酶及其防病作用的研究进展 | 第15-18页 |
| ·微生物几丁质酶的特性 | 第15-16页 |
| ·微生物几丁质酶基因的表达调控 | 第16页 |
| ·微生物几丁质酶在病害生物防治过程中的作用 | 第16-18页 |
| 4 研究目的和主要内容 | 第18-19页 |
| 第二章 盾壳霉产生几丁质酶的条件研究 | 第19-35页 |
| 1 材料和方法 | 第19-24页 |
| ·菌种 | 第19页 |
| ·盾壳霉的培养 | 第19页 |
| ·几丁质酶活性的测定 | 第19-20页 |
| ·试剂配制 | 第19页 |
| ·胶态几丁质的制备 | 第19页 |
| ·对二甲氨基苯甲醛(DMAB)的配制 | 第19页 |
| ·四硼酸钾溶液的配制 | 第19页 |
| ·几丁质酶的活力测定 | 第19-20页 |
| ·几丁质酶酶活性单位定义 | 第20页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第20-21页 |
| ·N一乙酰葡萄糖胺母液的配制 | 第20页 |
| ·标准曲线的制作 | 第20-21页 |
| ·盾壳霉产生几丁质酶的条件研究 | 第21-24页 |
| ·基础培养基的筛选 | 第21-22页 |
| ·盾壳霉产生几丁质酶最佳碳源的筛选 | 第22页 |
| ·葡萄糖浓度对盾壳霉产生几丁质酶的影响 | 第22页 |
| ·盾壳霉产生几丁质酶最佳氮源的筛选 | 第22页 |
| ·硝酸钾浓度对盾壳霉产生几丁质酶的影响 | 第22-23页 |
| ·盾壳霉产生几丁质酶的时间动态变化 | 第23页 |
| ·培养液pH对盾壳霉产生几丁质酶的影响 | 第23页 |
| ·盾壳霉接种量对盾壳霉产生几丁质酶的影响 | 第23页 |
| ·表面活性剂对盾壳霉产生几丁质酶的影响 | 第23页 |
| ·通气状况对盾壳霉产生几丁质酶的影响 | 第23-24页 |
| ·草酸毒素对盾壳霉产生几丁质酶的影响 | 第24页 |
| 2 结果与分析 | 第24-33页 |
| ·基础培养基的筛选 | 第24页 |
| ·盾壳霉产生几丁质酶最佳碳源的筛选结果 | 第24-26页 |
| ·葡萄糖浓度对盾壳霉产生几丁质酶的影响 | 第26页 |
| ·盾壳霉产生几丁质酶最佳氮源的筛选结果 | 第26-27页 |
| ·硝酸钾浓度对盾壳霉产生几丁质酶的影响 | 第27-28页 |
| ·盾壳霉产生几丁质酶的时间动态 | 第28页 |
| ·培养液pH值对盾壳霉产生几丁质酶的影响 | 第28页 |
| ·盾壳霉接种量对其产生几丁质酶的影响 | 第28-30页 |
| ·表面活性剂对盾壳霉产生几丁质酶的影响 | 第30-31页 |
| ·通气状况对盾壳霉几丁质酶产量和菌丝生长的影响 | 第31页 |
| ·草酸盾壳霉菌丝生长和几丁质酶产量的影响 | 第31-33页 |
| 3 讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 盾壳霉几丁质酶基本性质的研究 | 第35-44页 |
| 1 材料与方法 | 第35-37页 |
| ·盾壳霉几丁质酶粗酶液的制备 | 第35页 |
| ·盐析沉淀浓缩酶蛋白 | 第35页 |
| ·透析去盐获得粗酶液 | 第35页 |
| ·盾壳霉几丁质酶基本性质的试验设计 | 第35-37页 |
| ·盾壳霉几丁质酶酶促反应最适温度测定 | 第35-36页 |
| ·几丁质酶酶促反应最适pH值的测定 | 第36页 |
| ·几丁质酶热稳定性试验 | 第36页 |
| ·几丁质酶的酸碱稳定性试验 | 第36页 |
| ·金属离子对几丁质酶的影响 | 第36页 |
| ·钾离子、钙离子和铜离子浓度对盾壳霉几丁质酶活性的影响 | 第36页 |
| ·硼酸对盾壳霉几丁质酶活性的影响 | 第36-37页 |
| ·草酸对盾壳霉几丁质酶酶活性的影响 | 第37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-43页 |
| ·温度对几丁质酶酶解反应的影响 | 第37-38页 |
| ·pH值对几丁质酶酶解反应的影响 | 第38页 |
| ·盾壳霉几丁质酶的热稳定性 | 第38页 |
| ·pH对盾壳霉几丁质酶稳定性的影响 | 第38-40页 |
| ·金属离子对几丁质酶活力的影响 | 第40页 |
| ·Ca~(2+)、K~+和Cu~(2+)等金属离子浓度对几丁质酶活性的影响 | 第40-41页 |
| ·硼酸对盾壳霉几丁质酶活性的影响 | 第41页 |
| ·草酸对盾壳霉几丁质酶活性的影响 | 第41-43页 |
| 3 讨论 | 第43-44页 |
| 第四章 几丁质酶的分离纯化 | 第44-53页 |
| 1 材料与方法 | 第44-48页 |
| ·盾壳霉的培养 | 第44页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第44-45页 |
| ·Bradford储存液的配制 | 第44页 |
| ·Bradford工作液的配制 | 第44页 |
| ·标准蛋白母液的配制 | 第44页 |
| ·标准曲线的制作 | 第44-45页 |
| ·几丁质酶活性测定 | 第45页 |
| ·几丁质酶纯化 | 第45-46页 |
| ·盾壳霉几丁质酶粗酶液的制备 | 第45页 |
| ·DEAE-Sepharose FF阴离子交换层析纯化几丁质酶 | 第45-46页 |
| ·树脂的准备 | 第45页 |
| ·层析柱装填 | 第45-46页 |
| ·样品上柱 | 第46页 |
| ·蛋白洗脱 | 第46页 |
| ·树脂的再生和储存 | 第46页 |
| ·几丁质酶的进一步纯化过滤 | 第46页 |
| ·几丁质酶纯度鉴定 | 第46-48页 |
| ·酶样的处理 | 第47页 |
| ·凝胶的制备 | 第47页 |
| ·分离胶和浓缩胶的灌制 | 第47页 |
| ·点样及电泳 | 第47页 |
| ·剥胶、染色及脱色 | 第47-48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-52页 |
| ·用DEAE-Sepharose FF层析的分离效果 | 第48-51页 |
| ·用Sephacryl S-300HR二次层析的纯化效果 | 第51页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳效果 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-53页 |
| 第五章 盾壳霉几丁质酶与核盘菌的关系研究 | 第53-55页 |
| 1 材料和方法 | 第53页 |
| ·盾壳霉寄生的核盘菌菌核中几丁质酶活性的检测 | 第53页 |
| ·盾壳霉几丁质酶粗酶液对核盘菌菌丝生长的影响 | 第53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-54页 |
| ·盾壳霉几丁质酶与寄生核盘菌菌核的关系 | 第53页 |
| ·盾壳霉几丁质酶对核盘菌菌丝生长的影响 | 第53-54页 |
| 3 讨论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
